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표적형 바이오마커 기반 선택적 위암 치료 기술 개발
Development of selective therapeutics for gastric cancer based on targetable biomarkers 원문보기

보고서 정보
주관연구기관 연세대학교
Yonsei University
연구책임자 허용민
참여연구자 정재호 , 정상전 , 박은성 , 오승재 , 김은주 , 강효진 , 박경호 , 기현정
보고서유형1단계보고서
발행국가대한민국
언어 한국어
발행년월2013-04
과제시작연도 2012
주관부처 미래창조과학부
Ministry of Science, ICT and Future Planning
등록번호 TRKO201700011878
과제고유번호 1345167483
사업명 바이오·의료기술개발
DB 구축일자 2017-11-04
키워드 위암.표적형 마커.예후.약물감수성.분자영상.면역어레이칩.약물전달시스템 인산화 항체.선택적 치료.gastric cancer.targetable biomarker.prognosis.drug susceptibility.molecular imaging.immuno-array chip.drug delivery system.phospho-antibody.selective therapy.
DOI https://doi.org/10.23000/TRKO201700011878

초록

가. 발굴된 표적형 마커의 고감도 생체 내 분자영상(MRI/PET 기반) 및 해당 마커를 활용한 지능형 약물 전달 시스템 원천기술 개발 (1세부과제)
● 고해상도 해부학적 정보와 고감도 분자영상을 위한 다중영상(MRI-PET) 표적지향형 프로브 개발
● 2세부에서 발굴한 표적형 마커 중 막단백질(e.g., HER2/neu, EGFR, FGFR 등)과 3세부에서 개발할 항체를 이용하여 단일/병용약물의 효과적 전달을 위한 지능형 약물전달시스템 개발
나. 발굴된 위암의 예후 예측 단백질의 검증 및 약물감수성 예측 단백질

Abstract

1. Research Object
Development of selective gastric cancer therapy and monitoring techniques by development of immuno-array chip and drug delivery system based on ultra-sensitive multi-molecular imaging through the verification of discovered prognostic and drug sensitive-predictable markers

목차 Contents

  • 표지 ... 1제 출 문 ... 2보고서 요약서 ... 3요 약 문 ... 4Summary ... 7CONTENTS ... 9목차 ... 13제1장 연구개발과제의 개요 ... 17 제1절 연구개발의 총괄개요 ... 17 제2절 연구개발의 중요성 ... 18 1. 경제적 중요성 ... 18 2. 기술적 중요성 ... 19 3. 산업적 중요성 ... 19 제3절 연구개발의 필요성 ... 20 1. MD-PhD 연구의 필요성 ... 20 2. 암 진단에 있어서 체외 및 체내 영상 진단의 통합(convergence)의 필요성 ... 20 3. 표적형 마커에 대한 분자영상 프로브 및 지능형 약물 전달시스템 개발의 필요성 ... 20 4. 위암의 진행 과정과 종양생물학적 특성의 이해 및 이에 기반한 분류의 필요성. ... 21 5. 위암의 수술후 보조항암치료제 적합성 관련 단백질의 발굴의 중요성 ... 21 6. 정교한 항체칩과 self-addressable 항체칩 제조기술 개발의 필요성 ... 22 7. 면역측정법 ... 22제2장 국내외 기술개발 현황 ... 23 제1절 해외연구사례 ... 23 제2절 국내연구사례 ... 26 제3절 현재기술의 취약성 ... 28제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 29 제1절 연구개발의 추진전략 및 방법 ... 29 제2절 고감도 다중영상 나노프로브 개발 ... 30 1. 고감도 영상 나노프로브 개발 ... 30 2. 광학 영상을 위한 무기 (금) 나노 입자를 개발 ... 31 3. 고감도 분자영상 기반 능동형 다중 영상 (MR-광학 영상) 나노 프로브를 개발 ... 32 제3절 위암 동물 모델 확립 ... 33 1. 위암 동물 제작에 이용한 세포주 선별을 위한 마커 발현율 평가 ... 33 2. 위암 동물 모델 확립 ... 36 3. 위암의 예후/진행 검증 in vivo 시스템 ... 38 4. In vivo에서 적출한 암 조직에서의 CD44의 발현 확인 ... 39 제4절 위암 세포주에서 항암제 프로필 생성 ... 41 1. Cisplatin에 대한 위암 세포주에서의 IC50 프로필의 생성 ... 41 2. 5-FU 에 대한 위암 세포주에서의 IC50 값 생성 ... 43 3. Taxol에 대한 위암 세포주에서의 IC50값 생성 ... 46 제5절 예후 마커 선택적인 항체 개발 ... 48 1. 항원 단백질의 설계 ... 48 2. 항원 단백질의 발현 ... 49 3. 각 항원에 대한 특이항체 제작 및 정제(5종) ... 51 4. 항체역가의 평가 ... 52 5. 항체의 정제 ... 52 6. 면역검출법 및 SPR을 이용한 항체의 해당항원결합력 측정 ... 54 제6절 항체 고정화 기술 최적화 ... 54 1. CM-덱스트란(Carboxy Methyl Dextran)의 제조 ... 54 2. 고품위 NHS 덱스트란 골드칩 제조 ... 55 3. 항체칩 제작 ... 56 4. 덱스트란 골드칩을 이용한 펩타이드칩 제작 및 확인 ... 57 제7절 지능형 분자영상 시스템 개발 ... 58 1. Hyaluronic acid (HA)가 도입된 다중 영상 (MR-PET) 나노 프로브 개발 ... 58 2. CD44 세포주 표적형 광학영상 나노 전달체 개발 ... 61 3. 위암 표적형 광학 영상 나노프로브 개발 ... 65 제8절 위암 동물 모델 기반 표적형 마커의 검증 ... 67 1. 표적형 다중 영상 프로브를 이용한 분자 영상 ... 67 제9절 위암 세포주의 단백질 프로필의 생성 및 항암제 저항성 관련 단백질의 발굴 ... 69 1. 위암 세포주에 대한 RPPA의 생성 ... 69 2. 위암 세포주 27개에 대한 유전체 프로필 생성 ... 70 3. 위암세포주의 기능성 프로테움 분석과 IC50값의 통합분석에 의한 항암제 저항성 및 약제 효능성 관련 단백질마커의 발굴 ... 71 4. 위암 세포주에서 표적치료제와 항암제와의 상관 관계 규명을 통한 위암에서 항암제 내성 극복을 위한 항암제 와 표적 치료제의 조합 발굴 ... 72 제10절 약물감수성마커 선택적인 항체 개발 ... 80 1. 항원 제작방법 ... 80 2. 항원 단백질의 발현 ... 80 3. 펩타이드 항원 제작 ... 87 4. 펩타이드 항원의 전처리 ... 88 5. 항체 제작 과정 ... 88 6. 항체의 역가 평가 ... 89 7. 항체의 정제 ... 89 8. 정제된 항체의 항원 결합력 평가 ... 89 제11절 항체칩 개발 ... 90 1. 약물 감수성마커 선택적인 항체칩 ... 90 2. phospho-펩타이드 항체에 선택적인 항원칩 제작 및 항원-항체 결합력 측정 ... 94 제12절 photo-cross linker 개발 ... 96 1. 광반응성 아미노산 유도체 합성 ... 96 2. 항체칩 대량생산 기술개발을 위한 광반응성 항체결합펩타이드 개발 ... 98 3. Photo-cross linker의 항체결합 확인 ... 100 제13절 DNA tag 된 항체 제작 ... 103 1. 항원 제작방법 ... 103 2. 항체 제작 과정 ... 103 3. 항체의 정제 ... 103 4. 정제된 항체의 항원 결합력 평가 ... 104 5. 위암 세포주를 사용한 웨스턴블랏 ... 104 6. DNA tag된 항체 제작 ... 105 제14절 지능형 약물전달시스템 개발 ... 107 1. 치료용 약물 와 유전자의 동시 전달이 가능한 나노 전달체 개발 ... 107 2. 표적 마커 발현 암 세포 모델 제작 및 표적치료용 나노플랫폼 효능 검증 ... 109 3. 표적형 마커가 도입된 지능형 치료용 유전자 전달체 개발 ... 111 4. 표적형 약물 전달 시스템 개발 ... 112 5. 종양 특이적 환경 지능형 약물 전달 시스템 개발 ... 115 6. 항암제 전달용 다공성 무기 나노 전달체 개발 ... 116 제15절 in vivo 약물 감수성 평가 시스템 개발 ... 117 1. 표적형 약물 전달시스템의 in vivo 모델에서의 약물 감수성 평가 ... 117 2. 고감도 분자영상 기반 지능형 약물전달 시스템의 약물 감수성 평가 시스템 확립 ... 118 제16절 위암 조직에 대한 기능성 프로테움 데이터 생성 ... 120 1. 위암 환자 70명에 대한 125개의 항체에 대한 기능성 단백질체 데이터를 생성 (1) ... 120 2. 위암 환자 690명에 대한 195개의 항체에 대한 기능성 단백질체 데이터를 생성 (2) ... 122 3. 위암 예후관련 단백질 발굴 ... 123 4. 병기별 위암 예후 인자 발굴 ... 125 5. 병기별 위암 예후관련 단백질 의 생존 곡선 분석 ... 126 6. 위암 특이적 단백질 발현및 활성화 조사 ... 127 7. 위암 예후 예측 모델 ... 128 제17절 Self-addresable 항체칩 제작기술개발 ... 129 1. Self-addressable DNA 칩 제작을 위한 염기서열 선정 ... 129 2. DNA 칩 기반기술 준비 ... 129 3. 칩 기반에서의 Self-addressable 연구 ... 131 4. DNA tag된 항체를 사용한 항체칩 제작 ... 135 제18절 고감도 검출기술 최적화 ... 136 1. 항체칩 검증용 항원제작 ... 136제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 139 제1절 목표달성도 ... 139 1. 제 1단계연구사업의 세부 연구목표 ... 139 2. 목표달성 내용 ... 139 3. 결론 ... 140 제2절 관련분야에의 기여도 ... 141제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 146 제1절 활용계획 ... 146 1. 당해연도 활용계획 ... 146 2. 활용 방법 ... 146 3. 차년도 이후 활용계획 ... 146 제2절 기대효과 ... 147 1. 기술적 파급효과 ... 147 2. 경제적 파급효과 ... 148제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 149 1. 개인 맞춤형 치료분야의 새로운 비즈니스 모델 ... 149 2. 보다 정확한 암진단 기술 개발의 필요성 ... 149제7장 연구시설·장비 현황 ... 150제8장 참고문헌 ... 151끝페이지 ... 154

표/그림 (118)

연구자의 다른 보고서 :

참고문헌 (25)

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