초록 ▼

혈중의 종양 DNA (ctDNA)의 정량분석은 환자의 암 돌연변이 상태뿐 아니라 전체적인 종양부하의 역동적 변화에 관한 중요한 정보를 제공할 수 있다. 따라서 혈장으로부터의 다양한 유전자의 상태 분석은 진단, 예후 및 종양 진행의 모니터링을 위한 결정적 도구로 간주된다. 디지털 중합효소연쇄반응(digital PCR), wild-type 증폭을 억제하는 탐식자, 비대칭 PCR과 탐식자 융해분석을 결합하여, 연구자는 ctDNA 에서 발견되는 저준위 KRAS 돌연변이들의 정량을 위해 이중표지 탐식자 클램프 PCR을 이용한 새로운 digi

혈중의 종양 DNA (ctDNA)의 정량분석은 환자의 암 돌연변이 상태뿐 아니라 전체적인 종양부하의 역동적 변화에 관한 중요한 정보를 제공할 수 있다. 따라서 혈장으로부터의 다양한 유전자의 상태 분석은 진단, 예후 및 종양 진행의 모니터링을 위한 결정적 도구로 간주된다. 디지털 중합효소연쇄반응(digital PCR), wild-type 증폭을 억제하는 탐식자, 비대칭 PCR과 탐식자 융해분석을 결합하여, 연구자는 ctDNA 에서 발견되는 저준위 KRAS 돌연변이들의 정량을 위해 이중표지 탐식자 클램프 PCR을 이용한 새로운 digital PCR 기법(digital DPC-PCR)을 개발하고자 하였다. 이를 통해 0.01%의 돌연변이 유전자를 검출할 수 있는 민감도를 지닌 digital DPC-PCR 기법을 개발하였다. 연구자는 digital DPC-PCR이 wild-type KRAS가 돌연변이에 비해 10,000 배 존재 하는 조건에서 단일 KRAS 돌연변이 유전자가 정량 될 수 있음을 알아보고자 하였다. 이 기법을 이용해 혈장 시료에서 돌연변이 감지가 가능한 지 알아 보기 위해, KRAS 돌연변이가 확인된 13례의 원격전이가 없는 대장암을 사용하였다. Digital DPC-PCR 기법을 이용하여, 해당 증례의 혈장에서 KRAS 돌연변이 농도를 측정하였다. 분석결과 13 례의 혈장 중 9 례(69%) 에서 KRAS 돌연변이가 발견되었다. 8 례에서 종양조직과 혈장에서 동일한 돌연변이가 발견되었고, 나머지 1 례에서는 동일 돌연변이 뿐 아니라 다른 종류의 KRAS 돌연변이가 추가로 발견되었다. 돌연변이 복제 수는 1~136으로 다양하였고(100배 이상의 차이), 10 복제수/ml의 중앙값을 보였다. 혈장의 KRAS돌연변이 유전자 농도는 0.01-0.88%로 다양하였고, 중앙값은 0.04%로 나타났다. 본 연구는 digital DPC-PCR 기법이 1/10,000의 민감도로 대장암의 70%에서 혈장의 KRAS 돌연변이를 탐지하고 정량 될 수있음을 밝혔고, 이 기법이 ctDNA 농도의 실시간 정량분석을 통해 임상적으로 종양의 진행을 추적하는 것에 적용될 수 있음을 보여주었다
(출처:요약문 4p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 목차 ... 3
• Ⅰ. 연구결과 요약문 ... 4
• Ⅱ. 연구내용 및 결과 ... 5
• 1. 연구과제의 개요 ... 5
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 5
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 5
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 7
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 7
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 8
• Ⅲ. 연구성과 ... 8
• 끝페이지 ... 10