초록 ▼

□ 연구의 목적 및 내용
림프관 안에 떠 있는 또는 피부와 복벽에 있는 프리모시스템 (primo vascular system: PVS)에서 면역세포, 줄기세포 및 산알의 분포를 조사하고, 이들을 분리 채취하는 기술을 개발한다. 공초점현미경과 전자현미경 및 최첨단 나노바이오 기술인 SICM single live cell imaging으로 PVS 내 이들 세포의 특성을 조사하여 PVS의 면역 및 재생관련 기능 규명을 위하여 선도적으로 탐구한다.

□ 연구결과
- PN속의 LIVE 상태의 산알 Budding 을 5단

□ 연구의 목적 및 내용
림프관 안에 떠 있는 또는 피부와 복벽에 있는 프리모시스템 (primo vascular system: PVS)에서 면역세포, 줄기세포 및 산알의 분포를 조사하고, 이들을 분리 채취하는 기술을 개발한다. 공초점현미경과 전자현미경 및 최첨단 나노바이오 기술인 SICM single live cell imaging으로 PVS 내 이들 세포의 특성을 조사하여 PVS의 면역 및 재생관련 기능 규명을 위하여 선도적으로 탐구한다.

□ 연구결과
- PN속의 LIVE 상태의 산알 Budding 을 5단계로 포착하고 DNA를 확인했다.
- SICM을 이용해 LIVE 상태의 면역세포 Mast cells을 염색하고 이미징하는데 성공
- TEM분석으로 림프관속의 프리모시스템의 구성세포들의 특성들을 파악하고 일반적인 TEM의 이미징을 위한 Protocol의 Toluidin Blue염색기법으로 Semithin 단계에서 이용하여 우리는 프리모구성특징인 mast cells을 가시화하여 프리모시스템의 위치를 입체적으로 파악할 수 있었다.
- 피부에서 mast cells의 분포를 Toluidine staining을 통해 프리모 시스템의 전반적 분포를 파악하게 되면서 sectioned samples의 Continuous composite으로 3D 입체제작이 가능해 졌다.

▶ 1차년도: PVS에 있는 면역세포의 SICM을 이용한 live single cell imaging
- 림프관내 PN에서 채취하는 기술개발 완료
- AFM을 이용한 림프관내 PN에서 조사(fix 된 것으로 live cell 연구 전 단계)완료
- 프리모노드 속 산알의 Budding - 5phase 발견 및 DNA 확인
▶ 2차년도: PVS내 면역세포 분리채취 기술개발 및 SICM imaging
- PN에 있는 면역세포 mast cels 단계별 분포 파악과 분리채취 기술 개발
- SICM을 이용한 Live mast cells imaging 완료.
▶ 3차년도: PVS내 산알 분리채취기술개발 및 SICM imaging
- Mast cells 마킹 염색을 위한 피부속의 PN 위치파악 및 이미징 기술 개발.
- TEM을 이용한 산알의 단면 이미징 및 기능 분석을 위한 기술개발

□ 연구결과의 활용계획
피부에서 mast cells의 분포를 Toluidine staining 을 통해 프리모 시스템의 전반적 분포를 파악하게 되면서 수많은 생리적 변환과 질병에서 프리모시스템의 반응과 기능을 조사 할 수 있는 기반이 될 수 있는 기술을 발견하였다. 또한 이를 기반으로 SICM 의 live 세포상태를 이미징 할 수 있는 장비의 단점을 보완하며 중요기능의 세포 외곽뿐이 아닌 세포겉막과 속의 성양상도 파악할 수 있는 이미징 작업이 가능하다.
암세포가 프리모관을 따라 이동하는 과정을 실시간으로 관찰할 수 있게 되면 암전이 분야 원천기술개발로 신시장이 개척될 것이다.
(출처:요약문 4p)

Abstract ▼

□ Purpose& contents
The Primo Vascular System (PVS) is the third circulatory system and expected to function in tissue regeneration and wound healing. This research investigates the distributions of and develops methods to extract the immune cells, stem cells and SanAls in the PVS. Cutting edge b

□ Purpose& contents
The Primo Vascular System (PVS) is the third circulatory system and expected to function in tissue regeneration and wound healing. This research investigates the distributions of and develops methods to extract the immune cells, stem cells and SanAls in the PVS. Cutting edge bio-nano technology of single cell live imaging with Scanning Ion Conductance Microscope will be used for the analysis of these cells.

□ Result
-Observed the live primo microcell in PN and confirmed the five stages of the primo microcell's budding and DNA.
-Imaging stainied live immune cells (e.x: mast cell) using SICM
-Using TEM analysis method, we used the semithin section with Toluiding blue staining to visualize the mast cell which is the one of the main components in PN. Based on these data, we confirmed the characteristic of the constituent cells of the primo vascular system within the lymphatic system. Mast cells occupy the sapce a more that 40 percent in the PN. It could determine the three-dimensional shape of PVS.
▶ 1st year : Live single cell imaging using SICM within PVS' immune cells
- Developed the technique to collect the sample from PN within lymph vessel
- Using fixed PVS' sample to visualize live cells using AFM within lymph system. (Research stage before the direct live cell study)
▶ 2nd year : Immune cell separation and extraction technique developing within PVS and SICM Imaging.
- Identify the distribution stem cell resided in PN and developed separation technique (Checked primo micro cell budding and DNA)
- Live mast cell imaging using SICM
▶ 3rd year : Primo micro cell separation and extraction technique developing within PVS and SICM Imaging.
- Identify the PN's location within the skin layer and developed the imaging technique.
- Using TEM imaging technique, developed the primo node's cross section image and analyzed the function of cells.

□ Expected Contribution
The behavior of the PVS which is a new circulatory system was shown by a movie taken through a window. Consequently, a long term monitoring research for studying the function of the PVS will be followed.
(출처:SUMMARY 5p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 목차 ... 2
• 연구계획 요약문 ... 3
• 연구결과 요약문 ... 4
• 한글요약문 ... 4
• SUMMARY ... 5
• 연구내용 및 결과 ... 6
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 6
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 6
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 7
• 4. 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 14
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 14
• 6. 연구과정에서 수집한 해외 과학기술정보 ... 15
• 7. 참고문헌 ... 15
• 8. 연구성과 ... 16
• 9. 국가과학기술지식정보서비스에 등록한 연구시설.장비 현황 ... 16
• 10. 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전조치 이행실적 ... 17
• 11. 기타사항 ... 17
• 끝페이지 ... 17