초록 ▼

본 연구는 세포고사과정 중 분비되는 엑소좀의 특징 및 분비기전을 연구하고, 엑소좀의 구성 성분 중대식세포의 활성화에 기여하는 인자를규명하고자 하며, 엑소좀의 표면 단백질을 분석하고 지금까지 알려진 엑소좀 표면 단백질과의 비교 연구를 통해 세포고사관련 엑소좀의 표지자를 찾고자하며, 마지막으로 세포고사 관련 엑소좀의 생물학적 그리고 병인적 효과를 규명하고자 하였다.

1. 세포고사에서 분비되는 엑소좀의 특징 규명: 다양한 암 세포주 및 정상 세포주에서 케스페이즈 의존성세포 사멸을 유도하고 엑소좀 분비를 측정함. 분비된 엑소좀

본 연구는 세포고사과정 중 분비되는 엑소좀의 특징 및 분비기전을 연구하고, 엑소좀의 구성 성분 중대식세포의 활성화에 기여하는 인자를규명하고자 하며, 엑소좀의 표면 단백질을 분석하고 지금까지 알려진 엑소좀 표면 단백질과의 비교 연구를 통해 세포고사관련 엑소좀의 표지자를 찾고자하며, 마지막으로 세포고사 관련 엑소좀의 생물학적 그리고 병인적 효과를 규명하고자 하였다.

1. 세포고사에서 분비되는 엑소좀의 특징 규명: 다양한 암 세포주 및 정상 세포주에서 케스페이즈 의존성세포 사멸을 유도하고 엑소좀 분비를 측정함. 분비된 엑소좀의 크기와 빈도를 Nanoparticle Tracking Analysis와 투과 전자현미경으로 측정함. 분비된 엑소좀의 밀도를 Optiprep Density Gradient Centrifugation 법으로 측정함

2. 세포내 multivesicular endosome의 확인: 세포고사 관련 엑소좀의 세포 분비단계인 mutivesicular endosome의 존재를 확인하고, 엑소좀의 마커인 CD63 단백질이 존재함을 확인함

3. 세포고사 관련 엑소좀의 분비 기전 규명: 세포고사 관련 엑소좀이 Sphingosine-1-phosphate(S1P)의 합성과 S1P와 S1P receptor (S1PR)의 신호전달에 의해 합성됨을 증명함

4. 세포고사 관련 엑소좀 표지자의 탐구: 정상 조건에서 분비되는 엑소좀과의 비교 연구를 통해 세포 고사 관련 엑소좀의 단백질 마커인 S1PR1과 S1PR3를 발견함

5. 엑소좀에 의한 NF-kB와 p38 MAPK 신호전달 기전의 분석: 세포고사관련 엑소좀에 의한 대식세포의 IL1b 사이토카인 분비에 NF-kB와 p38 MAPK가 관여함을 규명하였으며, NF-kB subunit중 p65, IkbB, 그리고 c-Rel이 promoter에 접합함을 ChIP Assay와 western blotd으로 규명함

6. 엑소좀 내 대식세포 활성화 인자의 규명: 세포 고사 관련 엑소좀내의 대식세포 활성화 인자는 지질과 단백질이라는 결과에 착안하여, 세포고사관련 엑소좀의 지질막에 존재하는 S1P/S1PR3가 대식세포에서 신호 전달을 유발함으로써 IL1b 사이토카인 mRNA를 증가시킴을 증명하였음

7. 임상 샘풀에서 세포고사 관련 엑소좀의 확인: 본 연구팀은 중증천식과 루프스 환자의 혈장에서 세포고사 관련 엑소좀을 확인하였으며, 정상 대조군에 비해 의미있게 증가함을 증명함

(출처 : 연구결과 요약문 4p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 목차 ... 3
• Ⅰ. 연구결과 요약문 ... 4
• Ⅱ. 연구내용 및 결과 ... 5
• 1. 연구과제의 개요 ... 5
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 5
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 5
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 8
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 8
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 8
• Ⅲ. 연구성과 ... 9
• 끝페이지 ... 12