초록 ▼

본 연구에서는 엑소좀 내 miRNA를 검출하는 효과적인 방법으로 molecular beacon에 의한 in situ 검출 방법을 개발하였음.
이를 위해서 세 가지 연구 결과를 도출하였음

1. 엑소좀 내 miRNA 검출을 위한 molecular beacon probe의 엑소좀 내 운반 방법 개발
• 엑소좀은 lipid bilayer로 둘러싸여 있으며, lipid층에 cholesterol이 존재하고 있음
• 따라서, 본 연구에서는 이러한 세포막과 유사 성분인 엑소좀 막으로 probe를 운반하기 위해

본 연구에서는 엑소좀 내 miRNA를 검출하는 효과적인 방법으로 molecular beacon에 의한 in situ 검출 방법을 개발하였음.
이를 위해서 세 가지 연구 결과를 도출하였음

1. 엑소좀 내 miRNA 검출을 위한 molecular beacon probe의 엑소좀 내 운반 방법 개발
• 엑소좀은 lipid bilayer로 둘러싸여 있으며, lipid층에 cholesterol이 존재하고 있음
• 따라서, 본 연구에서는 이러한 세포막과 유사 성분인 엑소좀 막으로 probe를 운반하기 위해 엑소좀 표면에 일시적인 pore 형성 방법을 사용함
• Streptolysin O의 경우, cholesterol과 결합하여 세포막에 pore를 형성하며, 엑소좀에 적용하였을 때 마찬가지로 probe의 운반 효율이 증가됨을 확인하였음

2. 운반된 molecular beacon에 의한 엑소좀 miRNA 검출
• 엑소좀 농도를 다양하게 할 경우, molecular beacon에 의해 엑소좀 농도의 증가에 따라 S/B 값 역시 증가되는 결과를 도출함
• 즉, 엑소좀 바이오마커 miRNA의 양과 형광 신호 사이에 양적 correlation이 있음을 확인함
• 이와 동시에 다중 진단 기술 역시 개발하였는데, 엑소좀 내 존재하는 3종 이상의 miRNA를 동시에 검출하는 기술 개발함
• 동시 다중 진단에 있어, 엑소좀이라는 제한된 공간 내에서 발생되는 형광파장의 중첩 현상 역시 최초로 발견함

3. 엑소좀 포획 방법 개발
• 엑소좀을 이용한 액체 생검을 위해서는 궁극적으로 엑소좀을 포획한 상태에서 동시에 엑소좀 내 miRNA를 검출하는 기술 개발이 필요함
• 따라서, 엑소좀 포획 기술은 매우 중요하며, 향후 핵심 기술이 될 것임
• 본 연구에서는 엑소좀 포획을 위해 magnetic bead-CD63 (엑소좀 표면 단백질마커) antibody를 이용하여 엑소좀을 포획하는 기술을 확인하였으며, 여기에 본 연구에서 개발한 molecular beacon을 이용하여 포획된 엑소좀 내 miRNA를 동시에 검출하였음
• 이를 통해, 엑소좀 표면의 단백질 마커를 1차적으로 검출하며, 엑소좀 내 핵산 마커를 2차적으로 검출하는 기술을 확보하게 됨

(출처 : 요약문 3p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 목차 ... 2
• Ⅰ. 연구결과 요약문 ... 3
• Ⅱ. 연구내용 및 결과 ... 4
• 1. 연구과제의 개요 ... 4
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 4
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 4
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 5
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 6
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 6
• Ⅲ. 연구성과 ... 7
• 끝페이지 ... 9