초록 ▼

연구의 목적 및 내용
타목시펜에 저항성을 보이는 ER 양성 유방암에서 타목시펜의 저항성을 유발하는 핵심 분자로서 CYR61의 기능과 그 발현 조절기전을 규명하고, CYR61 신호전달체계의 차단에 의한 타목시펜 저항성 개선을 평가하고자 다음의 연구를 수행함.
- 타목시펜 저항성 유방암 모델에서 CYR61 발현의 상관성 연구
- 타목시펜 저항성 유방암 세포모델에서 sphingolipid 신호체계와 CYR61 발현의 연관성 연구
- 타목시펜 저항성 유방암 세포모델에서 CYR61 전사발현 제어 기전 연구
- 타목

연구의 목적 및 내용
타목시펜에 저항성을 보이는 ER 양성 유방암에서 타목시펜의 저항성을 유발하는 핵심 분자로서 CYR61의 기능과 그 발현 조절기전을 규명하고, CYR61 신호전달체계의 차단에 의한 타목시펜 저항성 개선을 평가하고자 다음의 연구를 수행함.
- 타목시펜 저항성 유방암 모델에서 CYR61 발현의 상관성 연구
- 타목시펜 저항성 유방암 세포모델에서 sphingolipid 신호체계와 CYR61 발현의 연관성 연구
- 타목시펜 저항성 유방암 세포모델에서 CYR61 전사발현 제어 기전 연구
- 타목시펜 저항성 유방암세포의 악성화에 미치는 CYR61의 영향 연구

연구결과
● 타목시펜 저항성 유방암세포에서 세포의 증식, 이동, 부착 및 혈관신생을 촉진시키는 혈관신생인자로 알려진 CYR61의 발현이 단백질 및 mRNA수준에서 현저히 증가되어 있음을 최초로 확인하였고, 나아가 인체유방암조직에 대한 조직면역화학적 분석에서도 타목시펜에 반응하지 않았던 환자에서 타목시펜 반응성 환자에 비해 CYR61의 발현이 2배이상 증가되어 있음을 최초로 확인함.
● sphingosine-1-phosphate 신호체계 중 S1P1수용체가 타목시펜 저항성 유방암 세포에서 현저히 증가되어 있음을 확인하고 human S1P1 과다발현 MCF-7 세포주를 제작하여 CYR61의 발현을 확인하였으나, 유의적인 변화를 보이지 않았음.
● 타목시펜 저항성 유방암세포에서는 CYR61 발현 조절에 중요한 RhoA의 발현이 증가되어 있었고, 또한, ASK1/JNK 신호체계가 활성화되어 있었음. 관련 전사인자인 SRF와 c-Jun의 발현 및 전사활성이 증가되어 있었고 RhoA 과다발현에 의해 SRE와 AP-1 luciferase의 활성이 증가함을 통해 RhoA가 SRF와 c-Jun의 상위기전으로 작용하고 있음을 확인함. 또한, SRF와 c-Jun의 knock-down에 의해 CYR61의 발현이 감소함을 통해 타목시펜 저항성 유방암세포에서 CYR61 발현 증가의 핵심기전으로 RhoA, JNK, SRF/c-Jun 신호체계가 관여함을 확인함.
● 타목시펜 저항성 유방암세포에서 발현이 증가되어 있는 CYR61의 knock-down에 의해 세포 이동능(migration)이 현저히 감소하고 EMT 현상의 역전가능성을 관찰하였음. 이는 CYR61이 타목시펜 저항성 유방암 악성화에 중요한 역할을 하고 있음을 시사함.

연구결과의 활용계획
● 본 연구결과는 타목시펜 저항성 유방암의 진행과 전이과정의 세포 생리를 근본적으로 이해하는데 기여하고 종양 악성화 과정의 새로운 기반 지식을 제공함.
● ER 양성 유방암세포의 타목시펜 저항성 획득과 CYR61 신호의 연관성 규명은 타목시펜 저항성 유방암 치료를 위한 새로운 신약 타겟 및 바이오마커의 발굴 의미를 가짐.
● 또한, 본 연구의 결과는 항암제 저항성 종양 치료를 위한 신규 작용점을 탐색하는 탐지기술을 제공하고 신호의 네트워킹은 신약개발의 기초 및 응용자료로 활용 가능함.

(출처 : 한글요약문 4p)

Abstract ▼

Purpose& contents
● To study the altered expression of CYR61 in relation to tamoxifen-resistance acquisition in ER positive breast cancer
● To study the altered sphingolipid signaling in relation to CYR61 expression in tamoxifen-resistant breast cancer cells
● To study the regulatory mechan

Purpose& contents
● To study the altered expression of CYR61 in relation to tamoxifen-resistance acquisition in ER positive breast cancer
● To study the altered sphingolipid signaling in relation to CYR61 expression in tamoxifen-resistant breast cancer cells
● To study the regulatory mechanisms for the CYR61 gene expression in tamoxifen-resistant breast cancer cells
● To study the role of CYR61 in the acquisition of cancer aggressiveness in tamoxifen-resistant breast cancer cells

Result
● Cysteine-rich protein 61 (CYR61), a secreted extracellular matrix-associated protein, serves as a growth-factor-inducible angiogenic factor contributing to cell growth, migration, adhesion and angiogenesis. The levels of CYR61 transcript and protein were higher in tamoxifen-resistant MCF-7 cells. Also, intensity of CYR61 immunohistochemical staining was 2-fold higher in human recurrence group after tamoxifen therapy (TAM-resistant group, relapsed within 3 to 4 years after mastectomy with adjuvant tamoxifen therapy).
● Sphingosine-1-phosphate receptor 1 (S1P1) expression was increased in tamoxifen-resistant MCF-7 cells. But, the overexpression of human S1P1 was not able to induce CYR61 in MCF-7 cells, implying that the increase in S1P1 expression is not likely sufficient to induce CYR61.
● Both RhoA and ASK1/JNK were activated and the levels of c-Jun/AP-1 and serum response factor (SRF) were increased in tamoxifen-resistant MCF-7 cells. Reporter gene assay and siRNA knock-down experiments demonstrated that RhoA, JNK and SRF, c-Jun was responsible for the CYR61 induction in tamoxifen-resistant MCF-7 cells.
● CYR61 knock-down using siRNA or shRNA attenuated cell migratory ability of tamoxifen-resistant MCF-7 cells and reversed EMT as indicated by the altered expression of EMT marker proteins.
● These results suggest the role of CYR61 in the acquisition of cancer aggressiveness in tamoxifen-resistant breast cancer cells.

Expected Contribution
● New findings and methodological approaches obtained or established from this study can be applied to the development of novel drug targets for the treatment of tamoxifen-resistanct breast cancer as well as the identification of prognostic biomarkers of tamoxifen-resistance development in breast cancer.

(출처 : SUMMARY 5p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 목차 ... 2
• 연구계획 요약문 ... 3
• 연구결과 요약문 ... 4
• 한글요약문 ... 4
• SUMMARY ... 5
• 연구내용 및 결과 ... 6
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 6
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 7
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 8
• 4. 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 17
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 19
• 6. 연구과정에서 수집한 해외 과학기술정보 ... 19
• 7. 주관연구책임자 대표적 연구실적 ... 20
• 8. 참고문헌 ... 20
• 9. 연구성과 ... 21
• 10. 국가과학기술지식정보서비스에 등록한 연구시설‧장비 현황 ... 23
• 11. 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전조치 이행실적 ... 23
• 12. 기타사항 ... 24
• 별첨1. 대 표 연 구 성 과 ... 25
• 끝페이지 ... 27