초록 ▼

1. HP1의 타켓 유전자 발굴 및 히스톤 메칠화 조절효소 저해제 스크리닝

1) 각각의 HP1 isoform knockdown시킨 자궁경부암 세포에서의 cDNA expression array 분석하여 세 가지 HP1 단백질(HP1α, HP1β, HP1γ)의 새로운 타켓 유전자로 발굴하였음 : 최초로 포유류 세 가지 HP1에 대한 통합적 transcriptome 비교 분석 (transcriptome analysis)

2) 자궁경부암에만 특이적인 HP1의 타켓 유전자를 발굴하였음 : UBE2L3/UbcH

1. HP1의 타켓 유전자 발굴 및 히스톤 메칠화 조절효소 저해제 스크리닝

1) 각각의 HP1 isoform knockdown시킨 자궁경부암 세포에서의 cDNA expression array 분석하여 세 가지 HP1 단백질(HP1α, HP1β, HP1γ)의 새로운 타켓 유전자로 발굴하였음 : 최초로 포유류 세 가지 HP1에 대한 통합적 transcriptome 비교 분석 (transcriptome analysis)

2) 자궁경부암에만 특이적인 HP1의 타켓 유전자를 발굴하였음 : UBE2L3/UbcH7

3) 다양한 학교 및 연구기관으로부터 제공받은 chemical library를 이용하여 KDM4 활성을 억제하는 화합물을 스크리닝하여 KDM4 억제제를 새로 발굴하였음 : TE22.

4) 새로운 KDM4 저해제 개발을 위한 hit compound 발굴

5) HTS에 이용될 수 있는 In vitro KMD4 assay 프로토콜 구축

2. HP1과 H3K9 메칠화에 의한 타켓 유전자 조절기전 확립
1) 세 가지 HP1의 공통 타켓 유전자인 “UBE2L3/UbcH7”은 p53에 대한 E2 ubiquitin-conjugating enzyme로 암화과정 및 스트레스 반응에 있어서 새로운 중요한 인자임을 입증하였음. 세 가지 HP1 isoform중 HP1γ가 UBE2L3 전사 조절에 가장 중요한 HP1 isoform이며 나아가 p53 stability 와 activity 조절에 새로운 조절인자임을 최초로 규명하였음. 따라서, UBE2L3 gene의 transcription을 조절하는 새로운 epigenetic regulator로서의 HP1의 정확한 역할을 규명하였음.

2) HP1와 함께 UBE2L3의 전사 억제를 조절하는 KMT1도 규명하였음.

3. 에피지놈 조절기전 확립 및 암치료제의 타켓 제시
1) 자궁경부암에만 특이적인 p53-specific degradation system (UBE2L3(E2)-E6/E6AP(E3)-p53)을 후성유전학적 수준에서 조절할 수 있는 새로운 치료 타켓으로서 HP1 역할 및 조절 기전을 최초로 규명하였음.

2) 새로운 효과적인 치료제가 없는 자궁경부암의 신규 치료 타켓으로서의 HP1과 UBE2L3를 발굴하였고, HP1과 UBE2L3에 의한 발암기전도 규명하였음.
● Toxicological research 31:1-9, 2015 게재
● Cancer letters 391:162-171, 2017 게재
● Cell stress and chaperones 22:253-261, 2017 게제
● Carcinogenesis revision 중 (재투고했음)
● 국내 및 국제 학회에 연구결과 총 6회 발표 (대한약학회, 2015ACT, 2015 AACR and 2016 AACR)
● 본 연구과제 이년 반 동안 연구하여 규명한 결과를 (“Overcoming cervical cancer-specific p53 degradation system with epigenetic reader HP1”) IF10 이상 (상위5%) 저널에 투고 준비 중임.

(출처 : 연구결과 요약문 3p)

Abstract ▼

1. To identify a novel target gene of HP1 and to screen KMT1 & KDM4 inhibitor
1) Analysis of novel target gene of three HP1 isoforms (HP1α, HP1β, HP1γ) by cDNA expression array (HP1 transcriptome analysis) : to first analyze the comprehensive transcriptome of threeHP1 proteins
2) To identify

1. To identify a novel target gene of HP1 and to screen KMT1 & KDM4 inhibitor
1) Analysis of novel target gene of three HP1 isoforms (HP1α, HP1β, HP1γ) by cDNA expression array (HP1 transcriptome analysis) : to first analyze the comprehensive transcriptome of threeHP1 proteins
2) To identify a cervical cancer-specific target gene of HP1 : UBE2L3/UbcH7
3) To identify a novel KDM4-specific inhibitor using chemical library: we found a novel hit compound called “TE22.“
4) To establish In vitro KMD4 assay for HTS

2. To elucidate HP1 and H3K9 methylation-mediated chromatin cord in tumorigenesis.
1) HP1γ, a reader of H3 lysine9 methylation, directly suppresses UBE2L3 gene expression by binding to the promoter, blocking UBE2L3-mediated p53 ubiquitination and degradation.
2) Overexpression of HP1γ recovered the stability and activity of p53 in HPV-positive cervical cancer cells inhibiting proliferation and promoting apoptosis.
3) Our results suggest that direct suppression of UBE2L3 gene by epigenetic reader HP1γ can provide a breakthrough to escape from HPV-mediated p53 degradation system.
3. To provide a novel therapeutic target that is mediated by HP1
1) To reveal molecular mechanism in which HP1 regulates p53-specific degradation system (UBE2L3(E2)-E6/E6AP(E3)-p53) in HPV-infected cervical cancer
2) To reveal a novel therapeutic target for cervical cancer and to develop disease controltechnique.

◇Toxicological research 31:1-9, 2015
◇Cancer letters 391:162-171, 2017
◇Cell stress and chaperones 22:253-261, 2017
◇Revised Carcinogenesis resubmitted
◇Poster or oral presentations in international and local conferences (대한약학회, 2015ACT, 2015 AACR and 2016 AACR)
◇We are prepared to submit a manuscript (“Overcoming cervical cancer-specific p53 degradation system with epigenetic reader HP1”) to IF10 (top 5%) journal

(출처: SUMMARY 4p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 목차 ... 2
• Ⅰ. 연구결과 요약문 ... 3
• 국문 요약문 ... 3
• SUMMARY ... 4
• Ⅱ. 연구내용 및 결과 ... 5
• 1. 연구과제의 개요 ... 5
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 5
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 6
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 7
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 7
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 7
• Ⅲ. 연구성과 ... 8
• 끝페이지 ... 10