초록 ▼

본 연구의 목적은 미생물의 감염시 대식세포의 신호전달 체계 중 PrdxV의 작용점을 발굴하고, 생체 내 감염모델에서 숙주 방어에 대한 역할을 규명하고자 함. 본 연구는 3년에 걸쳐 수행되었으며 각 연차별 목표와 그에따른 연구성과는 다음과 같이 요약하였음.

○ 1차년도: 대식세포에서 PrdxV의 발현을 유도하는 미생물 독력인자 규명과 초기 신호전달 수용체 규명
• 대식세포에 살모넬라 감염시 PrdxV 발현의 특이성 규명: 마우스 유래 대식세포에 살모넬라 감염시 퍼 옥시레독신의 발현 유도를 살펴본 결과 PrdxV가 특

본 연구의 목적은 미생물의 감염시 대식세포의 신호전달 체계 중 PrdxV의 작용점을 발굴하고, 생체 내 감염모델에서 숙주 방어에 대한 역할을 규명하고자 함. 본 연구는 3년에 걸쳐 수행되었으며 각 연차별 목표와 그에따른 연구성과는 다음과 같이 요약하였음.

○ 1차년도: 대식세포에서 PrdxV의 발현을 유도하는 미생물 독력인자 규명과 초기 신호전달 수용체 규명
• 대식세포에 살모넬라 감염시 PrdxV 발현의 특이성 규명: 마우스 유래 대식세포에 살모넬라 감염시 퍼 옥시레독신의 발현 유도를 살펴본 결과 PrdxV가 특이적으로 유도발현됨을 관찰하였음.
• 대식세포 RAW264.7 에 PrdxV 저발현 및 고발현된 세포주의 살모넬라 감염시 염증성 사이토카인의 생성 분석: 확립된 Stable cell line에 살모넬라 감염시 PrdxV가 과발현시 염증성 사이토카인(IL-6, TNF-α, IFN-β)의 생성이 저해됨을 확인. 이와는 반대로 PrdxV가 저발현시에는 염증성 사이토카인의 증가를 관찰함.
• 분화된 골수유래 대식세포의 다양한 TLR agonists에 대한 PrdxV의 반응과 염증성 사이토카인의 규명: 골수유래 대식세포내 PrdxV의 발현이 LPS (TLR4)와 flagellin(TLR5)의 자극에 의해 특이적으로 유도되며 이때 염증성 사이토카인 (IL-6, TNF-α)의 생성이 증가된 것을 확인하였음.
• 대식세포의 살모넬라 식균능에서의 PrdxV의 역할 규명: 대식세포의 살모넬라 식균능에 대한 PrdxV의 역할이 없음을 확인함.
○ 2차년도: 대식세포에서 독력인자에 의해 유도된 염증반응에 있어 PrdxV의 숙주세포 핵내 역할 규명
• 대식세포에서 LPS 및 Salmonella 감염시 PrdxV 단백질의 핵내 발현 규명: 다양한 유래의 대식세포에서 외부자극 (LPS, Salmonella)시 PrdxV의 발현이 핵내에서 특이적으로 증가함을 confocal microscopy를 통해 관찰하였음.
• RAW264.7 대식세포에 Salmonella 감염후 PrdxV 단백질과 상호작용하는 단백질 규명: PrdxV가 살모넬라 감염시 Hspa8 (70kDa)와 상호작용하는 것을 immunoprecipitation과 MS/MS 분석을 통하여 규명하였음.
• In vivo 모델에서 PrdxV의 대식세포내 특이적 발현 규명: 생체내 감염모델에서 면역성 조직(간과 비장)에서 PrdxV의 유도발현을 관찰하였음.

2차년도의 연구수행과정 중 본 연구과제의 타깃 유전자와 관련된 일부의 결과를 1편의 국외 SCI 학술지에 출간하였음. (Proteome Science 2015, 13:4 doi:10.1186/s12953-014-0061-2)
○ 3차년도: In vivo 미생물 감염 모델을 통한 PrdxV의 숙주 방어 효과와 면역 조절 기전 연구
• In vivo 감염모델에서 PrdxV의 저발현 및 고발현에 따른 마우스 생존률에 미치는 역할 규명: PrdxV가 과발현 혹은 결여된 마우스에 살모넬라 감염시 PrdxV KO 마우스의 생존률이 Wild type마우스에 비해 유의적으로 감소하는 것을 관찰하였음.
• In vivo 감염모델에서 PrdxV에 의한 조직내 감염균수와 면역세포에 대한 영향 규명: 감염에 의한 생존률의 변화와 같은 맥락으로, PrdxV KO 마우스 조직에서 Wild type 마우스 조직에 비해 살모넬라 균수가 유의적으로 증가함을 확인하였고, 조직의 병리학적 관찰을 통해서도 PrdxV KO에서 심한 손상도를 확인하였음. 뿐만 아니라 이때 마우스의 비장과 장간막림프절에서의 면역학적 유세포분석을 통해 초기 감염반응에 반응하는 면역세포(호중구, 호산구, Dendritic cell)들이 PrdxV KO마우스에서 유의적으로 증가하였음을 확인하였음.

3차년도의 연구수행과정 중 2편의 국외 SCI 학술지에 출간하였음. (Archives of Microbiology 2016,198(6), 573-583; Molecular Oral Microbiology 2016, DOI 10.1111/omi.12167)

( 출처 : Ⅰ. 연구결과 요약문 4p )

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 목차 ... 3
• Ⅰ. 연구결과 요약문 ... 4
• Ⅱ. 연구내용 및 결과 ... 5
• 1. 연구과제의 개요 ... 5
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 5
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 6
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 7
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 8
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 8
• Ⅲ. 연구성과 ... 9
• 끝페이지 ... 10