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Kafe 바로가기주관연구기관 | 엘리드 |
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연구책임자 | 문태기 |
참여연구자 | 김유선 , 박혜경 , 강효은 , 박정준 , 김현주 , 전혜린 , 김환희 , 이우람 , 김우중 , 정봄 |
보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 | 한국어 |
발행년월 | 2017-11 |
과제시작연도 | 2017 |
주관부처 | 식품의약품안전처 Ministry of Food and Drug Safety |
등록번호 | TRKO201800035803 |
과제고유번호 | 1475010003 |
사업명 | 의약품등안전관리 |
DB 구축일자 | 2018-07-28 |
키워드 | 화장품.효능평가.노화.상관성.연령.항균.손세정제.손세정제.미생물.콜라겐.자외선.미생물.콜라게나아제.cosmetic.effectiveness evaluation.aging.aging Index.Correlation.age.antibacterial.handwash.handwash.microorgamism.Collagen.UV.microorga mism.MMP-1. |
DOI | https://doi.org/10.23000/TRKO201800035803 |
* 노화완화 효능평가법 개발
피부노화의 증상으로는, 탄력감소, 주름 발생, 색소침착, 피부 처짐 등이 있으나, 여러 가지 증상이 복합적으로 나타나기 때문에 아직까지 항노화에 대한 정확한 개념 및 피부노화완화에 대한 객관적인 효능평가법 연구는 미흡한 실정이다. 한국인의 피부노화 평가지표 개발을 위해, 20대 ~ 60대까지 연령별 피험자를 대상으로 현재까지 개발된 피부노화 관련 육안평가 및 기기 측정 방법을 토대로 연령과 상관성이 있는 항목을 선정하였다. 선정된 항목들을 토대로 회귀분석을 수행하여 모형 내의 영향력과 유의성 여부를
* 노화완화 효능평가법 개발
피부노화의 증상으로는, 탄력감소, 주름 발생, 색소침착, 피부 처짐 등이 있으나, 여러 가지 증상이 복합적으로 나타나기 때문에 아직까지 항노화에 대한 정확한 개념 및 피부노화완화에 대한 객관적인 효능평가법 연구는 미흡한 실정이다. 한국인의 피부노화 평가지표 개발을 위해, 20대 ~ 60대까지 연령별 피험자를 대상으로 현재까지 개발된 피부노화 관련 육안평가 및 기기 측정 방법을 토대로 연령과 상관성이 있는 항목을 선정하였다. 선정된 항목들을 토대로 회귀분석을 수행하여 모형 내의 영향력과 유의성 여부를 고려하고 설명성이 높은 Aging Index 예측 모형을 제시하였다. 유효성분을 함유하는 표준시료와 이를 배제한 대조시료를 함께 제조하여 3개의 시험기관간 밸리데이션을 수행하고 이에 대한 타당성을 검증함으로서 aging index 모형들이 한국인의 피부나이를 예측할수 있는 객관적 평가법으로 활용 가능하다고 판단되었다.
* 항균 효능평가법 개발
항균 효능평가를 위한 시험법의 경우, 제품의 국내외 경쟁력 확보를 위해 표준화된 시험법 도입이 시급한 실정으로 다양한 시험방법 중 finger pads 방법과 glove juice 방법 모두 많은 연구가 되어 있어 이를 통한 시험을 진행하였다. 시험 균주로는 다양한 미생물 중 배양조건이 비교적 유사하고 손쉽게 배양할 수 있으며 주변에 쉽게 노출될 수 있는 균주로 그람 양성균 중에 Staphylococcus aureus ATCC 6538, 그람 음성균 중에 Escherichia coli ATCC 11229를 선정하여 시험을 진행하였다. 시험에 사용된 유효물질로는 다수의 시중 판매 제품에 함유된 것으로 검색된 chloroxylenol을 주요 유효성분으로 0.5%, 보조 유효성분으로 5%의 변성알코올을 함유하는 시료와 이를 함유하지 않는 대조시료를 제조하여 시험에 사용하였으며, 제품의 보존제로 사용되었으나 항균력에 영향을 줄 수 있는 항균 추출물들도 대조시료에는 배제하였다. 시험 결과, 항균 효능평가를 위한 시험법의 경우, 시험 결과를 미루어 보았을 때에 glove juice 방법과 finger pads 방법 모두 항균 효능평가 시험 방법으로 유사한 시험 결과를 확인함으로써 모두 시험방법으로 적합한 것으로 판단되었다.
* 미백 및 주름개선 in vitro 시험
멜라닌 생성 세포주인 SK-MEL-2 세포에서 human tyrosiase 추출 방법을 확립하였고, tyrosinase 억제 물질인 kojic acid 250 및 500 μg/mL를 48 시간 동안 처리한 결과 human tyrosinase 활성률이 감소하는 것을 확인하였다. Tyrosinase mRNA 발현평가를 위해 B16F10과 SKMEL-2 세포주에서 tyrosinase 발현 유도 및 억제 조건을 검토하였다. 시험결과 tyrosinase 유도 물질인 α-MSH 100 nM에서 tyrosinase mRNA 발현을 유도하였고, tyrosinase 억제 물질인 kojic acid 100 ppm에서 tyrosinase 발현이 감소되는 것을 RT-qPCR을 통해 확인하였다. 따라서 Human 유래 멜라닌 생성 세포주에서 human tyrosinase 측정 및 human과 mouse유래 tyrosinase mRNA 측정 시험에 대한 시험법을 제시할수 있을 것으로 사료된다. MMP-1 발현 유도 시험조건을 검토한 결과 HDF 세포독성이 관찰되지 않는 범위 내인 UV-B 10 mJ 조건에서 MMP-1 발현이 유도 되었고, 활성 억제 물질인 retinoic acid가 MMP-1 mRNA 발현을 억제하는 것을 ELISA 및 RT-qPCR을 통해 확인하였다. Collagen mRNA 발 현평가를 위해 TGF-β 2.5, 5 및 10 ng/ml를 HDF 세포에 처리하였고 농도 의존적으로 collagen mRNA 증가되는 것을 ELISA 및 RT-qPCR을 통해 확인하였다. 따라서 MMP-1 및 collagen mRNA 측정 시험에 대한 시험법을 제시할 수 있을 것으로 사료된다.
* 주름개선 평가법 개선을 위한 인체적용 시험
주름의 유효성을 평가하기 위한 여러 평가법들이 개발 되었다. 기존 측정항목인 모사판 이미지정량법과 신규 측정항목인 3D 영상장비를 이용한 이미지정량법의 높은 상관성을 입증하였고 기관과의 검증을 통해 새로운 평가방법으로서의 개정안을 제시하고자 한다.
( 출처: Ⅰ. 총괄연구개발과제 요약문 : 국문 요약문 6p )
* Development of anti-agingl test method
Symptoms of skin aging include decreased elasticity, wrinkles, pigmentation, and skin sagging etc.
Also, because many symptoms of skin aging are complex, there are still few researches on the exact concept of anti-aging and the objective evaluation of e
* Development of anti-agingl test method
Symptoms of skin aging include decreased elasticity, wrinkles, pigmentation, and skin sagging etc.
Also, because many symptoms of skin aging are complex, there are still few researches on the exact concept of anti-aging and the objective evaluation of efficacy against skin aging. In order to develop a skin aging index for Koreans, subjects of 20 to 60 years were selected for items that correlate with age based on visual assessment and device measurement related to skin aging developed so far. Based on the selected items, regression analysis is performed to consider the influence and significance in regression model, and a predictive aging index model is presented. A sample containing an active ingredient and a control sample were prepared, and validation of the three institution was conducted to confirm the validity. The aging index models were judged as objective evaluation method to predict Korean skin age by confirming the similar validation results obtained by the three institutions.
* Development of antibacterial test method
It is urgent to introduce a standardized test method for evaluation of antibacterial efficacy in order to secure the competitiveness of the product both at home and abroad. Among the various test methods, finger pads method and glove juice method have been studied in many ways. As test strains, Staphylococcus aureus ATCC 6538 and Escherichia coli ATCC 11229 among Gram-positive bacteria and Gram-negative bacteria were selected which can be easily cultured and comparatively similar among various microorganisms and can be easily exposed to the surroundings. As the effective substance used in the test, a test sample containing chloroxylenol, which is contained in a large number of commercial products, containing 0.5% as a main active ingredient, 5% denatured alcohol as an sub-active ingredient and a control sample not containing the active ingredients, were prepared. The antimicrobial extracts, which were used as preservatives in the product but could affect the antimicrobial activity, were excluded from the control samples. As a result of the test, it was judged that both the glove juice method and the finger pads method were suitable for the test method by confirming the similar test results by the antibacterial effect evaluation test method in the case of the test method for evaluating the antibacterial effect.
* Whitening and wrinkle in vitro test
The human tyrosinase extraction method was established in SK-MEL-2 cells, a melanin cell line.
SK-MEL-2 cells were treated with tyrosinase inhibitor kojic acid at 250 and 500 ug/ml for 48h.
After 48h, human tyrosinase in SK-MEL-2 was extracted and measured tyrosinase activity. As a results, it was confirmed that human tyrosinase activity was decreased compared with non treated cell. In order to evaluate the tyrosinase mRNA expression, this study examined tyrosinase expression conditions in B16F10 and SK-MEL-2 cells. RT-qPCR results showed that tyrosinase mRNA expression was increased by treatment with α-MSH 100 nM tyrosinase inducer. However, 100 ppm of kojic acid inhibited tyrosinase mRNA expressions in SK-MEL-2 cells.These results suggest that test method for human tyrosinase and tyrosinase mRNA measurement test. MMP-1 mRNA inhibition test results showed that UVB 10 mJ induced MMP-1 mRNA expression and retinoic acid suppressed MMP-1 mRNA expression by ELISA and RT-qPCR. To evaluate collagen mRNA expression, HDF was treated with TGF-ß 2.5, 5 and 10ng/ml. After treatment with TFG-ß,collagen mRNA was dose-dependently increased by ELISA and RT-qPCR. These results suggest that test method for MMP-1 and collagen mRNA measurement test.
* In vivo test to improve the wrinkle evaluation method
Several methods for the efficacy evaluation of wrinkles have been developed. To evaluate various measurement methods, Existin (Image quantification method using replica) presented in the wrinkle Efficacy Evaluation guidelines and image analysis method using new 3D image equipment confirmed high correlation. we will be presented as a new evaluation item through the validation of the two institutions through the validity substance.
( 출처: Ⅰ. 총괄연구개발과제 요약문 : Summary 9p )
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