초록 ▼

1. 반려동물 및 말에서의 SFTS 바이러스 감염 실태 조사
가. SFTS 바이러스 감염실태 조사를 위한 시료 채취
1) 반려동물: 제주도를 포함한 전국의 유기동물보호소와 야외사육장에서 반려동물 총 1,561두 (유기견 1,119두, 고양이 215두, 야외사육견 227두)혈액시료 채취(‘16년 641두, ’17년 920두)
2) 말: 제주도 등 전국 사육장 말 총 1,227두(‘16년 759두, ’17년 468두)의 혈청 제공(마사회)
3) 진드기: 유기동물보호소, 마사회 목장, 말 사육목장 등의 마사 주변,

1. 반려동물 및 말에서의 SFTS 바이러스 감염 실태 조사
가. SFTS 바이러스 감염실태 조사를 위한 시료 채취
1) 반려동물: 제주도를 포함한 전국의 유기동물보호소와 야외사육장에서 반려동물 총 1,561두 (유기견 1,119두, 고양이 215두, 야외사육견 227두)혈액시료 채취(‘16년 641두, ’17년 920두)
2) 말: 제주도 등 전국 사육장 말 총 1,227두(‘16년 759두, ’17년 468두)의 혈청 제공(마사회)
3) 진드기: 유기동물보호소, 마사회 목장, 말 사육목장 등의 마사 주변, 그리고 반려동물과 말의 몸에서 총 9,813마리(‘16년 6,946마리, ’17년 2,867마리)의 진드기를 채집하였으며, 종 동정 결과 9,807(99.9%)마리가 SFTS 바이러스의 주요 매개체로 알려진 작은소참진드기(Haemaphysalis longicornis, 99.9%)로, 나머지 6마리(0.06%)는 일본참진드기(Ixodes nipponensis)로 확인되었음

나. SFTS 감염실태 조사
1) 채집 및 수집된 혈액(혈청) 및 진드기에 대한 SFTS 항원 검출실험 결과 양성률은 유기견 0.8%(9/1,119), 고양이 0.5%(1/215), 야외사육견 1.3%(3/227), 말 1.5%(18/1,227), 그리고 진드기 1.2%(9,813마리를 pooling한 시료 총 1,324개 중 16개 양성)로 확인되었음
2) 기 확립된 간접면역형광법(IFA)을 이용한 항체검사 결과 양성률은 개 22.7%(306/1,346), 고양이 16.3%(35/215), 그리고 말 21.3%(261/1,227)로 각각 확인되었음

2. 국내 분리 SFTS 바이러스 특성조사 및 항체진단법 간 진단효율 비교
가. 국내 동물 유래 SFTS 바이러스의 특성 조사
1) 국내 동물유래 바이러스 분리주의 분자생물학적 특성 분석
-‘16년에 유기견과 고양이 각 1두의 혈청 시료에서 항원이 검출되었고 그 PCR 증폭 산물을 sequencing 해서 얻어진 염기서열을 한국인 환자로 부터 검출된 바이러스의 염기서열과 비교한 결과, 99.4% 및 99.7%의 일치도를 나타냈으며 일본에서 주로 검출된 바이러스들과 근연관계를 보인 것을 확인하였음
-‘17년에 항원이 검출된 개 11두와 말 18두의 PCR 증폭산물에 대한 sequencing 및 염기서열 분석결과 국내 사람분리주(KU507553 및 KJ739556)와 95~99% 일치하였고 항원이 검출된 진드기 pooling 시료(16개)의 PCR 증폭산물에 대한 염기서열분석 결과 역시 국내 사람분리주(KU507553, KJ739556 및 KU507569)와 93~100% 일치함을 확인하였음
-‘16년 및 ’17년 항원양성으로 확인된 46개중 41개 샘플(유기견 11, 말 16, 진드기 14)에 대해 MEGA6.0 프로그램을 이용하여 유전자분석을 실시한 결과 진드기에서 확인된 1개 샘플을 제외한 40개의 샘플이 Yosikawa 등(2015)에 의한 계통 분류에 따라 J3 Clade에 속하는 것을 확인하였음

2) 국내 동물유래 바이러스 분리주의 인공감염 실험을 통한 감염 특성 등 분석
- 항원(유전자) 검출시험 양성시료에서 바이러스분리를 시도하였으나 분리되지 않았음

나. SFTS 항체 진단법 간의 진단 효율 비교
1) SFTS 항체 진단 기법 확립
간접면역형광법(IFA)은 ‘13~’15년 연구사업 결과 확립된 방법을 일부 변경하여 검출방법 개선: 기존)SFTSV 감염 1일째 →변경) 감염 7일째에 세포를 수거하여 IFA 슬라이드 제작
- C-ELISA도 항원과 단클론항체의 재 제작 및 조건설정 변경 등을 통해 기존 방법을 개선
- SFTSV는 vero․E6 세포에서 세포변성효과를 나타내지 않으므로 2차 항체 및 형광을 붙여 확인하는 형광중화시험(FA-VN) 방법을 확립하였음

2) 항체검사 기법 간의 민감도·특이도 등 진단 효율 비교
- 검역본부에서 개발한 C-ELISA 방법은 소와 말에 대해서만 진단법이 확립되어 있어 말 467두의 혈청을 이용하여 FA-VN과 IFA 및 C-ELISA 진단법 간의 진단 효율을 분석한 결과, IFA와 C-ELISA는 FA-VN과 각각 93.1% 및 76.7%의 일치도를 나타내었음

(출처 : 최종 연구결과 요약 2p)

Abstract ▼

Introduction
Severe fever with thrombocytopenia syndrome (SFTS) is a newly emerged tick-borne disease caused by SFTS virus. SFTS has been reported in China, Japan, and Republic of Korea (ROK). Since the first human infection of SFTS virus in Korea in 2013, 91 human cases have been reported. In ad

Introduction
Severe fever with thrombocytopenia syndrome (SFTS) is a newly emerged tick-borne disease caused by SFTS virus. SFTS has been reported in China, Japan, and Republic of Korea (ROK). Since the first human infection of SFTS virus in Korea in 2013, 91 human cases have been reported. In addition, SFTS virus was identified from feral cats, ticks and shelter dogs and cats. Although serological study was conducted in horses, prevalence of SFTS virus has not been reported. The purpose of the study was investigated the prevalence of SFTS virus in horses in ROK.

Materials and Methods
Horse sera were provided by Korea Racing Authority(KRA). Samples were collected from 468 horses randomly selected farm throughout the ROK in 2017.
To detect SFTS virus, RT-PCR was applied as previously described(Yoshikawa et al. 2014). In each experiment, positive control which was isolated from goat and negative control were included, and cut-off Ct value was determined as 34.

Results
A total of 468 samples were tested and SFTSV was detected by RT-PCR in 18 (3.8%) horses. Of these, 13 positive samples were in Jeju area. The sequencing results showed that all SFTSV sequence was closely related to a human isolate identified in the ROK.

Conclusions
In this study, we investigated the prevalence of SFTSV in horses. Previous studies have reported SFTSV detection in shelter and cats, feral cat, wild animal and ticks in ROK. This result is similar to the reported SFTS infection rate from wild animals. This is the first reports of SFTSV detection in horses.
Therefore, further studies are required such as indirect fluorescence antibody assay and enzyme-linked immunosorbent assay to detect antibody against SFTS virus is needed for epidemiological investigation.

(출처 : 영문초록 31p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 농림축산검역검사기술개발 연구과제 최종결과보고서 Final Report (FR) ... 2
• Ⅰ. 연구배경 및 목표 ... 5
• 1. 연구배경 ... 5
• 2. 연구의 최종 목표 ... 6
• 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ... 6
• Ⅱ. 연구방법 및 수행전략 ... 7
• 1. 재 료 ... 7
• 2. 연구전략 및 방법 ... 7
• Ⅲ. 연구결과 ... 8
• 1. 반려동물 및 말에서의 SFTS 바이러스 감염 실태 조사 ... 8
• 2. 국내 분리 SFTS 바이러스의 특성조사 및 항체진단법 간 진단효율 비교 ... 16
• Ⅳ. 연구결과요약 ... 22
• 1. 반려동물 및 말에서의 SFTS 바이러스 감염 실태 조사 ... 22
• 2. 국내 분리 SFTS 바이러스 특성조사 및 항체진단법 간 진단효율 비교 ... 22
• Ⅴ. 고 찰 ... 23
• Ⅵ. 연구사업 추진상 문제점 및 건의사항 ... 26
• Ⅶ. 참고자료 ... 26
• IX. 영문초록 ... 29
• 끝페이지 ... 31