초록 ▼

□ 연구개요
[1차년도]
목표1: 다양한 난소암 세포에서의 Diva 발현 양상 분석
목표2: 난소암 세포에서 악성 종양 전개에 미치는 Diva의 영향 분석
목표3: 난소암 내 Diva의 발현과 항암제에 대한 chemosensitivity의 관련성 검증

[2차년도]
목표4: 난소암 세포 Diva 유전자 promotor의 methylation 정도 분석
목표5: Diva 발현 감소에 의한 Aurka 선택적 지향 항암제의 내성 극복과 chemosensitivity 증가 분석 연구
목표6:

□ 연구개요
[1차년도]
목표1: 다양한 난소암 세포에서의 Diva 발현 양상 분석
목표2: 난소암 세포에서 악성 종양 전개에 미치는 Diva의 영향 분석
목표3: 난소암 내 Diva의 발현과 항암제에 대한 chemosensitivity의 관련성 검증

[2차년도]
목표4: 난소암 세포 Diva 유전자 promotor의 methylation 정도 분석
목표5: Diva 발현 감소에 의한 Aurka 선택적 지향 항암제의 내성 극복과 chemosensitivity 증가 분석 연구
목표6: 암세포 내 Diva와 Aurka의 동시 표적 miRNA의 발굴

[3차년도]
목표7: 암 치료의 표적 물질로서 Diva 표적 miRNA 응용 가능성 검증
목표8: 난소암 환자의 임상적 소견과 Diva 발현과의 연관성 검증

□ 연구 목표대비 연구결과
본 연구진은 다양한 암 조직에서 Diva가 발현되고 있음을 확인하였다. 난소암 세포 내에서의 Diva의 기능 연구에 앞서 6 개의 난소암 세포에서 Diva를 비롯한 Aurka와 호르몬 수용체의 발현을 확인하고, A2780과 SKOV3 세포를 사용하여 실험을 수행하였다. 선행 연구 결과와 마찬가지로 난소암 세포에서 Diva의 발현이 억제되었을 때 Aurka의 발현이 감소하였으며 catalytic activity 또한 감소하였고, 암 유발 유전자인 Aurka의 상위 유전자로서 Diva 또한 암을 유발할 것이라고 예상하였다. 그러나 난소암 세포에 Diva siRNA를 처리하였을 때, 세포의 증식이 증가하였으며 세포 주기가 G0/G1기에서 멈춘 것을 확인하였다. 또한 세포의 증식과 이동이 유의하게 증가된 것을 확인함으로써 Diva가 암 억제 유전자로서 기능하고 있다는 결론을 도출하였다.
RNA-Sequencing을 통해 Diva에 의해 유전자를 확인한 결과 대부분 대사과정, 특히 TCA cycle과 관련된 유전자들이었으며 특히 onco-metabolite로 알려져 있는 SDHD, IDH1와 높은 관련성을 갖고 있었다. 실제로 metabolite profiling을 통해 succinate가 축적된 것을 확인하였다. miRNA microarray를 통해 Diva에 의해 조절되는 miRNA을 확인하였으며, 표적 유전자들이 대부분 암 발생에 관여하는 유전자임을 확인하였다.

□ 연구개발결과의 중요성
본 연구진은 이번 연구 과제를 통해서 난소암 세포에서의 Diva의 발현과 기능을 처음으로 확인하였다. 암에서 높게 발현하며 기능이 널리 알려진 Aurka의 새로운 상위 유전자인 Diva 간의 상호작용은 학문적으로 암 세포 내 새로운 조절기전을 확립할 수 있을 것이다. 또한 그 동안 세포사를 조절한다고 알려진 Diva가 암 세포의 대사에 관여한다는 사실을 최초로 발견하였으며, 이는 최근 관심이 증가하고 있는 종양 대사를 연구하는데 새로운 지식을 제공할 것이다. 이번 연구 결과를 토대로 향후 새로운 암 치료의 표적 분자로서 Diva를 응용할 수 있을 것으로 기대된다.

(출처 : 요약문 3p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 3
• 목차 ... 4
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 5
• 1-1. 연구의 개요 ... 5
• 1-2. 연구의 필요성 ... 5
• 1-3. 당초 연구 목표 및 연구 범위 ... 5
• 2. 연구수행내용 및 연구결과 ... 6
• 2-1. 난소암 세포주에서 Diva 관련 유전자 및 호르몬 수용체 발현 확인 ... 6
• 2-2. A2780과 SKOV3 세포내 Diva의 발현 위치 확인 ... 7
• 2-3. A2780과 SKOV3 세포에 Diva siRNA 처리 후, Aurka 발현과 활성의 변화 ... 7
• 2-4. Diva 의 Aurka 발현 조절 기작 ... 8
• 2-5. Diva siRNA 처리에 의한 난소암 세포의 세포사 변화 확인 ... 8
• 2-6. Diva siRNA 처리에 의한 난소암 세포의 세포 증식 속도의 변화 ... 8
• 2-7. Diva siRNA 처리에 의한 난소암 세포의 세포주기와 관련 유전자 발현의 변화 ... 9
• 2-8. Diva siRNA 처리에 의한 난소암 세포의 침습과 이동, 상처 치유 정도의 변화 ... 10
• 2-9. 난소암 세포 내 Diva-Aurka 신호 전달 체계 분석: Diva와 Aurka의 상호작용에 대한 새로운 발견 ... 11
• 2-10. Diva에 의한 Aurka 억제제 내성 극복 연구 ... 11
• 2-11. 난소암 마우스 모델의 암 조직에서 Diva와 Aurka 의 발현 변화 ... 12
• 2-12. 난소암 세포의 에스트로겐과 프로게스테론 처리에 의한 Diva 발현의 변화 ... 12
• 2-13. RNA-Sequencing을 통해 난소암 세포에서 Diva에 의해 조절되는 유전자 목록 확보 ... 13
• 2-14. Metabolite profiling을 통해 난소암 세포에서 Diva siRNA에 의해 변화된 Metabolite 확인 ... 15
• 2-14. miRNA microarray를 통해 난소암 세포에서 Diva siRNA에 의해 변화된 miRNA 확인 ... 16
• 3. 연구개발결과의 중요성 ... 17
• 4. 참고문헌 ... 18
• 5. 연구성과 ... 19
• 대표적 연구실적 ... 21
• 끝페이지 ... 30