초록 ▼

□ 연구개요
임파관신생은 혈관신생과 비슷한 시기와 패턴으로 이어나지만 아직 그 기전 및 억제에 대해선 연구가 시작되는 단계이다. 본 연구는 혈관신생에 비해 임파관신생이 강력하게 일어나는 안구조직의 병리현상을 이용하여 임파관신생에 관여하는 receptor tyrosine kinase (RTK) 중 Neurophilin-2, Dll-NOTCH 의 작용과 이의 downstream activation을 연구해 보고자 한다. 또, 임파관신생 억제 타깃에 대해 tyrosine-O-sulfation을 이용하여 ligand affinity가

□ 연구개요
임파관신생은 혈관신생과 비슷한 시기와 패턴으로 이어나지만 아직 그 기전 및 억제에 대해선 연구가 시작되는 단계이다. 본 연구는 혈관신생에 비해 임파관신생이 강력하게 일어나는 안구조직의 병리현상을 이용하여 임파관신생에 관여하는 receptor tyrosine kinase (RTK) 중 Neurophilin-2, Dll-NOTCH 의 작용과 이의 downstream activation을 연구해 보고자 한다. 또, 임파관신생 억제 타깃에 대해 tyrosine-O-sulfation을 이용하여 ligand affinity가 향상된 sulfated soluble receptor tyrosine kinase (RTK) system mimicking peptide (SSP: Sulfated Soluble Peptide)를 제작해 본다

□ 연구 목표대비 연구결과
(1)면역성 안질환에서 임파관신생의 발현 및 역할연구. 저자가 유지하고 있는 environmental chamber system을이용한 건성안 시스템, orthotic corneal allograft model과 CD207 transgenic mouse model과 B10RIII mouse uveitis model 에서 lymphangiogenesis 가 거부반응에 어떤 역할을 하며 조절을 위한 핵심타깃을 발굴해 보고자 하였다. 그 결과 건성안에서 왜 angiogenesis와 분리된 lymphangiogenesis가 생기며, 이의 역할이 무엇인지를 규명할 수 있었다.
(2) dLyve-1^wt/cre;VEGFR2^flox/flox mice를 이용한 임파관억제 CKO에서 임파관의 역할 규명. 본 연구는 임파관형성이 억제된 transgenic mouse model을 제작하고 이 마우스를 이용한 allograft 및 건성안 실험을 진행하여 임파관신생의 역할과 임파관신생에 중요한 마커를 보다 정확하게 확인해 보고자 하였으며 이를 통해 임파관의 형성이 CD207+, CD11c+ dendritic cell의 activation과 corneal nerve integrity에 중요한 역할을 한다는 것을 확인할 수 있었다.
(3) Tyrosine-O-sulfation (TOS)을 이용한 SSP의 개발 및 in vitro assay. 저자는 TOS를 이용하여 성공적으로 Nrp2 mimicking peptide를 개발하였으며 이의 효과를 allograft model을 통해 확인하여보았다. 또, RTK와 이들의 ligand와의 결합 유무를 확인하기 위하여 LC-MS/MS 와 sulface plasmogen resonance기법을 사용했다.
(4) SSP 의 치료효과 분석. Neurophilin-2 (NRP-2)와 NOTCH signaling 의 억제제로서 SSP가 다양한 in vivo model에서의 임파관신생과 면역반응에 대한 치료효과를 보이는지 전임상적으로 검증하여 보았다. 또, SSP와 synergy를 보일 수 있는 물질을 탐색하여 두 난치성 실명질환에 대한 치료효과를 극대화해 보았다. 마지막으로 눈과 같이 compartmented organ에 국소적 주입과 같은 방법들의 효용성을 탐색하여 전임상제제로서의 가능성을 확인해 보았다.

□ 연구개발결과의 중요성
연구의 결과물크게 두가지로 요약될 수 있다. 첫째는 임파관신생이 안구표면의 면역성 병리현상의 발생과 진행에서 어떤 효과를 낼 수 있는지, 또, 어떤 molecular target이 임파관형성에 유용한지를 알 수 있게 해 주며 NRP-2를 응용한 SSP의 개발의 유용성에 대한 정보를 제공한다. 다양한 유전자적중모델을 이용한 연구결과는 아직 태동단계의 임파관연구에서 중요한 마커와 단서를 정확히 제공할 수 있을 것이다. 간접적으로는 다른 면역질환, 악성종양 등에서의 임파관신생연구에 중요한 단서를 제공할 수 있을 것이며 개발된 SSP는 이와 같은 질환의 치료 및 진행억제 연구에 유용하게 사용될 수 있을 것으로 기대한다. 둘째는, 임파관억제 효과를 갖는 새로운 약제의 개발이다. 본 연구는 비교적 잘 진행된 선행연구를 바탕으로 약제화를 위한 전임상 효력시험 및 약제대사 (PK and PD: pharmacodynamics and pharmacokinetics) 까지 포함하는 최소 3년의 연구를 계획하고 있다.

(출처 : 연구결과 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 4
• (1) 임파관신생(Lymphangiogenesis) 제어연구의 진행과 한계 ... 4
• (2) Tyrosine-O-Sulfation (TOS)의 과정 및 의미 ... 4
• (3) 안구 및 부속기가 임파관신생의 기전을 이해하는데 적절한 기관인 이유 ... 5
• (4) 연구의 방향과 타깃 ... 7
• 2. 연구수행내용 및 연구결과 ... 7
• (1) 임파관형성 부전 마우스의 안구 및 눈물샘의 변화 ... 7
• (2) 임파관촉진 모델에서의 눈물 및 눈물샘액의 단백체(proteome) 변화 ... 9
• (3) 각막이식모델에서 이식거부반응을 억제하는 novel cell population의 발견 ... 10
• (4) CD207 conditional knock down model을 이용하여 Langerhans cell이 각막신경의 integrity를 유지하는데 중요한 세포임을 발견 ... 11
• (5) SSR system을 이용하여 각막이식 거부반응을 억제할 수 있음을 증명 ... 12
• 3. 연구개발결과의 중요성 ... 15
• 4. 참고문헌 ... 16
• 5. 연구성과 ... 17
• 대표적 연구실적 ... 24
• 끝페이지 ... 34