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연구개요
종양세포에 TRAIL를 처리하였을 때 출현하는 TRAIL저항성세포의 기원이나 TRAIL저항성의 기전은 잘 알려져 있지 않음. 또한 종양줄기세포의 TRAIL에 대한 반응성이나 TRAIL저항성세포와 종양줄기세포와의 연관성은 아직 불명확함. 본 연구에서는
· 위암세포주에서 TRAIL저항성세포가 나타나는 원인을 탐구하고 이 세포에서 나타나는 TRAIL저항성의 분자적기전과 종양세포적 특성을 분석하였고
· 위암세포에서 종양줄기세포의 성격을 갖는 세포의 TRAIL 반응성을 분석하고 TRAIL저항성과 종양줄기세포의 특성과

연구개요
종양세포에 TRAIL를 처리하였을 때 출현하는 TRAIL저항성세포의 기원이나 TRAIL저항성의 기전은 잘 알려져 있지 않음. 또한 종양줄기세포의 TRAIL에 대한 반응성이나 TRAIL저항성세포와 종양줄기세포와의 연관성은 아직 불명확함. 본 연구에서는
· 위암세포주에서 TRAIL저항성세포가 나타나는 원인을 탐구하고 이 세포에서 나타나는 TRAIL저항성의 분자적기전과 종양세포적 특성을 분석하였고
· 위암세포에서 종양줄기세포의 성격을 갖는 세포의 TRAIL 반응성을 분석하고 TRAIL저항성과 종양줄기세포의 특성과의 상호관계를 정립하였음.

연구 목표대비 연구결과
· 암세포주에서 TRAIL저항성세포 확립: 1주 또는 4주간 TRAIL을 지속적으로 처리하여 TRAIL저항성세포를 확립하였음. 확립된 저항성세포가 저항성을 유지하는 기간은 차이가 있으나 일정기간이 지나면 TRAIL 감응성을 회복함. 이로 보아 TRAIL저항성은 TRAIL처리에 대한 적응반응일 가능성이 높음.
· TRAIL저항성세포의 TRAIL에 의한 세포사멸, 세포증식능, 세포사멸 및 생존, 증식에 관여하는 유전자의 발현분석: TRAIL저항성세포의 증식속도는 원세포와 유의한 차이가 없음. 저항성세포에서 Akt 발현 증가, DR4, DR5의 발현은 감소됨. TRAIL 저항성세포에서 Akt의 활성을 억제하는 경우 TRAIL저항성이 유지되지 않음.
· TRAIL저항성세포에서 줄기세포인자의 발현, 종양줄기세포 표지자의 발현 분석: 줄기세포인자 KLF4의 발현이 증가됨. 그러나 KLF4 발현을 유발한 세포의 TRAIL 감응성이 높게 나타나 일관성이 없음. 저항성세포는 CD44+/CD133-로 나타남.
· TRAIL저항성세포의 종양세포 특이적 형질 분석: 세포침윤능을 분석한 결과 원세포와 유의한 차이가 없었음.
· TRAIL저항성세포의 항암제에 대한 반응: 원세포에 비하여 TRAIL, bortezomib, TRAIL/bortezomib에 대한 저항성은 높아지고 5-FU에 대한 저항성은 감소됨.
· 위암세포주에서 종양줄기세포의 분리 및 구상체배양법을 이용한 종양줄기세포화: 구상체배양결과 SNU-601에서는 줄기세포인자 KLF4, Nanog, Sox2, SNU-638에서는 KLF4의 발현이 증가되었고 두 세포 모두에서 CD44+/CD133- 세포분획이 증가됨.
Nanog를 인위적으로 발현한 세포에서 5-FU에 대한 저항성이 증가됨.
· 종양줄기세포의 특성을 가진 세포의 TRAIL 및 항암제에 대한 반응성 분석: 구상체배양세포와 원세포간에 cisplatin에 대한 반응성은 차이가 없으나 TRAIL에 대한 감응성이 증가되었음. CD44+세포와 CD44-세포 간에 항암제 반응을 비교한 결과 CD44+세포에서 bortezomib 저항성은 증가, TRAIL 반응성은 차이가 없었음.
· 위암조직에서의 DR4와 DR5의 발현:위암조직에서 유전자형질발현을 TCGA자료를 기초로 분석하였더니 DR4와 DR5 발현은 상관관계를 보였으나 CD44, CD133의 발현과는 무관하였음. DR4와 DR5은 발현 종양발생 초기단계에 높게 발현되고 있음.

연구개발결과의 중요성
· TRAIL저항성세포의 출현은 TRAIL을 종양치료제로 사용하는데 장애요인임. 저항성세포의 출현을 억제하려면 저항성세포의 기원을 구명할 필요가 있음. TRAIL저항성세포가 TRAIL처리에 대한 적응기작으로 나타나므로 적응세포의 출현을 억제하거나 저항성세포가 감응성을 회복한 다음 처치할 필요가 있음을 시사함.
· TRAIL저항성세포의 출현에 Akt의 발현이 중요하게 작용함. 따라서 TRAIL을 지속적으로 처치하는 경우 세포사멸효과를 보려면 Akt저해제를 함께 처리하는 것이 유효할 것이라 추정됨.
· 위암은 빈발하는 질환임에도 다른 암에 비하여 TRAIL반응성이나 종양줄기세포에 대한 보고가 많지 않음. 위암세포의 TRAIL반응성, TRAIL저항성, 종양줄기세포에 대한 본 연구결과는 위암치료제로 TRAIL의 이용 가능성을 높이는데 기여할 것임.

(출처 : 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1연구결과 요약문 ... 2목차 ... 31. 연구개발과제의 개요 ... 4 (1) 연구개발의 필요성 ... 4 (2) 연구목표 ... 4 (3) 연구범위 ... 42. 연구수행내용 및 연구결과 ... 4 (1) 위암세포주에서 TRAIL저항성세포 확립 ... 4 (2) TRAIL저항성세포의 TRAIL에 의한 세포사멸, 세포증식능, 세포사멸 및 생존, 증식에 관여하는 단백질의 발현 분석 ... 5 (3) TRAIL저항성세포에서 줄기세포인자의 발현, 종양줄기세포 표지자의 발현 분석 ... 5 (4) TRAIL저항성세포의 종양세포 특이적 형질 분석 및 항암제에 대한 반응성 분석 ... 5 (5) 구상체배양법을 이용한 위암세포주의 종양줄기세포화 ... 5 (6) 위암세포에서 CD44, CD133의 발현 ... 6 (7) TCGA 자료를 이용하여 위암조직에서 TRAIL수용체의 발현 분석 ... 7 (8) 발표예정논문 ... 73. 연구개발결과의 중요성 ... 84. 참고문헌 ... 95. 연구성과 ... 10끝페이지 ... 10