초록 ▼

□ 연구개요
기억 T 세포에만 존재한다는 기억반응(memory response)이 최근 NK 세포에서 규명되었다. 이를 “기억 유사NK세포 (memory like NK cell)”라고 명명하였는데, 이들 세포는 기존에 알려진 antibody dependent cellular cytotoxicity (ADCC) 기능뿐 아니라 기억반응 기능까지 보유하고 있다. 이에 본 연구에서는 cytokine induced memory like (CIML) NK cell의 기억반응, cytotoxicity 및 ADCC 기능을 활용하여 치료용 고

□ 연구개요
기억 T 세포에만 존재한다는 기억반응(memory response)이 최근 NK 세포에서 규명되었다. 이를 “기억 유사NK세포 (memory like NK cell)”라고 명명하였는데, 이들 세포는 기존에 알려진 antibody dependent cellular cytotoxicity (ADCC) 기능뿐 아니라 기억반응 기능까지 보유하고 있다. 이에 본 연구에서는 cytokine induced memory like (CIML) NK cell의 기억반응, cytotoxicity 및 ADCC 기능을 활용하여 치료용 고형암 치료방안 (유방암과 췌장암 세포주를 주로 사용하여)을 실험실(in vitro)에서 규명하여 향후 임상시험을 위한 기초 자료로 활용하고자 함.

□ 연구 목표대비 연구결과
각종 세포 (freshly isolated NK cells, freshly isolated PBMCs, Expanded NK cells)에서 CIML 배양조건을 확립하려고 시도하였고 purified NK cells에서 CIML 배양조건을 먼저 확립 하였다. 하지만 향후 임상시험에 사용하기 위해서는 증폭된 NK 세포의 수도 중요한데 purified NK cells에서 CIML NK세포의 배양은 조건이 확립되어 있어도 수에서는 많지 않고, T세포를 제거해야 하는 과정이 필요하므로, 이를 해결하기 위해 사용하기 편리한 PBMC와 K562세포를 feeder cell로 활용하여 CIML NK 증폭을 시도하였고, 충분한 NK세포의 증폭은 가능하였지만, memory like NK 세포 특성은 소실되었다.
CIML NK 세포는 각종 유방암, 췌장암 세포주에 killing assay에서 일반 NK 세포 보다 좋은 성적을 보였다. 또한 CIML NK 세포의 사이토카인 분비능(INF-gamma)과 IL-2 수용체인 CD25가 모두 높아짐을 발견하였다. 이에 따라 CIML_NK 세포의 사이토카인 분비능과 세포독성검사를 CFSE 기반으로 검사를 행하였지만 경향성만 보일뿐 통계적 의의는 보이지 않았다. 다음으로 CIML 사이토 카인 조합(IL-12,IL-15, IL-18)을 통해 NK세포의 활성에 대한 연구를 하였다. CIML 사이토카인을 PBMCs에 자극 후 4시간, 24시간 후에 INF-gamma와 CD107a의 증가와 NK cell의 각종 수용체 (NKG2D, NKG2A, CD16, NKp30, NKp46)에서는 감소를 나타냈지만, 활성표지자(CD69, CD25)의 경우는 증가함을 확인할 수 있었다.

□ 연구개발결과의 중요성
CIML NK 세포 배양조건을 확립한 후, 각종 유방암, 췌장암 세포 같은 고형암에서 CIML NK 세포는 IL-15로 활성화된 NK 세포보다 더 높은 cytotoxicity를 나타내는 것을 확인 할 수 있었다. 이러한 결과는 NK 세포에 반응이 약한 고형암에 CIML NK 세포를 이용할 경우에는 좀 더 좋은 임상 효과를 야기 시킬 수 있다는 in vitro 상에서 증거를 얻을 수 있었다.
다음으로 CIML을 만드는 사이토 카인 조합 (IL-12,IL-15, IL-18)자극을 통해 NK 세포에 대한 기능적 변화를 관찰하였다. 그 결과 NK 세포는 INF-gamma와 CD107a, 그리고 활성 표지자인 CD69와 CD25 등도 증가한 것을 알 수 있었고, 이를 통해 고형암에서 더 높은 cytotoxicity를 나타내는 간접적인 이유를 알 수 있었다. 또한 이러한 NK 세포의 기능 변화 확인을 통해 정상인, 환자에게 모두 적용 가능한 NK 기능 검사법 개발에도 적용할 수 있을 것이라 기대됨.

(출처 : 연구결과 요약문 3p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 4
• 1. NK 세포 기반 고형암 ... 4
• 2. 기존의 NK 세포와 다른 기억반응(memory response)을 가진 Memory-like NK 세포 ... 4
• 3. CIML 사이토카인 기반의 NK 세포 자극 후 NK 세포의 기능 검사법 ... 4
• 2. 연구수행내용 및 연구결과 ... 5
• 3. 연구개발결과의 중요성 ... 8
• 4. 참고문헌 ... 9
• 5. 연구성과 ... 10
• 끝페이지 ... 11