초록 ▼

4. 연구결과
가. 채집조사를 통해 표본 800점, 배양체 160점 확보
1) 가야산국립공원 채집결과 308점 확보: 8목 38과 88속 177종
2) 주왕산국립공원 채집결과 208점 확보: 12목 39과 87속 153종
3) 야생시료 및 동물장내로부터 효모, 하등균류 둥의 배양체 160점 확보
나. 분류동정을 통한 신종 후보 43종, 미기록종 후보 37종 발굴
1) 담자균류 신종(MKrdepbta sp. 등) 후보 20종, 미기록종(A genidiks 등) 후보 10종 발굴
2) 혐기성 균류

4. 연구결과
가. 채집조사를 통해 표본 800점, 배양체 160점 확보
1) 가야산국립공원 채집결과 308점 확보: 8목 38과 88속 177종
2) 주왕산국립공원 채집결과 208점 확보: 12목 39과 87속 153종
3) 야생시료 및 동물장내로부터 효모, 하등균류 둥의 배양체 160점 확보
나. 분류동정을 통한 신종 후보 43종, 미기록종 후보 37종 발굴
1) 담자균류 신종(MKrdepbta sp. 등) 후보 20종, 미기록종(A genidiks 등) 후보 10종 발굴
2) 혐기성 균류 신종(Awseowngmyces sp. 등) 후보 10종 발굴
3) 하등균류 신종(Ar0trinium sp. 등) 후보 13종, 미기록종(H.grisea) 후보 12종 발굴
4) 효모 미기록종(Candida gelsemii 등) 후보 15종 발굴
다. 토양시료 확보, 이화학적 특성분석, 종 다양성 분석
1) 22개 토양시료의 이화학적 특성분석 결과
가) 토양내 총질소량은 변화 없지만, 무기질소 함량이 '17년에 비해 감소
(NH₄⁺: 28.21 mg/kg → 17.97 mg/kg, NO₃ → 74.67 mg/kg → 10.01 mg/kg)
나) pH 분석 결과(평균 4,63): 최고-울릉도(5.8), 최저-북한산(4.0)
다) 유기물량(평균 14.13%): 최고-한라산(41.79%), 최저-주왕산(6.4%)
라) TOC/T-N 량(평균 8.19%/0.47%): 최고-한라산(24.2%/1.3%), 최저-주왕산(3.7%/0.17%)
마) 해양성 기후인 울릉도와 제주도의 토성분석결과 유사하며, 다른 내륙지역에 비해 대부분의 항목이 높게 나타남

2) 토양내 미생물 종 다양성 분석
가) 계절의 변화에 따른 문별 상대빈도 변화
(1) 담자균문(Basidiomycota)의 상대빈도가 가을에 미세한 감소 경향을 보이며 강(Class)수준에서의 변화를 보면 주름버섯강(Agaricomycetes)의 상대빈도 감소하는 경향 보임
(2) 자낭균문(Ascomycota)의 상대빈도는 가을철에 증가양상이며, 이중 Sordariomycetes의 상대 빈도가 유의성 있는 증가양상 보임
(3) 글로메로균문(Glomeromycota)의 상대빈도는 가을철에 증가하는 경향 보임
(4) 군집분석을 통해 균류의 잠재적 국내 미기록속 188속 확인

나) 수목 식생에 따른 종 다양성 분석 결과
(1) 담자균문 부고약버섯목(Atheliales), 꾀꼬리 버섯목(Cantharellales), 그물버섯목(Boletales)는 소나무 식생지 토양에서 높은 빈도를 보이며, 무당버섯목(Russulales)은 활엽수 식생지 토양에서 높은 빈도 보임
(2) 자낭균문의 구멍공버섯목(Sordariales)은 활엽수 식생 토양, 고무버섯목(Helotiales)은 소나무 식생 토양에서 높은 빈도를 보임

라. 인공증식의 시료에 대한 생리활성 분석, 대사체 분석
1) 종별 생육특성 결과 P. befwZinws의 생육이 가장 빠르며, 모든 종이 MEB배지와 25~30°C에서 높은 생육특성 보인 반면, L. perlatum은 20°C에서 높은 생육 보임
2) 해면버섯과 덕다리버섯에 톱밥재배 조건 확립 및 화경버섯과 비늘버섯의 대량 증식을 통해 건조중량 1kg 이상씩의 시료 확보
3) 덕다리버섯 시료에서만 항균활성을 보였으며, 해면버섯 시료(DY배지)가 가장 높은 항산화 활성을 보인 반면 말불버섯 시료들은 활성보이지 않음
4) 해면버섯, 자작나무버섯, P. alni는 독특한 대사산물을 형성하는 것으로 보이지만, 덕다리버섯과 말불버섯은 특징적인 대사산물 형성 양상을 안 보임

(출처 : 요약문 6p)

Abstract ▼

The actual range of fungal species on Earth estimated about 2.2-3.8 million. However, about 120,000 fungal species currently accepted and only about 4,000 species have been reported in Korea. For finding novel and unrecorded fungal species, we conducted to collect and classify fungal species in Kore

The actual range of fungal species on Earth estimated about 2.2-3.8 million. However, about 120,000 fungal species currently accepted and only about 4,000 species have been reported in Korea. For finding novel and unrecorded fungal species, we conducted to collect and classify fungal species in Korea. Through the collection survey, 800 mushroom specimens and 160 fungal strains were obtained. The collected specimens were identified as 53 family, 156 genus, 305 species except under identification.
Also we confirmed 43 new species(Lactifluus albidopectinatus etc.) and 37 unrecorded species(Agaricas andrewii etc.) in Korea through genetic and morphological analysis. Soil fungal species diversity results using next generation sequencing on Illumina MiSeq showed that unrecorded 188 genera(Ascomycota 110 genera, Basidiomycota 61 genera) in Korea. The unrecorded genera will be candidate for new species and unrecorded species survey. To verify the useful activities of mushrooms, 5 species(Piptoporus betulinus etc.) were artificially cultivated by liquid medium and sawdust medium cultivating methods. The Laetiporus cremeiporus and P. betulinus cultivated samples showed the anti-microbial activity against E. coli，Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus. The samples of Phaeolus schweinitzii and Lycoperdon periatwn showed a significant level of antioxidant activity. The newly identified species and unrecorded species will be published on scientific journals and then it will be listed on 'Korea National Species List'.

(출처 : Abstract 14p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 참여 연구진 ... 3
• 요약문 ... 5
• 목차 ... 8
• 표목차 ... 11
• 그림목차 ... 12
• Abstract ... 14
• I. 서론 ... 15
• II. 연구방법 ... 20
• 1. 채집조사를 통한 생물자원 확보 ... 20
• 가. 채집조사를 통한 고등균류 표본확보 ... 20
• 나. 채집조사를 통한 하등균류 배양체 확보 ... 22
• 2. 분자계통학적 방법을 이용한 종 동정 ... 26
• 가. 분자계통학적 방법을 통한 고등균류 분류 및 동정 ... 26
• 나. 분자계통학적 방법을 통한 하등균류 분류 및 동정 ... 28
• 다. 분자계통학적 방법을 통한 효모 분류 및 동정 ... 30
• 3. 형태학적 관찰을 통한 종 동정 ... 31
• 가. 고등균류의 형태학적 연구를 통한 종 동정 ... 31
• 나. 하등균류의 형태학적 연구를 통한 종 동정 ... 31
• 다. 효모의 형태 및 배양조건 특성 연구를 통한 종 동정 ... 32
• 4. 신종/미기록종 후보 선정 ... 32
• 가. 고등균류 신종/미기록종 후보 선정 ... 32
• 나. 하등균류 신종/미기록종 후보 선정 ... 33
• 다. 효모류 신종/미기록종 후보 선정 ... 33
• 5. 고정조사구로부터 토양시료 확보 및 토성분석 ... 33
• 가. 고정조사구로부터 토양시료 확보 ... 33
• 나. 토양시료에 대한 이화학적 특성분석 ... 34
• 6. NGS 결과에 따른 종 다양성 분석 ... 35
• 7. 인공증식을 통한 시료확보 ... 35
• 가. 인공증식 대상 종균 확보 및 선정 ... 35
• 나. 인공증식 대상종의 생육특성 분석 ... 36
• 다. 액체배양을 통한 인공증식 및 시료 전처리 ... 36
• 라. 톱밥재배법을 이용한 인공 대량증식 ... 37
• 8. 액체배양 시료의 대사체 분석 ... 38
• 가. LC/MS를 이용한 대사체 분석 ... 38
• 나. 대사체 분석결과 처리 및 분석 ... 39
• 9. 인공증식 시료의 생리활성 분석 ... 39
• 가. 액체배양 시료의 항균활성 분석 ... 39
• 나. 항산화 활성 분석 ... 41
• 나. BIOLOG를 이용한 배양체 특성 분석 ... 42
• 10. 야생효모의 생리기능성 탐색 ... 43
• 가. 시료의 전처리(무세포 추출물 제조) ... 43
• 나. 생리 기능성 탐색 실험 ... 44
• III. 연구결과 ... 46
• 1. 채집조사를 통한 표본 확보 ... 46
• 가. 가야산국립공원 채집조사 결과 ... 46
• 나. 주왕산국립공원 채집조사 결과 ... 51
• 다. 하등균류 채집조사 및 분리배양 결과 ... 63
• 라. 혐기성 균류 분리배양 결과 ... 65
• 마. 효모의 분리배양 결과 ... 66
• 2. 신종 및 미기록종 후보 발굴 ... 68
• 가. 고등균류 신종 및 미기록종 후보 ... 68
• 나. 하등균류 신종 및 미기록종 후보 ... 73
• 다. 혐기성 균류 신종 및 미기록종 후보 ... 82
• 라. 효모 미기록종 후보의 균학적 특성 ... 88
• 3. 토양시료의 이화학적 특성분석 ... 90
• 4. 토양내 미생물 종 다양성 분석 ... 93
• 5. 인공증식을 통한 시료 확보 ... 100
• 가. 균주별 생육특성 확인 ... 100
• 나. 액체배양을 통한 시료 확보 및 시료 전처리 ... 104
• 다. 톱밥재배법을 이용한 자실체 시료 확보 ... 106
• 6. 인공증식 시료에 대한 대사체 분석 ... 108
• 가. LC/MS를 통한 대사체분석 결과 ... 108
• 나. 종과 배지에 따른 대사산물 주 성 분 분 석 (P C A) ... 111
• 다. 종과 배지에 따른 대사산물 부 분 최 소 자 승 판 별 분 석 (P L S - D A ) ... 112
• 라. Heatmap을 통한 대사산물 비 교 ... 113
• 7. 인공증식 시료의 생리활성 분석 ... 114
• 가. 항균활성 (paper disk법 ) 분석 (인천대 ) ... 114
• 나. 항산화활성 분석 결과 ... 117
• 다 . BIOLOG를 이용한 배양체 특성분석 결과 ... 118
• 8. 야생효모의 생리 기능성 탐색 결과 ... 120
• 가. 항치매활성 및 미백활성 측정 결과 ... 120
• IV. 고찰 ... 122
• V . 결론 ... 129
• VI. 참고문헌 ... 132
• 부록 1. 신종/미기록종 후보 목록 ... 142
• 부록 2. 가야산국립공원 채집 표본정보 ... 145
• 부록 3. 주왕산국립공원 채집 표본정보 ... 152
• 부록 4. 고정조사구 토양 특성 분석결과 ... 156
• 부록 5. 신종/미 기록종 후보 상세정보 ... 158
• 끝페이지 ... 287