초록 ▼

□ 연구개요
본 연구에서는 구강편평태선의 원인세균과 상피장벽기능장애와 연관된 숙주인자를 규명해 제안한 병인기전모델을 단계적으로 검증하고, 항생제에 의한 새로운 치료법을 개발하고자 한다. 이와 같은 최종목표 달성을 위해 1차년도에는 먼저 병소조직 내에 침투해 있는 세균 조성을 분석해 병인에 관여하는 세균을 동정하고 분리배양 해 그 특성을 규명할 것이다. 2차년도에는 상피장벽기능장애와 연관된 숙주인자를 동정하고, 그 인자를 유전자 조작한 구강상피세포주를 이용해 구강편평태선 배양접시 모델을 확립할 것이다. 3차년도에는 1차년도에 분

□ 연구개요
본 연구에서는 구강편평태선의 원인세균과 상피장벽기능장애와 연관된 숙주인자를 규명해 제안한 병인기전모델을 단계적으로 검증하고, 항생제에 의한 새로운 치료법을 개발하고자 한다. 이와 같은 최종목표 달성을 위해 1차년도에는 먼저 병소조직 내에 침투해 있는 세균 조성을 분석해 병인에 관여하는 세균을 동정하고 분리배양 해 그 특성을 규명할 것이다. 2차년도에는 상피장벽기능장애와 연관된 숙주인자를 동정하고, 그 인자를 유전자 조작한 구강상피세포주를 이용해 구강편평태선 배양접시 모델을 확립할 것이다. 3차년도에는 1차년도에 분리배양한 병인세균과 환자병소에서 채취한 세균커뮤니티를 이용해 배양접시 모델 및 동물모델에서 구강편평태선 병인에 관여하는 세균과 숙주인자의 상호작용을 연구하고 항생제 치료효과를 검증할 것이다. 이상의 단계적인 연구를 통해 구강편평태선의 병인기전을 완성하고 새로운 치료법을 제시할 것이다.

□ 연구 목표대비 연구결과
1. 구강편평태선 병인에 관여하는 세균인자 동정 및 특성 규명: 구강편평태선 병소 점막표면과 조직 내 구강세균 커뮤니티 비교분석을 통해 병소조직 내에 Escherichia coli 세균종이 유의하게 증가하며 우세종으로 존재하는 것을 관찰, 병소조직으로부터 E. coli 균주 4종을 분리해 유전체 분석까지 마쳤다. In situ hybridization를 이용해 구강편평태선 생검조직 대부분에서 E. coli가 검출되는 것을 확인해 구강편평태선 세균인자 중의 하나로 선정하였다.
2. 구강편평태선 병인에 관여하는 숙주인자 동정: 공공 데이터베이스에 있는 구강점막조직 유전자 발현 데이터 세트 2개를 분석해 후보유전자 CLDN7, MUC21, MHC class I, class II, IL-36γ 등을 선정해 세균에 의한 의전자 발현 조절을 연구했고, IL-36γ 과발현 생쥐를 제작 의뢰하였다. 또한 에스트로겐이 구강상피 장벽기능에 미치는 영향을 연구하였다.
3. 구강편평태선 배양접시 모델 확립: 불멸화된 생쥐 섬유아세포를 제작해 생쥐 구강상피세포와 구강점막 3차원 배양을 여러 번 시도하였으나 실패하였다.
4. 1차년도에 동정한 세균에 의한 동물모델 개발: 환자 병소조직에서 분리한 E. coli를 생쥐 구강에 접종해 구강편평태선이 유발되는지 몇 가지 조건에서 시도하였으나 모두 실패하였고, 후속연구에서 숙주인자로 미네랄 결핍과 IL-36γ 과발현 조건에서 다시 시도할 계획이다.
5. 동물모델에서 구강편평태선 병인기전과 T 림프구의 세균감염이 갖는 면역학적 의의 연구: 동물모델 개발 실패로 수행하지 못했고 현재는 배양접시에서 T 림프구 내 E. coli 생존능을 연구중이다.

□ 연구개발결과의 중요성
선행 연구과제에서는 구강편평태선 병인기전에 세균이 관여할 가능성을 제시하였으나 세균을 특정하지 못한 반면, 본 연구과제에서는 세균인자를 특정하였다는 데 의미가 있다. 특히, 병소조직에서 분리한 Eshcerichia coli 균주와 유전체 정보는 구강에서 처음 보고된 것으로 앞으로 다양한 분야에서 그 이용이 기대된다. 본 과제의 연구개발결과는 구강편평태선 발생에 세균과 숙주인자가 함께 작용해야 한다는 점을 제시하나 숙주인자 연구는 계획대로 원활하게 수행되지 않았다. 후속 연구기간에 본 과제에서 규명하지 못한 부분에 대한 추가 연구를 계속할 예정이다. 후속연구에서 영양소 결핍과 구강세균에 의한 구강편평태선 동물모델 개발에 성공한다면 굉장히 중요한 의미가 있다.

(출처 : 연구결과 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 4
• 2. 연구수행내용 및 연구결과 ... 4
• 1) 구강편평태선과 연관된 세균 동정 (Scientific Research 투고하여 현재 revision 중) ... 4
• 2) 구강편평태선 병소조직에서 분리한 E. coli 균주의 유전체 분석 ... 8
• 3) 구강편평태선과 연관된 숙주인자 동정 ... 10
• 4) 숙주인자 에스트로겐이 상피 물리적 장벽기능에 미치는 영향 ... 11
• 5) 배양접시에서 구강편평태선 병인에 관여하는 세균과 숙주인자의 연관성 연구 ... 12
• 5) 구강상피세포주를 이용한 구강편평태선 배양접시 모델 확립 ... 13
• 6) 숙주인자 유전자 조작 생쥐 제작 ... 14
• 7) 1차년도에 동정한 세균을 이용한 구강편평태선 동물모델 개발 ... 15
• 3. 연구개발결과의 중요성 ... 18
• 4. 참고문헌 ... 19
• 5. 연구성과 ... 20
• 대표적 연구실적 ... 22
• 끝페이지 ... 30