초록 ▼

연구의 목적 및 내용
● 연구 목표 : 소세포암의 암미세환경 조절을 통한 새로운 항암전략 수립
● 연구 내용
< 1년차: 비소세포폐암과 소세포폐암의 암미세환경 의존도 확인 >
1) 비소세포폐암과 소세포폐암의 성장 환경에 따른 세포 성장 비교
- Attach해서 자라는 비소세포폐암과 detach해서 자라는 소세포폐암의 성장 환경에 따른 세포 성장 비교
2) 암미세환경이 수반되는 in vivo와 그것을 mimic한 in vitro에서 비소세포폐암과 소세포폐암의 암성장 비교
- in vitro에서 비

연구의 목적 및 내용
● 연구 목표 : 소세포암의 암미세환경 조절을 통한 새로운 항암전략 수립
● 연구 내용
< 1년차: 비소세포폐암과 소세포폐암의 암미세환경 의존도 확인 >
1) 비소세포폐암과 소세포폐암의 성장 환경에 따른 세포 성장 비교
- Attach해서 자라는 비소세포폐암과 detach해서 자라는 소세포폐암의 성장 환경에 따른 세포 성장 비교
2) 암미세환경이 수반되는 in vivo와 그것을 mimic한 in vitro에서 비소세포폐암과 소세포폐암의 암성장 비교
- in vitro에서 비소세포폐암과 소세포폐암의 세포성장의 차이를 암미세환경이 수반되는 in vivo에서 xenograft를 통해 in vitor에서 암미세환경 mimic condition media와 in vivo에서 얻은 stromal 세포를 가지고 암 성장 비교
3) 암미세환경이 tumor initiation에 얼마나 기여하는지 확인
- in vivo xenograft injection을 암세포와 암세포+stromal로 나누어 extreme limiting dilution analysis를 통해 stromal 세포가 얼마나 tumor에 기여하는지 확인
4) 암미세환경이 tumor initiation과 tumor volume에 얼마나 기여하는지 확인
- in vivo xenograft injection을 암세포와 암세포+stromal로 injection하여 stromal 세포가 tumor initiation과 volume에 얼마나 기여하는지 확인
< 2년차: SCLC와 stromal 세포에서 타겟 후보군 확보 >
1) Immune competent한 mice에서 SCLC의 stromal cell 확보
- hSCLC를 NGS-Nude-B6 mice에 순차적으로 이식하여 Immune competent mice인 B6에서 살아남은 tumor를 확보한 후
- 암기질세포에서 암세포는 human, 기질세포군은 mice의 RNAseq을 이용하여 CIBERsort program을 이용하여 암기질 세포들을 파악
2) SCLC stromal 세포의 conditioned media에서 타겟 후보군 확보
- 암세포와 암기질세포의 conditioned media를 가지고 cytokine array를 통하여 paracrine factor screening
3) SCLC 암미세환경에서 타겟 후보 발굴
- 암기질세포의 종류와 paracrine factor들의 정보를 종합하여 SCLC 타겟 후보 선정
< 3년차: in vitro & in vivo system에서 표적 분자의 암치료 효과 검증 >
1) in vitro 3D co-culture system에서 표적 분자의 암치료 효과 검증
- 2년차에서 screening된 paracrine factor들 중에서 siRNA를 구축하여
- in vitro matrigel 3D co-culture system에서 target validation 후
2) in vivo model에서 표적분자의 암치료 효과 검증
- 1년차에서 구축된 두 가지 in vivo mouse model에서 inhibitor/neu-antibody를 처리하여 암치료 효과 검증

연구개발성과
< 정량적 성과1) >
1) 총연구기간 내 목표연구성과로 기 제출한 값
< 정성적 성과 >
-주요연구성과를 개조식으로 간단히 작성
- 소세포폐암에서 계속 실패를 되었던 targeted therapy를 할 수 있는 타겟 발굴
- 지금까지 소세포폐암은 소세포폐암 자체를 타겟하였으나 본 연구에서는 소세포폐암의 미세환경을 타겟함으로써 소세포폐암 치료의 새로운 페러다임 제시
- 임상에서 얻기 힘든 limited 또는 extensive stage 환자의 샘플로 인하여 소세포폐암에 대한 연구가 어려웠으나 somatic mutation small cell lung cancer mouse model를 통하여 소세포폐암에 대한 연구적인 접근이 용이해질 수 있음
- 소세포폐암 동물 모델은 소세포폐암을 연구하는데 꼭 필요한 모델로서 이 번 연구를 통해서 저희 암센터에서 소세포폐암 동물 모델을 구축 할 수 있게됨.
- 소세포폐암의 기존의 치료방식과 달리 소세포폐암의 암미세환경에서 타겟 발굴을 통한 접근 방식으로 소세포폐암의 새로운 targeted therapy 방법을 개발할 수 있음

연구개발성과의 활용계획(기대효과)
- mouse model에서 initial diagnosis부터 disease recurrence 단계의 샘플을 가지고
- early detection biomarker 발굴
- 소세포폐암의 새로운 driver mutation 연구
- distinct clinical outcome과 therapeutic vulnerabilities에 따른 소세포폐암 분자적 연구
- primary 소세포폐암과 metastatic 소세포폐암의 차이점 연구
- 소세포폐암 환자의 죽음의 원인인 암전이에 대한 연구
- 소세포폐암의 항암제 sensitive와 chemoresistance의 차이를 나타내는 분자적 연구
- mouse model를 기존에 개발된 항암제를 여러 가지 treatment set를 만들어 처리함으로써 새로운 소세포폐암의 항암제 처리 set 개발

(출처 : 요약문 2p)

Abstract ▼

Purpose&Contents
New targeted therapy against small cell lung cancer through tumormicroenvironment regulation

Results
< First year: The identification of how much small cell lune cancer dependent on tumor microenvironemnt >
1) The comparison of how much dependent on TME between SCLC

Purpose&Contents
New targeted therapy against small cell lung cancer through tumormicroenvironment regulation

Results
< First year: The identification of how much small cell lune cancer dependent on tumor microenvironemnt >
1) The comparison of how much dependent on TME between SCLC and NSCLC
- The comparison of cancer cell growth dependent on TME between SCLC and NSCLC
- The comparison of tumor growth bewteen SCLC and NSCLC in in vivo TME and in vivo TME mimic condition.
2) The identification of how much small cell lung cancer and non small cell lung cancer are associated with TME
- how much TME contributes SCLC tumor growth
- how much TME contributes SCLC tumor initiation day and tumor volume

< Second year: Target candidates analysis from SCLC and stromal cells >
1) Stromal cells obtain from tumor tissues of GFP-Tg mice
- Tumor tissues from first year are sorted from cancer cells(RGP) to stromal cells(GFP) by FACS machine
- Sorted stromal cells are more specifically sorted into stormal cells group such as immune cells, fibroblasts, macrophage and so on by FACS machine with specific antibody of stromal cell
2) Target candidates validation from SCLC stromal cells‘ conditioned media
- Screening paracrine factors with conditioned media of SCLC and stromal cells

< Third year: Anticancer effect validation of targeted candidates by using in vitro and in vivo system >
1) Anticancer effect validation of targeted candidates by using in vitro system
- siRNA building from screened paracrine factors in second year
- Anticancer effect validation of targeted candidates by using in vitro 3D martigel co-culture system
2) Anticancer effect validation of targeted candidates by using in vivo system
- Anticancer effect validation of targeted candidates by using orthotopic xenograft and spontaneous mouse model

Expected Contribution
- The collection of tumor tissue specimens from initial diagnosis to disease recurrence stage
- Discovery early detection biomarker of SCLC
- Find the critical driver mutations present SCLC beyond TP53 and Rb1 inactivation
- Defined molecular subset of SCLC with distinct clinical outcome and therapeutic vulnerabilities
- Defined the important molecular difference between primary SCLC and metastatic SCLC
- Discovery drivers of SCLC metastasis
- Defined the molecular differences between de nove chemosensitive and subsequent chemoresistant
- Search the mechanisms of acquired resistance targetable using existing drugs

(출처 : SUMMARY 4p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 국문 요약문 ... 2
• SUMMARY ... 4
• 목차 ... 5
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 6
• 2. 연구수행 내용 및 결과 ... 6
• 3. 연구결과의 중요성 및 활용 방안 ... 14
• 3-1. 연구결과의 중요성 ... 14
• 3-2. 연구결과의 활용방안 ... 15
• 4. 연구수행 달성도 ... 15
• 5. 연구개발과제의 대표적 연구실적 ... 15
• 6. 참여연구원 현황 ... 17
• 7. 기타사항 ... 17
• 8. 참고문헌 ... 17
• 끝페이지 ... 20