초록 ▼

4. 당해년도 연구결과 요약
○ 제1세부과제명: 국내 꿀벌응애 감염 현황 조사
1. 국내 꿀벌응애 양성 봉장으로부터 꿀벌 응애 시료 채취
- 꿀벌 성충에서는 설탕가루를 이용하여 몸에 붙어있는 응애를 채집하였으며, 애벌레에서 응애를 채집할 때는 직접소방조사방법을 사용하여 애벌레 몸에 붙어있거나 소방에 남아있는 응애를 채집
- 국내 지역별 사육 규모에 따라 전국 47개 농가를 대상으로 바로아응애, 가시응애 및 기문응애 감염 여부 확인하고 채집함.
- 바로아 응애(Varroa spp. 암컷 성충, 암컷 약충

4. 당해년도 연구결과 요약
○ 제1세부과제명: 국내 꿀벌응애 감염 현황 조사
1. 국내 꿀벌응애 양성 봉장으로부터 꿀벌 응애 시료 채취
- 꿀벌 성충에서는 설탕가루를 이용하여 몸에 붙어있는 응애를 채집하였으며, 애벌레에서 응애를 채집할 때는 직접소방조사방법을 사용하여 애벌레 몸에 붙어있거나 소방에 남아있는 응애를 채집
- 국내 지역별 사육 규모에 따라 전국 47개 농가를 대상으로 바로아응애, 가시응애 및 기문응애 감염 여부 확인하고 채집함.
- 바로아 응애(Varroa spp. 암컷 성충, 암컷 약충 및 수컷 성충 및 약충의 존재 확인
- 가시 응애(Tropilaelaps spp.) 암컷 성충, 수컷 성충의 존재 확인
- 조사한 농가 중 40개 농가(85.1%)에서 바로아 응애(Varroa spp.), 36개 농가 (76.5%)에서 가시 응애(Tropilaelaps spp.) 감염을 확인
- 전체적인 국내 응애 감염률은 93.6%, 꿀벌 응애와 가시 응애의 중복 감염률은 68%로 나타났으며, 기문 응애(Acarapis spp.)는 확인되지 않았음.

2. 육안 및 현미경 검사에 의한 진단 및 동정
- 채취된 Varroa destructor와 Tropilaelaps spp.의 암수 및 발육단계별 크기는 다음과 같았음

3. 바로아 응애(Varroa spp.)와 가시 응애(Tropilaelaps spp.)의 염기서열 분석 및 진단용 primer 선발
- 바로아 응애 3종 (바로아응애( Varroa destructor) 가시응애(Tropilaelaps spp.) 기문응애 (Acarapis woodi)) 유전자진단을 위한 PCR 및 real time PCR primer를 선발하였음
* 바로아응애의 경우，Cox1, Atp6-cox3, Cytb, 가시응애의 경우，Cox1과 ITS1-6.8S-ITS2를, 기문응애의 경우, aw_F1-flap과 aw_R3선발하였음
- Cox1을 이용한 바로아응애 PCR 진단법을 확립하였음 (2종 - 458bp (internal)； 929bp (external))
- 기문응애 (Acarapis woodi)의 경우，2017년 6.15% (4/65농가)，2018년 4.93% (7/142농가)， 2019년 8.79% (8/92) 농가에서 기문응애 유전자검출 농가로 확인되었음

4. 유전자분석을 통한 꿀벌 응애 계통 분류
- 바로아 응애(Varroa spp.)와 가시 응애(Tropilaelaps spp.)는 Cox1 (external) PCR product 염기서열분석을 통한 유전적 계통분석법을 확립하였음
- 시험봉군으로부터 채취된 Varroa desrtuctor는 Reference Varroa destructor와 98.7% 이상의 유전적 상동성을 보인 반면，Varroa jacobsoni와는 93.8-94.2%의 상동성을 보여 Varroa destructor와 유전적으로 일치도가 높았음
- 시험봉군으로부터 채취된 Tropilaelaps mercedesae는 Reference Tropilaelaps mercedesae와 98.43% 이상의 유전적 상동성을 보인 반면，Tropilaelaps clareae와는 88.13%의 상동성을 보여 Tropilaelaps mercedesae와 유전적으로 일치도가 높았음
- 국내 응애 감염 농가으로부터 채집된 응애 들은 모두 Varroa desrtuctor, Tropilaelaps mercedesae로 동정되었으며 다른 동정되지 않음

5. 실시간유전자분석법 등에 의한 바로아 응애 전파 병원체 조사
- 채집된 바로아 응애 및 가시응애 양성 봉군의 응애와 감염봉군의 성충 및 애벌레에서 꿀벌 주요 병원체 14종*에 대한 병원체 검사를 수행
* 미국부저병，유럽부저병，백묵병，석고병，노제마, 기문응애，기생파리, 냥충봉아부패병，급성꿀벌마비병， 날개불구병，흑색여왕벌세포바이러스병，캐스미르벌바이러스병，만성꿀벌마비병，이스라엘급성마비병
- 채집된 바로아 응애 (Varroa destructor) 와 가시 응애 ( Tropilaelaps mercedesae)의 병원체 조사 결과 많은 문헌에서와 같이 다양한 바이러스 병원체(날개불구병，만성꿀벌마비병，급성꿀벌마비병， 낭충봉아부패병，캐스미르벌바이러스병，이스라엘급성마비병，흑색여왕벌세포바이러스병)，세균성인 미국부저병균 및 유럽부저병균，진균성 병원체(백묵병，석고병，노제마)들이 확인되었다.
- 병원체 조사가 수행된 바로아 응애에서 가장 많이 확인된 병원체는 날개불구병 바이러스로 81.8%에서 확인되었으며, 이스라엘급성마비병바이러스(45.5%), 만성꿀벌마비병 바이러스 및 미국부저병균(42.2%), 낭충봉아부패병 바이러스(36.4%) 등의 순으로 확인됨
- 병원체 조사가 수행된 모든 가시 응애에서는 날개불구병 바이러스가 확인되었으며, 이스라엘급성 마비병바이러스(47.4%), 낭충봉아부패병 바이러스(31.6%) 등의 순으로 확인됨
- 바로아 응애 및 가시 응애에서 가장 많이 확인된 병원체는 날개불구병 바이러스로 바로아 응애의 82%, 가시응애의 100%에서 확인
- 날개불구병바이러스는 대부분의 꿀벌 응애에서 매우 높은 농도로 확인이 되었으며, 감염봉군의 성충과 유충에서도 높은 농도 확인
- 날개불구병바이러스를 포함하여 대부분의 경우 꿀벌 응애에서 높은 바이러스를 보유하고 있었으며 많게는 ~109 까지 높게 확인되어, 응애에서 병원성 전파 가능성 확인
- 응애 감염 봉군의 성충 및 유충에서도 꿀벌 응애가 보유하고 있는 병원체들이 유사하게 확인
- 또한 응애 내 병원체 조사 결과 다양한 병원체들의 복합감염율이 높게 확인됨 1가지 병원체에만 감염된 응애는 17.31%로 확인되었으며, 두 가지 병원체에 복함 감염된 응애는 19.23%, 세가지 복합감염 21.15%, 4가지 복합감염 25%, 5가지 복합감염 11.54%, 6가지 복합감염 3.85%, 7가지 복합감염이 1.92%로 확인됨

(출처 : 4. 당해년도 연구결과 요약 1p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• I. 연구배경 및 목표 ... 4
• 1. 연구배경 ... 4
• 2. 연구최종목표 ... 5
• 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ... 6
• II. 연구방법 및 수행전략 ... 6
• 1. 재 료 ... 6
• 2. 연구전략 및 방법 ... 6
• III. 연구결과 ... 7
• IV. 연구결과요약 ... 27
• 1. 국내 꿀벌응애 양성 봉장으로부터 바로아 응애 시료 채취 ... 27
• 2. 육안 및 현미경 검사에 의한 진단 및 동정 ... 27
• 3. 바로아 응애(Varoa spp.)와 가시 응애(Tropilaelaps spp.)의 염기서열 분석 및 진단용 primer 선발 ... 27
• 4. 유전자분석을 통한 꿀벌응애 계통 분류 ... 28
• 5. 실시간유전자분석법 등에 의한 꿀벌응애 전파 병원체 조사 ... 28
• V. 금후 추진계획 ... 29
• VI. 참고자료 ... 29
• 끝페이지 ... 30