보고서 정보
주관연구기관 |
농림축산검역본부 Animal and Plant Quarantine Agency |
연구책임자 |
신연경
|
참여연구자 |
김은주
,
조수동
,
이은정
,
김보혜
,
최은진
,
송재영
,
이경기
,
김성희
,
이윤정
,
강현미
,
윤하정
,
강완철
|
보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
|
발행년월 | 2015-12 |
과제시작연도 |
2015 |
주관부처 |
농림축산식품부 Ministry of Agriculture, Food and Rural Affairs(MAFRA) |
등록번호 |
TRKO202000031032 |
과제고유번호 |
1545009829 |
사업명 |
농림축산검역검사기술개발 |
DB 구축일자 |
2020-11-28
|
키워드 |
인플루엔자.모니터링.감시.변이.Influenza.monitoring.surveillance.variant.
|
초록
▼
5. 최종 연구결과 요약
o 1세부과제 : 동물 인플루엔자 변이감시 모니터링 체계 개선
□ 동물인플루엔자 모니터링 체계 구축 및 개선 (1년차)
○ 축종별(반려동물, 말) 시료채취 및 검사법 표준화
- 바이러스 검사법 표준화 : OIE Terrestrial Manual 준용 적용하여 표준 검사법 정립
- 항체검사법 표준화 : OIE Terrestrial Manual 준용 적용하여 표준 검사법 정립
○ 축종별(반려동물, 말, 동물원동물) 인플루엔자 모니터링 실시
- 반려동물(개 및 고양이)
5. 최종 연구결과 요약
o 1세부과제 : 동물 인플루엔자 변이감시 모니터링 체계 개선
□ 동물인플루엔자 모니터링 체계 구축 및 개선 (1년차)
○ 축종별(반려동물, 말) 시료채취 및 검사법 표준화
- 바이러스 검사법 표준화 : OIE Terrestrial Manual 준용 적용하여 표준 검사법 정립
- 항체검사법 표준화 : OIE Terrestrial Manual 준용 적용하여 표준 검사법 정립
○ 축종별(반려동물, 말, 동물원동물) 인플루엔자 모니터링 실시
- 반려동물(개 및 고양이) 모니터링 : 총 199두 검색, 개 바이러스 분리 1건 (‘13)
- 말 모니터링 : 총 229두 검색, 바이러스 분리 0건 (‘13)
- 농장마(백신접종) 92두 항체양성율 : 평균 91.5 ~ 100% (‘13)
○ 돼지인플루엔자 모니터링 체계 대상 추가 구축
∙농장 및 도축장 체계에서의 바이러스 및 혈청학적 조사
- 2013년 하반기 농장 돼지 조사 : 229두 검사, 바이러스 분리 0건 (‘13)
- 2013년 상반기 도축장 돼지 1,197두 항체 양성율 조사
: HI 결과, HA1 10.0~22.4%, HA3 3.0%, NP ELISA 결과, 69%
- 2013년 농장 돼지 90두 항체 양성율 조사 : NP ELISA 결과 58.9%
□ 동물인플루엔자 구축 및 개선한 모니터링 기법 적용 및 평가 (2년차)
○ 구축 및 개선 동물(반려동물, 말) 인플루엔자 모니터링 체계 적용 및 평가
- 반려동물(개, 고양이) 모니터링 : 집단사육 시설 개 등 총 517두 검색, 분리 1건 (‘14)
- 말 모니터링 : 농장 및 도축장 시료 총 427두 검색, 바이러스 분리 0건 (‘14)
- 마사회 관리 말 항체양성율 조사 : '13년 1,421두 평균 81.3 ~ 98.3%, ‘14년 1,530두 평균 87.1 ~ 100%
- 돼지인플루엔자 17농가 총 196점 검색 : 2농가 바이러스 7주 검색 (H3N2 1농가 4주, H1N1 1농가 3주) (‘14)
- 2014년 상반기 도축장 돼지 939두 항체양성율 조사 : NP ELISA 결과, 58%
- 2014년 농장 돼지 145두 항체양성율 조사 : NP ELISA 결과, 54.5%
□ 동물인플루엔자 모니터링 체계 구축 및 평가 (3년차)
○ 구축 및 개선 동물(반려동물, 말) 인플루엔자 모니터링 체계 적용 및 평가
1) 반려동물 보다 집단사육시설 개 집중검색 : 153시료 검사결과 전 두수 음성
2) 2013/2014 분리 CIVs 특성분석결과
- 8개 유전자 분절의 가장 일반적인 형태는 K, G, E, 3B, F, 2D, F, 1E
- 2013/2014 분리주 아미노산 변이조사결과 : 2007년 이후 유행 H3N2와 유사
- 유전자 연결 분석 결과 : 2010년 이후 분리주와 근연관계 확인
3) 말인플루엔자 항원 검색 및 항체 분포조사
- 말 도축장 폐 시료 등 142건 검사결과 : 전두수 항원 음성
- 말인플루엔자 항체가 분포 조사(정기적 백신접종 실시 말 그룹대상)
: 마사회 시료 총 668두 검사 결과 육성마(yearling) 및 기타를 제외한 599두(경주마, 승용마, 종빈마, 씨수말) 평균 항체양성율 95.1~100%
4) 돼지인플루엔자 농장 검색 : 3개 농장 78개 시료 검사결과 전 두수 음성
5) 2014년 돼지인플루엔자 분리주 분석결과 : H3N2v 및 신종플루 H1N1 확인
o 2세부과제 : 동물인플루엔자 항체/항원 모니터링 검사법 평가 및 개선
□ 다축종 적용 가능한 기존 동물인플루엔자 항체 및 항원 검사법 비교 평가 (1년차)
○ 축종별(반려동물, 고양이, 말, 동물원동물, 조류) 동물인플루엔자 A 항체검사키트 평가
- 인플루엔자 공통항원(NP, M) 기반 항체진단키트 조사 : 다축종 4종, 돼지 1종 (‘13)
- 돼지인플루엔자 내부 표준항혈청 패널 확보 : 총 27종, HI 및 ELISA 비교 검사 실시 (‘13)
- 말인플루엔자 내부 표준항혈청 패널 확보 : 총 14종, HI 및 ELISA 비교 검사 실시 (‘13)
- 개인플루엔자 내부 표준하혈청 패널 확보 : 총 3종, HI 및 ELISA 비교 검사 실시 (‘13)
○ 축종별 동물인플루엔자 바이러스에 대한 A typing 프라이머 제작 및 RT-PCR법 평가
- 인플루엔자 RT-PCR 법 평가용 바이러스 패널 선정 : SIV 3종, CIV 2종, EIV 2종, Human 1종 (‘13)
- 인플루엔자 RT-PCR 법 평가용 프라이머 선정 : 1종 자체연구(‘09년 수행), 1종 말 인플루엔자 OIE Terrestrial Manual(‘13)
- RT-PCR 민감도 조사 : 두 조건 모두 10-1TCID50/ml 이하로 검출, 다축종 적용 가능 (‘13)
□ 다축종 적용 가능한 동물인플루엔자 항체 및 항원 검사법 개선 (2년차)
○ 축종별 상용 동물인플루엔자 A 항체검사키트 개선
- 표준혈청 이용 공통항원에 대한 항체 ELISA 검출민감도 조사 : 키트별 차이 확인
- 돼지인플루엔자 항체검사에 적합한 상용 ELISA 선발 후 야외시료에 적용 검사
: 키트별 항체양성율에 차이 있으며 검출민감도와 유사한 결과 확인
- 말인플루엔자 HI 검사 정확도 개선 : OIE 말인플루엔자 표준연구소(영국)에서 EI 표준바이러스 4종 (Eurasian, FL1, FL2) 도입하여 OIE 백신권고안인 Florida clade 1 및 clade 2 lineage에 대한 항체 검사 실시 및 야외시료 검사에 적용
○ 축종별 동물인플루엔자 바이러스에 대한 A typing RT-PCR법 최적화
- 민감도 확인된 두 RT-PCR 조건 야외 시료에 적용 검사
: 야외 swab 음성시료에 바이러스 spiking 하여 조사 결과, spking 전보다 한단계 낮거나 동일한 검출감도 확인
□ 다축종 적용가능한 동물인플루엔자 항체 및 항원 검사법의 적용 (3년차)
○ 축종별 동물인플루엔자 A 항체검사법 적용 및 평가
1) 반려동물 혈청 36두 검사결과 : 전 두수 항체 음성
2) 전국 도축장 돼지혈청에 대한 인플루엔자 항체 양성율 조사
- 2014년 하반기 시료 1,020두 검사결과 539두 양성 (양성율 52.8%)
○ 축종별 동물인플루엔자 바이러스에 대한 A typing RT-PCR법의 적용 및 평가
1) 국내 유행 CIVs 바이러스 유전자 신속분석 multiplex RT-PCR 개발 및 평가
- 45개 표준바이러스 이용 평가 결과 CIV H3N2 신속분석 및 변이/신규유입 바이러스 감별 가능한 조건 확보 확인
2) 야외 말에서 채취한 시료에서 인플루엔자 분리 시 기존 유행 말인플루엔자 또는 신규 유입 인플루엔자 바이러스 여부를 신속하게 확인하기 위한 multiplex RT-PCR을 개발
- 8가지 유전자에 대한 4가지 combination 개발 및 평가
3) 국내 SIV 유전자 염기서열 분석을 통해 SIV lineage specific primer 개발을 수행
- 국내에 endemic한 3-4개의 의미 있는 유전자 조합을 구성하여 Multipelx RT-PCR를 기반으로 개발
(출처 : 요약 2p)
목차 Contents
- 표지 ... 1Ⅰ. 연구배경 및 목표 ... 5 1. 연구배경 ... 5 2. 연구최종목표 ... 7 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ... 8Ⅱ. 연구방법 및 수행전략 ... 9 1. 재 료 ... 9 2. 연구전략 및 방법 ... 9Ⅲ. 연구결과 ... 10Ⅳ. 연구결과요약 ... 41 1. 동물 인플루엔자 변이감시 모니터링 체계 개선 ... 41 2. 동물인플루엔자 항체/항원 모니터링용 검사법 개선 및 적용 평가 ... 42V. 고찰 ... 43VI. 연구결과 활용실적 ... 45VII. 연구사업 추진상 문제점 및 건의사항 ... 46VIII. 주요연구 변경사항 ... 46IX. 참고자료 ... 47끝페이지 ... 49
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