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5. 최종 연구결과 요약
◦ 제1세부과제 : 국내 유행 보툴리즘 오염원 확인 및 전염 경로 연구
- '12. 1월 - '15. 12월까지 보툴리즘이 총 24건 발생함. 축종별로 토종닭이 11건으로 가장 많고 메추리 4건, 꿩 2건, 산란계 1건, 사육 청둥오리 1건, 혼합 사육 1건, 야생조류 5건으로 확인됨
- 산란계, 사육 청둥오리 각 1건이 먹이던 음식물 쓰레기 유래 사료에서 원인균이 검출되었고, 사육 청둥오리 1건도 음식물 쓰레기를 급이하여 보툴리즘이 발생한 것으로 추정
- 가금에서 보툴리즘 오염율을 확

5. 최종 연구결과 요약
◦ 제1세부과제 : 국내 유행 보툴리즘 오염원 확인 및 전염 경로 연구
- '12. 1월 - '15. 12월까지 보툴리즘이 총 24건 발생함. 축종별로 토종닭이 11건으로 가장 많고 메추리 4건, 꿩 2건, 산란계 1건, 사육 청둥오리 1건, 혼합 사육 1건, 야생조류 5건으로 확인됨
- 산란계, 사육 청둥오리 각 1건이 먹이던 음식물 쓰레기 유래 사료에서 원인균이 검출되었고, 사육 청둥오리 1건도 음식물 쓰레기를 급이하여 보툴리즘이 발생한 것으로 추정
- 가금에서 보툴리즘 오염율을 확인하기 위해 도계장에 출하되는 육계 150수, 토종닭 150수의 맹장내용물을 채취한 후 검사한 결과 모두 음성으로 확인됨
- 야생 조류에서 86마리의 결장 내용물을 조사한 결과 1마리에서만 보툴리눔균 양성이 나왔고, 135점의 야생조류 분변 시료 중에 3건에서 양성이 나옴
- 보툴리즘 발생농장별로 오염원 조사를 위해 토종닭 및 산란계 농장 각각 1개소에 대한 환경시료 검사결과 축사 내·외부 토양에서 독소가 확인되어 독소가 축사내부 뿐만 아니라 외부에도 분포하고 있는 것을 확인함
- 서울 중랑천에서 수행하던 상수도 공사에 의해 보툴리즘이 발생하였다는 언론 보도가 있어서 조사해본 결과 상수도 공사 현장에서 균이 검출되지 않음
- 분리균주 간에 PFGE 패턴을 분석하였고, 보조적인 방법으로 보툴리눔 독소 유전자의 서열분석을 통해 근연관계를 추정하였다. 두 방법의 결과는 유사하게 나옴
- 여과한 보툴리눔균 상층액과 정상 닭의 맹장내용물을 배양한 실험을 통해, 독소 유전자를 가진 파지(phage)에 의해 닭 맹장의 정상 세균총에 존재하는 세균이 보툴리눔균으로 전환(phage conversion) 될 수 있는 가능성을 도출
- 병성감정으로 의뢰된는 야생조류 86 마리 중 1마리에서만 보툴리눔 양성
- 843점의 야생조류 분변을 검사한 결과 그 중 17점에서 양성이 나온 것을 검출

◦ 제 2세부과제 : 조류 보툴리즘 진단법·동정법 개선과 약제 감수성검사
- 진단법 개선을 위해 single tube nested PCR을 개발
· 민감도 검사결과, 1.1 pg/㎕의 검출 한계를 보임
· 특이도 조사에서 19균종(그람양성, 그람음성, spore 형성균, 비spore 형성균등)과 감별이 가능한 것으로 확인
· 맹장 내용물에서 증균 과정 없이 DNA를 추출하여 양성시료를 대상으로 검출여부를 조사한 결과 87.5%(7/8)의 양성
· 또한 3일 동안 증균한 다음 별도의 DNA 추출 과정 없이 끓여서 boiling template를 이용할 경우 100%(8/8) 양성
- BSAC manual을 토대로 분리주 별 약제 감수성 조사를 한 결과
· 바시트라신(bacitracin), 테트라사이클린(tetracycline), 페니실린(penicilin), 세포탁심(cefotaxime) 등에 감수성
· 트리플술파(tri-sulfate), 술피속사졸-트리메소프림 합제(sulfisoxazole-trimethoprime) 및 사이클로세린(cycloserine)에는 내성
- 보툴리눔균 동정법 개선을 위해 항생제 첨가 선택 배지를 개발
· 보툴리눔균에는 내성이면서 다른 맹장내용물 유래 부생세균에는 감수성인 약제 선발
· 실험결과 트리플설파가 조건을 만족하였기에 트리플설파를 넣어 선택배지 제조
- 농가에서 소독제를 추천하기 위해 소독제 유효성 평가를 수행
· 유럽 표준인(prEN14347)에 따라 수행
· 실험 결과 과초산, 차아염소산, 포르말린 계열 소독제에서 소독효과를 보임

(출처 : 5. 최종 연구결과 요약 1p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• Ⅰ. 연구배경 및 목표 ... 3
• 1. 연구배경 ... 3
• 2. 연구최종목표 ... 4
• 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ... 4
• Ⅱ. 연구방법 및 수행전략 ... 5
• 1. 재 료 ... 5
• 2. 연구전략 및 방법 ... 5
• Ⅲ. 연구결과 ... 6
• 1. 제1세부과제 : 국내 조류 보툴리즘 오염원 확인 및 전염 경로 확인 ... 6
• 2. 제2세부과제 : 조류 보툴리즘 진단법·동정법 개선 및 약제 감수성 검사 ... 17
• Ⅳ. 연구결과요약 ... 25
• 1. 제1세부과제: 국내 유행 보툴리즘 오염원 확인 및 전염 경로 연구 ... 25
• 2. 제2세부과제 : 조류 보툴리즘 진단법·동정법 개선과 약제 감수성검사 ... 25
• Ⅴ. 고 찰 ... 26
• Ⅵ. 연구결과 활용실적 및 계획 ... 29
• Ⅶ. 연구사업 추진상 문제점 및 건의사항 ... 29
• Ⅷ. 주요연구과제 변경사항 ... 29
• IX. 참고자료 ... 30
• 끝페이지 ... 30