[보고서]쥐 모델에서 retinaldehyde dehydrogenase 1의 결핍이 대동맥 석회화 및 동맥경화증에 미치는 영향

이은정

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[국가R&D연구보고서] 쥐 모델에서 retinaldehyde dehydrogenase 1의 결핍이 대동맥 석회화 및 동맥경화증에 미치는 영향
The effects of retinaldehyde dehydrogenase 1 deficiency on aortic calcification and atherosclerosis in a mouse model 원문보기

보고서 정보
주관연구기관	성균관대학교 SungKyunKwan University
연구책임자	이은정
보고서유형	최종보고서
발행국가	대한민국
언어	한국어
발행년월	2020-03
과제시작연도	2019
주관부처	과학기술정보통신부 Ministry of Science and ICT
연구관리전문기관	한국연구재단 National Research Foundation of Korea
등록번호	TRKO202100000816
과제고유번호	1711089500
사업명	개인기초연구(과기정통부)(R&D)
DB 구축일자	2021-06-05
키워드	비타민A.혈관석회화.동맥경화증.Retinoid 대사.Retinaldehyde.Calcification paradox.

초록 ▼

○ 연구개요
본 연구는 레티노이드 대사가 비만과 혈관 석회화 및 동맥경화증의 연관성에 미치는 영향 및 기전을 밝히고자 하며, 레티노이드 대사물의 하나인 Retinaldehyde가 가지고 있는 항 동맥경화증 효과를 검증하고자 함. 나아가 본 연구는 비만과 골다공증, 혈관 석회화의 연관 고리를 풀 수 있는 기전을 검증 제시하여, 항비만, 항노화 및 항혈관석회화가 가능한 신물질을 개발하는 데 목표가 있음.

○ 연구 목표대비 연구결과
1. 혈관 평활근 세포주에서 석회화 유도 및 Retinoids의 석회화 조절 관찰
■ RVSMC (Rat vascular smooth muscle cell)의 배양 및 석회화 유도
■ RVSMC에서 Retinoids에 의한 석회화 조절 분석
■ RVSMC에서 Retinoids에 의한 석회화의 변화 관찰
2. Primary mouse VSMC에서 Retinods의 석회화 조절 분석
■ Primary mouse VSMC의 분리 및 석회화 유도
■ 레티노이드 대사의 인위적 조절에 의한 석회화의 변화 관찰
3. Aldh1a1 KO에서 분리한 primary VSMC에 혈관석회화의 변화 관찰
■ Aldh1a1 결핍쥐 모델의 DNA screening
■ Aldh1a1 결핍쥐 모델에서 석회화 조절 분석
■ Aldh1a1 결핍 쥐 모델에서 유전자 발현 수준에서의 석회화 변화 분석

○ 연구개발결과의 중요성
Aldh1a1 결핍 생쥐를 이용하여 Retinoic acid에 의한 중간엽 줄기세포의 조골세포 분화 억제 및 근육세포 분화 촉진 효능을 밝히고, 그 기전을 제시하고자 연구 진행 중에 있음. 현재 연구의 성공적인 수행은 당초 연구계획인 항비만, 항골다공증 및 항혈관석회화를 유도할 수 있는 Retinoid 대사의 조절기전을 제시하는데 필수적인 연구배경을 제공할 거라 생각됨.

(출처 : 연구결과 요약문 3p)

목차 Contents

표지 ... 1
연구결과 요약문 ... 3
목차 ... 4
1. 연구개발과제의 개요 ... 5
2. 연구수행내용 및 연구결과 ... 6
1. 혈관 평활근 세포주에서 석회화 유도 및 Retinoids의 석회화 조절 관찰 ... 6
2. Primary mouse VSMC에서 Retinods의 석회화 조절 분석 ... 9
3. Aldh1a1 KO에서 분리한 primary VSMC에 혈관석회화의 변화 관찰 ... 11
3. 연구개발결과의 중요성 ... 13
4. 참고문헌 ... 14
5. 연구성과 ... 16
대표적 연구실적 ... 16
끝페이지 ... 17

표/그림 (8)

표 Effect of Retinoids on Pi-induced vascular calcification in A-10 cells. A-10 cells were treated with Pi (2 mM) + CaCl2 (2 mM), followed by incubation with or without Retinaldehyde (Rald), Retinaldehyde + DEAB or Retinoic acid (RA) for 7 days. After incubation for 7 days, the deposition of calcium was analysed using (A) Bright field image, (B) Alizarin red S staining and (C) calcium assay. *p < 0.05 and ***p < 0.001
표 The gene expression of smooth muscle cell marker and osteoblast markers by retialdehyde and retinoic acid in Pi-treated A-10 cells. A-10 cells were treated with Pi (2 mM) + CaCl2 (2 mM), followed by incubation with or without Retinaldehyde (Rald), Rald + DEAB, Retinoic acid (RA) or RA+DEAB for 7 days. The expression of (A) SM22α gene and (B-D) Pit-1, BMP-2 and Runx2 genes were measured using real time PCR. **p < 0.01 compared with control cells; #p < 0.05 and ##p < 0.01 compared with Pi-treated cells
표 Establishment process of primary vSMC from C57BL/6 mice. a-d isolation and cell culture of primary vSMC. e, f: before and after exposure to Pi
표 Measurement of calcification by retinoid molecules in primary mouse vascular smooth muscle cells
표 Effect of Radlh1 gene knock-down on primary mouse VSMC calcification
표 DNA screening of Aldh1a1 KO mice. Phenotypes of mice were analyzed by Semi-quantitative RT-PCR. Mice were distinguished to wild type (+/+, 665 bp), heterozygous (+/-, ~300bp and 665 bp)or homozygous (-/-, ~300bp) mutants
표 Comparison of vascular calcification between wild-type and Aldh1a1 KO primary cells. (A) primary cells were derived from a wild-type and Aldh1a1 KO mice. Primary cells were treated with Pi (2 mM) for 7 days. After incubation for 7 days, the deposition of calcium was analysed using (B) calcium assay, (C) Bright field image and (D) Alizarin red S staining. ***p < 0.001
표 The gene expression of smooth muscle cell marker and osteoblast markers in wild-type and Aldh1a1 KO primary cells. Primary cells derived from a wild-type and Aldh1a1 KO mice were treated with Pi (2 mM) for 7 days. After incubation for 7 days, the expression of (A) Aldh1 protein and gene, (B) SM22α gene and (C) Pit-1, BMP-2 and ALP genes were measured using western blot and real time PCR, respectively. *p < 0.05, **p < 0.01 and ***p < 0.001

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