![HA-CB[6] 합성](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_15_image_2.png "HA-CB[6] 합성")
![HA-CB[6]/DAH 하이드로젤 합성](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_15_image_3.png "HA-CB[6]/DAH 하이드로젤 합성")
![HA-CB[6]/DAH 하이드로젤 내에서의 Cell viability](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_15_image_4.png "HA-CB[6]/DAH 하이드로젤 내에서의 Cell viability")
![CB[6]-DAH 하이드로젤에 충진된 제대혈 유래 중간엽 줄기세포의 Calcein-AM/Ethidium homodimer를 이용한 Live/dead cell 분석](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_23_image_1.png "CB[6]-DAH 하이드로젤에 충진된 제대혈 유래 중간엽 줄기세포의 Calcein-AM/Ethidium homodimer를 이용한 Live/dead cell 분석")
![Rheology meter를 이용한 CB[6]-DAH 하이드로젤의 loss modulus 및 storage modulus 분석 (a) 2 wt% CB[6]-HA + 2 wt% DAH-HA (b) 5 wt% CB[6]-HA + 5 wt% DAH-HA](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_23_image_2.png "Rheology meter를 이용한 CB[6]-DAH 하이드로젤의 loss modulus 및 storage modulus 분석 (a) 2 wt% CB[6]-HA + 2 wt% DAH-HA (b) 5 wt% CB[6]-HA + 5 wt% DAH-HA")
![Dexa-CB[6] 유도체 합성](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_25_image_1.png "Dexa-CB[6] 유도체 합성")
![TGF-β3, Dexa와 Dexa-CB[6] 유도체를 통한 CB[6]-DAH 하이드로젤에 담지된 중간엽 줄기세포의 연골 분화유도 RT-qPCR 분석](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_25_image_2.png "TGF-β3, Dexa와 Dexa-CB[6] 유도체를 통한 CB[6]-DAH 하이드로젤에 담지된 중간엽 줄기세포의 연골 분화유도 RT-qPCR 분석")
![TGF-β3, Dexa와 Dexa-CB[6] 유도체를 통한 CB[6]-DAH 하이드로젤에 담지된 중간엽 줄기세포의 연골 분화유도 조직염색 분석](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_26_image_1.png "TGF-β3, Dexa와 Dexa-CB[6] 유도체를 통한 CB[6]-DAH 하이드로젤에 담지된 중간엽 줄기세포의 연골 분화유도 조직염색 분석")
![Retinoic acid-HA 유도체 합성 (a) Retinoic acid-CB[6] 유도체 합성과정 (b) Retinoic acid-CB[6] 유도체의 1H NMR 분석](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_27_image_1.png "Retinoic acid-HA 유도체 합성 (a) Retinoic acid-CB[6] 유도체 합성과정 (b) Retinoic acid-CB[6] 유도체의 1H NMR 분석")
![Matrigel 및 Matrixen과 RA-HA 유도체(R-HA)와 Dexa-CB[6] 유도체(D-CB[6])가 도입된 CB[6]-DAH 하이드로젤의 중간엽 줄기세포의 생존율 비교 (Calcein-AM/Ethidium homodimer를 이용한 Live/dead cell분석)](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_27_image_2.png "Matrigel 및 Matrixen과 RA-HA 유도체(R-HA)와 Dexa-CB[6] 유도체(D-CB[6])가 도입된 CB[6]-DAH 하이드로젤의 중간엽 줄기세포의 생존율 비교 (Calcein-AM/Ethidium homodimer를 이용한 Live/dead cell분석)")
![EGFP를 도입한 중간엽 줄기세포를 담지한 CB[6]-DAH 하이드로젤의 마우스 내에서 분해속도 비교 (같은 유전자 조작줄기세포에 각기 다른 전달체를 가진 집단 G1-PBS, G2-Matrigel, G3-Matixen, G4- CB[6]-DAH 하이드로젤, G5- R-HA와 D-CB[6]가 도입된 CB[6]-DAH 하이드로젤)](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_28_image_1.png "EGFP를 도입한 중간엽 줄기세포를 담지한 CB[6]-DAH 하이드로젤의 마우스 내에서 분해속도 비교 (같은 유전자 조작줄기세포에 각기 다른 전달체를 가진 집단 G1-PBS, G2-Matrigel, G3-Matixen, G4- CB[6]-DAH 하이드로젤, G5- R-HA와 D-CB[6]가 도입된 CB[6]-DAH 하이드로젤)")
![CB[6]-DAH 하이드로젤을 전달체로 항암 치료유전자 IL-12M가 도입된 중간엽 줄기세포의 항암 치료 개념도 (a) 중간엽 줄기세포에 아데노바이러스를 이용한 항암 치료유전자 IL-12M 도입 (b) 유전자 조작된 중간엽 줄기세포를 CB[6]-DAH 하이드로젤에 담지하여 RA-HA 유도체, Dexa-CB[6] 유도체와 함께 종양조직에 주사하여 치료단백질 분비](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_28_image_2.png "CB[6]-DAH 하이드로젤을 전달체로 항암 치료유전자 IL-12M가 도입된 중간엽 줄기세포의 항암 치료 개념도 (a) 중간엽 줄기세포에 아데노바이러스를 이용한 항암 치료유전자 IL-12M 도입 (b) 유전자 조작된 중간엽 줄기세포를 CB[6]-DAH 하이드로젤에 담지하여 RA-HA 유도체, Dexa-CB[6] 유도체와 함께 종양조직에 주사하여 치료단백질 분비")
![(수식)장기 반복적으로 주사한 CB[6]-DAH 하이드로젤에 담지된 유전자조작 중간엽 줄기세포치료제의 효능평가. C57BL/6 마우스에 B16F10 종양세포를 주사해 종양을 유발시키고 5일 후와 20일 후에 줄기세포 치료제를 2 회 주사. 유전자 조작이 되지않은 줄기세포만 주사한 집단(●)과 치료유전자IL-12M를 도입한 줄기세포를 주 사한 집단(●), 그리고 세포전달체로 Matrixen (●), CB[6]/DAH 하이드로젤(●), Dexa-CB[6] 유도체와 RA-HA유도체가 도입된 CB[6]/DAH 하이드로젤(●)을 사용한 집단을 비교하여 항암치료효과 검증 (1 × 105cell/100μL, n = 8). 치료효과는 (a) 종양부피 (● vs ●, **P < 0.01 and ● vs ●, *P < 0.05) 와 (b) 생존율 (%)로 평가했음 (● vs ●, ***P < 0.001)](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_29_image_1.png "(수식)장기 반복적으로 주사한 CB[6]-DAH 하이드로젤에 담지된 유전자조작 중간엽 줄기세포치료제의 효능평가. C57BL/6 마우스에 B16F10 종양세포를 주사해 종양을 유발시키고 5일 후와 20일 후에 줄기세포 치료제를 2 회 주사. 유전자 조작이 되지않은 줄기세포만 주사한 집단(●)과 치료유전자IL-12M를 도입한 줄기세포를 주 사한 집단(●), 그리고 세포전달체로 Matrixen (●), CB[6]/DAH 하이드로젤(●), Dexa-CB[6] 유도체와 RA-HA유도체가 도입된 CB[6]/DAH 하이드로젤(●)을 사용한 집단을 비교하여 항암치료효과 검증 (1 × 105cell/100μL, n = 8). 치료효과는 (a) 종양부피 (● vs ●, **P < 0.01 and ● vs ●, *P < 0.05) 와 (b) 생존율 (%)로 평가했음 (● vs ●, ***P < 0.001)")
![CB[6]-HA 합성공정 개선](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_53_image_1.png "CB[6]-HA 합성공정 개선")
![개선된 합성공정으로 합성된 CB[6]-HA의 화학구조와 1H NMR 분석](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_53_image_106.png "개선된 합성공정으로 합성된 CB[6]-HA의 화학구조와 1H NMR 분석")
![유도인자 Dexamethason과 접합된 CB[6]-Dexa의 하이드로젤에서 방출시험결과](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_54_image_1.png "유도인자 Dexamethason과 접합된 CB[6]-Dexa의 하이드로젤에서 방출시험결과")
![Fluorescein을 이용해 측정한 CB[6] 및 HA 유도체의 발산 속도 측정 결과](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_54_image_2.png "Fluorescein을 이용해 측정한 CB[6] 및 HA 유도체의 발산 속도 측정 결과")
![monoCB[6]/DAH-HA 하이드로젤 내에 담지된 중간엽 줄기세포(monoCB[6]-HA mixed with hMSCs (2.0 wt%, 5 × 106 cells in 0.2 mL) and DAH-HA (2.0 wt%, 0.2 mL)) 6주령 Balb/c nude mice 등에 S.C. 주사해서 Control(좌), dexamethasone (중), Dexa-CB[6] (우) 4주후 조직 상태를 확인](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_55_image_1.png "monoCB[6]/DAH-HA 하이드로젤 내에 담지된 중간엽 줄기세포(monoCB[6]-HA mixed with hMSCs (2.0 wt%, 5 × 106 cells in 0.2 mL) and DAH-HA (2.0 wt%, 0.2 mL)) 6주령 Balb/c nude mice 등에 S.C. 주사해서 Control(좌), dexamethasone (중), Dexa-CB[6] (우) 4주후 조직 상태를 확인")
![(a) Dexamethasone이나 Dexa-CB[6]의 유무에 따른 monoCB[6]/DAH-HA 하이드로젤 내의 중간엽 줄기세포 분화도의 차이를 면역조직학적으로 분석 (scale bar = 100 μm). (b) COL II, COMP, SOX9, and aggrecan의 네가지 표지자를 이용하여 Western blots 유전자 발현을 분석함](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_56_image_2.png "(a) Dexamethasone이나 Dexa-CB[6]의 유무에 따른 monoCB[6]/DAH-HA 하이드로젤 내의 중간엽 줄기세포 분화도의 차이를 면역조직학적으로 분석 (scale bar = 100 μm). (b) COL II, COMP, SOX9, and aggrecan의 네가지 표지자를 이용하여 Western blots 유전자 발현을 분석함")
![개선된 합성공정의 CB[6]-HA 생산 공정도](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_58_image_2.png "개선된 합성공정의 CB[6]-HA 생산 공정도")
![개선된 합성공정의 CB[6]-HA 합성과정과 원료 물질 자료](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_59_image_1.png "개선된 합성공정의 CB[6]-HA 합성과정과 원료 물질 자료")
![CB[6]-HA의 Endotoxin 시험 결과](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_67_image_2.png "CB[6]-HA의 Endotoxin 시험 결과")
![CB[6]-HA와 DAH-HA의 Endotoxin 확인 결과](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_68_table_2.png "CB[6]-HA와 DAH-HA의 Endotoxin 확인 결과")
![CB[6]-HA와 DAH-HA의 무균시험 결과 무균이 검출되지 않음을 확인](https://nrms.kisti.re.kr/bitextimages/TRKO202100003776/TRKO202100003776_68_image_3.png "CB[6]-HA와 DAH-HA의 무균시험 결과 무균이 검출되지 않음을 확인")
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| 주관연구기관 | 포항공과대학교 Pohang University of Science and Technology |
|---|---|
| 연구책임자 | 한세광 |
| 참여연구자 | 황병우 , 정현선 , 진현탁 , 안지완 |
| 보고서유형 | 3단계보고서 |
| 발행국가 | 대한민국 |
| 언어 | 한국어 |
| 발행년월 | 2015-08 |
| 과제시작연도 | 2014 |
| 주관부처 | 미래창조과학부 Ministry of Science, ICT and Future Planning |
| 등록번호 | TRKO202100003776 |
| 과제고유번호 | 1711019014 |
| 사업명 | 바이오·의료기술개발 |
| DB 구축일자 | 2021-07-03 |
| 키워드 | 히알루론산.자기조립.주사가능형 하이드로젤.중간엽 줄기세포.분화유도인자.세포전달시스템.Hyaluronic acid.Self assembly.Injectable hydrogel.Mesenchymal stem cell.Differetiation control factor.Cell delivery system. |
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