초록 ▼

본 연구는 넙치 불활화 백신의 효능 증진을 위한 보강제 개발을 최종 목표로 어류 대사체의 metabolomics 및 유전적 접근을 통한 어류의 면역반응 표지인자를 개발 및 넙치 불활화 항원의 보강제 개발에 관한 연구이다.
- 본 과제의 연구 결과는 (1) NMR, MS등의 분석장비를 이용하여 어류 대사체의 기본 전처리법과 분석법을 확립하고 spectral profiling의 분석을 실시하였다. 국내 최대 양식어류인 넙치를 대상으로 하여 불활화 백신의 투여 전 후 대사물질을 비교 분석하고 백신에 반응하는 물질 (vaccine-r

본 연구는 넙치 불활화 백신의 효능 증진을 위한 보강제 개발을 최종 목표로 어류 대사체의 metabolomics 및 유전적 접근을 통한 어류의 면역반응 표지인자를 개발 및 넙치 불활화 항원의 보강제 개발에 관한 연구이다.
- 본 과제의 연구 결과는 (1) NMR, MS등의 분석장비를 이용하여 어류 대사체의 기본 전처리법과 분석법을 확립하고 spectral profiling의 분석을 실시하였다. 국내 최대 양식어류인 넙치를 대상으로 하여 불활화 백신의 투여 전 후 대사물질을 비교 분석하고 백신에 반응하는 물질 (vaccine-response substance; VRS)을 분석하여 indicator로 선정하였다. 대사물질의 변화분석을 위해서는 수소 핵자기공명분석 (¹H-NMR)과 주성분분석(principal components analysis: PCA) 및 부분최소제곱 분석 (partial least square: PLS)을 실시하였다. Indicator 성분은 NMR 및 MS분석을 통해 triolein임을 확인하였다. (2) 백신의 in vivo 효능검증 (공격실험, 항체가 측정) 및 면역유전자 발현 분석을 통하여 면역반응과 넙치 대사체 변화와의 상관관계를 규명을 통하여 면역반응의 표지인자를 확인하였다. DNA microarray analysis (45,000 chip) 분석에서는 면역반응 후 Hemoglobin subunit alpha-B, Hemoglobin subunit beta-4, alpha-globin 1, Toll like receptor 5, myosin light chain 2, phospholipase C-beta 1등의 유전자가 높게 나타났다. Gene Ontology (GO) analysis 결과 cellular protein process에 관여하는 유전자 (21개), proteolysis (16개)로 나타났다. (3) 37종의 해조류와 185종의 해조류 유래 방선균으로부터 보강제 후보물질을 분석하였고, 그 결과 해조류 Laminaria japonica로부터 높은 유상화 안정성을 보이는 3개의 물질인 di-Gal-1, 2, 3을 분리하여 구조분석을 하였다. Streptomyces coelescens H1-01가 생산하는 물질을 Silica gel chromatography와 HPLC를 통하여 3 종류의 물질(d-Gal-4,5,6)을 분리하였고 본 물질은 Edwardsiella tarda와 Streptococcus iniae의 불활화 사백신과 반응하여 유화성을 보이며 1개월 이상의 유화능 지속효과를 보여 백신보강제로의 사용이 가능하다.
- 본 과제를 통해 기술적면에서는 metabolomics 기술을 이용한 어류의 대사체 분석으로 질병진단 및 대사체 표지인자 개발 기술을 통한 효율적 진단법을 구축하였고 백신의 기능을 극대화 할 수 있는 보강제를 분리하였다. 본 개발로 국내 어종에 맞는 백신의 실용화 및 항생제 대체효과를 가져올 수 있을 것이다. 혼합백신 및 다각백신에 적용하여 그 활용범위를 넓히며, 침지백신 및 바이러스백신에도 응용이 가능할 것이다.

(출처 : 연구결과 요약문 4p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 목차 ... 3
• Ⅰ. 연구결과 요약문 ... 4
• Ⅱ. 연구내용 및 결과 ... 5
• 1. 연구과제의 개요 ... 5
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 11
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 19
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 102
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 103
• 6. 연구과정에서 수집한 해외 과학기술정보 ... 105
• Ⅲ. 연구성과 ... 107
• 끝페이지 ... 109