초록 ▼

연구의 목적 및 내용
· 베체트병에서 CCR1 단백질 발현 연관성을 확인하고, CCR1과 그 ligand 조절 기능이 있는 선도물질을 찾아 피부 외용제로 개발하고자 함
· 증상 유무에 따라 CCR1+ cell 빈도가 다른지, 세포내 발현과 세포막 발현 빈도를 마우스모델에서 비교
· CCR1 단백질 발현 조절이 증상의 호전과 연계되는지 확인
· CCR1 조절제를 피부 외용제로 사용하여 증상의 호전 효과 확인
· CCR1 ligand 발현 분석
· CCR1 ligand 조절 물질을 피부 궤양이 있는 베체

연구의 목적 및 내용
· 베체트병에서 CCR1 단백질 발현 연관성을 확인하고, CCR1과 그 ligand 조절 기능이 있는 선도물질을 찾아 피부 외용제로 개발하고자 함
· 증상 유무에 따라 CCR1+ cell 빈도가 다른지, 세포내 발현과 세포막 발현 빈도를 마우스모델에서 비교
· CCR1 단백질 발현 조절이 증상의 호전과 연계되는지 확인
· CCR1 조절제를 피부 외용제로 사용하여 증상의 호전 효과 확인
· CCR1 ligand 발현 분석
· CCR1 ligand 조절 물질을 피부 궤양이 있는 베체트병 마우스에 피부 도포 후 효과 확인

연구개발 성과
· 베체트병 마우스의 혈구세포에서 세포표면에 발현하는 CCR1+ 세포의 빈도가 무증상 마우스에 비하여 낮게 발현되었음.
· 베체트병 환자와 마우스모델 혈장에서 CCR1 ligand인 CCL3가 정상인에 비하여 증가되어 있음.
· Colchicine 또는 pentoxifylline을 투여 후 증상이 호전되면서 CCR1+ cell 발현 빈도가 증가함.
· CCL3가 CCR1+ cell 빈도를 감소시키는 antanonist로 작용함.
· CCL3 투여 후 마우스 베체트병 증상이 악화됨.
· Anti-CCL3 Ab로 CCL3를 blocking 하면 마우스 증상이 호전됨.
· NM과 AP에서 추출한 venom이 CCR1+ 세포를 증가시켰으며, 마우스 피부에 도포 후 피부궤양 증상이 호전됨.

연구개발 성과의 활용계획 (기대효과)
· CCR1과 ligand인 CCL3 조절을 통한 새로운 치료후보물질을 발굴하여, 베체트병 염증을 조절하는 기능을 마우스모델에서 확인하였고,
· NM과 AP에서 추출한 venom을 피부 외용제로서 개발 할 수 있는 가능성을 확인함.
· 기업에 라이센싱 아웃하기를 기대함.

(출처 : 요약문 4p)

Abstract ▼

Purpose & Contents
The frequencies of CCR1(+) cells in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and lymph node cells were analyzed and compared between symptomatic Behcet's disease (BD) mice and asymptomatic BD normal (BDN) mice. The expression levels of CCR1 ligands were confirmed in serum of B

Purpose & Contents
The frequencies of CCR1(+) cells in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and lymph node cells were analyzed and compared between symptomatic Behcet's disease (BD) mice and asymptomatic BD normal (BDN) mice. The expression levels of CCR1 ligands were confirmed in serum of BD mice and human BD patients. The frequencies of CCR1 expression were compared between cell surface and intracellular cytoplasm for the confirmation of the defect of synthesis or intracellular transport of CCR1. The change of symptoms after regulation of CCR1 by CCR1 antagonist or CCR1 activator was followed.
The therapeutic functional CCR1 antagonist or CCR1 activator was developed to a drug candidate as a topical agent.

Results
The frequencies of CCR1 were significantly lower in surface of PBMC and lymph node cells of BD mice compared to asymptomatic BDN mice by FACS analysis. The differences of intracellular expression of CCR1 between BD and BDN showed similar to surface expression.
The treatment with colchicine or pentoxifylline, frequently prescribed medicine to the BD patients, up-regulated the frequencies of CCR1 in the surface of PBMC and lymph node cells in healthy normal mice and BD mice accompanied with the improvement of BD symptoms of mice. IL-10 and GM-CSF up-regulated the frequencies of CCR1+ cells in normal and BD mice. The ELISA for the CCL3, CCL7, and CCL8 was applied to the plasma of BD patients.
The average of CCL3 was up-regulated in the patients with BD patients compared to the healthy controls. However, the difference of CCL3 between active and inactive patients was not observed. CCL7 was down-regulated after treatment. CCL8 showed similar levels to the healthy controls and BD patients. CCL3 treatment to BD mice deteriorated BD symptoms and down-regulated CCR1+ cell frequenciws. Anti-CCL3 antibody treatment improved BD symptoms and up-regulated CCR1+ cell in PBMC surface of BD mice. Total amount of CCR1 was not different between BD and BDN by western blotting. Ointment extracted from NM or AP venom was effective for the improvement of BD symptoms and up-regulation of CCR1+ cells in BD mice.

Expected Contribution
The common immune related factors are frequently expressed in chronic inflammatory diseases, such as BD, atopic dermatitis, asthma, and rheumatoid arthritis. Therefore, the results from this study can influent to the other chronic inflammatory diseases as well as Behcet’s disease. Among three main etiopathological factors in Behcet’s disease, two factors including immune response and infection can be applied to this mouse model and showed the disease phenotype. Therefore, we can explain more widely for the etiopathology of BD through this study. Anti-CCL3 antibody treatment improved BD symptoms, so, Anti-CCL3 antibody can be regarded as a candidate therapeutic biologics for inflammatory disease including BD. In addition, patents of topical agent with NM or AP can be licensing out to the company.

(출처 : SUMMARY 5p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 보고서 요약서 ... 3
• 국문 요약문 ... 4
• SUMMARY ... 5
• 목차 ... 6
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 7
• 1-1. 연구개발 목적 ... 7
• 1-2. 연구개발의 필요성 ... 7
• 1-3. 연구개발 범위 ... 10
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 11
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 12
• 3-1. 연구 내용 ... 12
• 3-2. 연구개발 추진전략·방법 ... 15
• 3-3. 연구결과 ... 16
• 3-4. 연구개발성과 ... 34
• 4. 목표달성도 및 관련분야 기여도 ... 39
• 4-1. 목표달성도 ... 39
• 4-2. 관련분야 기여도 ... 40
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 41
• 5-1. 연구개발 결과의 활용방안 ... 41
• 5-2. 기대효과 및 파급효과 ... 41
• 5-2. 추가 연구의 필요성 ... 42
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 43
• 7. 연구개발성과의 보안등급 ... 43
• 8. 국가과학기술종합정보시스템에 등록한 연구시설·장비 현황 ... 44
• 9. 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전조치 이행실적 ... 44
• 10. 연구개발과제의 대표적 연구실적 ... 45
• 11. 기타사항 ... 45
• 12. 참고문헌 ... 45
• 별첨4. 실적 증빙자료 ... 48
• 별첨5. 기타 첨부서류 ... 61
• 끝페이지 ... 68