초록 ▼

□ 연구개요
fasiglifam (TAK-875)의 직접적인 간독성을 정확히 평가하기 위해 in vitro에서 2D 및 3D HepG2 배양 모델과 더불어, 근본적인 메커니즘을 밝히고 non-liver cell, 섬유아세포 (fibroblast)와 비교하여 활성산소종 (reactive oxygen species, ROS)의 생성과 항산화제의 고갈 조사가 필요함.
인간 간세포 2D 및 3D배양 모델을 이용한 fasiglifam의 직접적인 간독성 평가, 인간 간세포와 인체섬유아세포의 fasiglifam 처리 후 ROS 생성과

□ 연구개요
fasiglifam (TAK-875)의 직접적인 간독성을 정확히 평가하기 위해 in vitro에서 2D 및 3D HepG2 배양 모델과 더불어, 근본적인 메커니즘을 밝히고 non-liver cell, 섬유아세포 (fibroblast)와 비교하여 활성산소종 (reactive oxygen species, ROS)의 생성과 항산화제의 고갈 조사가 필요함.
인간 간세포 2D 및 3D배양 모델을 이용한 fasiglifam의 직접적인 간독성 평가, 인간 간세포와 인체섬유아세포의 fasiglifam 처리 후 ROS 생성과 항산화제 고갈 비교, zebrafish를 이용한 생체 내 fasiglifam 간독성의 연구 결과 관련성 조사 등을 통해 인간 간세포 모델과 zebrafish을 이용한 fasiglifam의 간독성 근본적 메커니즘을 제안 함.

□ 연구 목표대비 연구결과
Fasiglifam (TAK-875) G 단백질 결합 수용체 40 (GPR40) 효능제는 저혈당과 체중 증가 없이 고혈당을 현저히 개선하며 기존의 항 당뇨병 환자의 주된 부작용임. 불행히도 임상3상 시험에서 예상치 못한 간독성으로 조기에 종결되었음. 본 연구수행에서 우리는 TAK-875가 간세포에 직접적으로 독성을 부여하는지 여부와 그 기저에 있는 독성 메커니즘을 조사함. TAK-875 50 μM 이상 농도는 인간간암세포주 HepG2의 2D 및 3D 배양에서 농도의존적으로 CV 감소시켰고, ROS 생성과 일치함.
산화방지제인 N-acetylcysteine은 ROS생성을 확인한 TAK-875의 간독성을 약화시킴. 참고로, siRNA를 이용한 GPR40의 knockdown은 TAK-875의 간 독성을 없애고 ROS 생성을 약화시킴. 대조적으로, TAK-875는 500μM까지 섬유아세포에서 세포독성을 유도하지 않았음. 제브라피쉬 유생에서 TAK-875 25μM 농도의 사망률 증가는 TAK-875의 잠재적 간독성을 뒷받침함. TAK-875에 노출된 zebrafish의 조직 병리학 검사에서 세포질 공포변성과 acentric nuclei을 가진 퇴행된 비대성 간세포에서 나타나는 것 같은 심각한 간독성이 나타났으며, 이는 TAK-875가 직접 간독성을 유도 할 수 있으며 ROS 생성이 GPR40 의존적 방식으로 진행될 수 있음을 확인시켜 줌.

□ 연구개발결과의 중요성
최근 fasiglifam (GPR40 agonist)의 임상 개발이 종결된 이후 fasiglifam과 간 독성 사이의 연관성에 관한 연구는 거의 없었음. 인간의 치료 용량과 관련된 노출 수준에서 생체 내 간 독성을 분석하고, 이러한 발견은 간세포에서 fasiglifam의 독성 메커니즘을 밝히는 중요한 단서를 제공 할 것임. 간독성을 일으키는 화학물질에 투여될 때 in vitro, in vivo 수준의 정확한 독성평가는 이 물질의 제한적인 시험계에서의 실험으로는 완성될 수 없음을 지적하고, 본 연구를 토대로 보다 과학적인 위해 성평가를 위해 고려되어야 되는 인자를 규명할 것으로 사료됨.
인체세포를 이용한 독성 시험법을 활용함으로써 동물실험을 통한 독성시험 횟수 및 시험기간을 최소화하여 안전한 약물의 개발을 촉진하고, 독성시험성적의 종간차이로 인한 불확실성을 줄일 수 있음. in vivo에서 우리 연구 결과의 관련성을 조사하기 위해 zebrafish를 사용하여 in vivo fasiglifam에 의한 간독성의 발달을 확인함으로 써 정확도 높은 독성 시험법을 확립하고 이것은 의약품의 안전성 향상 및 인류의 건강한 삶에 크게 기여할 것임.

(출처 : 연구결과 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 3
• 2. 연구수행내용 및 연구결과 ... 4
• 3. 연구개발결과의 중요성 ... 5
• 4. 참고문헌 ... 6
• 5. 연구성과 ... 7
• 끝페이지 ... 9