초록 ▼

□ 연구개요
암 전이 촉진 단백질 KITENIN은 대장암 조직에서 과발현되어 암세포의 이동, 침윤과 전이를 촉진하여 대장암의 진행, 전이 및 예후 등에 매우 중요함. 이러한 KITENIN은 Dishevelled(Dvl)-2/PKCδ와 직접적인 상호작용을 함으로써 ERK/AP-1 axis 활성화를 수반하고, KITENIN/ErbB4 복합체가 unconventional EGFR-independent 신호전달에 관여하여 c-jun을 증가시키는 하위 신호전달 기전은 밝혀졌으나, KITENIN의 발현이나 기능 조절과 관련된 상위 신호전

□ 연구개요
암 전이 촉진 단백질 KITENIN은 대장암 조직에서 과발현되어 암세포의 이동, 침윤과 전이를 촉진하여 대장암의 진행, 전이 및 예후 등에 매우 중요함. 이러한 KITENIN은 Dishevelled(Dvl)-2/PKCδ와 직접적인 상호작용을 함으로써 ERK/AP-1 axis 활성화를 수반하고, KITENIN/ErbB4 복합체가 unconventional EGFR-independent 신호전달에 관여하여 c-jun을 증가시키는 하위 신호전달 기전은 밝혀졌으나, KITENIN의 발현이나 기능 조절과 관련된 상위 신호전달 기전에 대해서는 잘 규명되지 않음. 암 전이 억제를 위해 단일 단백질에 의한 세포기능의 제어 보다는 다른 단백질과의 상호작용을 통한 신호체계 제어가 더 효과적임을 고려할 때, KITENIN과 상호작용하는 단백질의 특성과 작용기전 연구는 매우 중요함. 이에 본 연구에서는 암 전이를 촉진하는 KITENIN과 상호작용하는 단백질의 특성을 세부적으로 규명하고, 이를 기반으로 하여 대장암 유전자 치료에 응용할 수 있는 신규 타겟을 발굴하고 이를 검증하여 KITENIN이 과발현된 대장암의 전이 억제 및 치료제 개발에 기여하고자 함.

□ 연구 목표대비 연구결과
1) 암 전이 촉진단백질 KITENIN과 결합하는 새로운 interaction partner 동정 및 대장암 세포에서의 기능 확인
• 결합 단백인 MYO1D 발굴
• 발굴된 결합 단백인 MYO1D은 KITENIN의 c-terminal 부분과 ErbB4의 c-terminal의 kinase domain과 결합하고 있음들 규명함.
• MYO1D 발현을 차단한 결과 KITENIN 혹은 ErbB4 과발현에 의해 증가된 대장암 세포 침윤 증가가 억제됨을 확인함.
2) KITENIN과 상호작용하는 단백질의 조절 기전 연구
• MYO1D 발현 차단 후, immunocytochemistry를 통해 세포막에 분포되어 있던 KITENIN, ErbB4, EGFR 그리고 c-Met 의 발현이 현저하게 억제됨을 확인함.
• MYO1D 발현 차단 후, KITENIN 혹은 EGFR 단백양 감소와 EGFR에 의해 활성화되는 p-cjun, p-AKT, p-ERK, p-p38 그리고 p-JNK 활성화가 억제됨.
• MYO1D 발현 억제에 의한 KITENIN 혹은 RTK의 단백양 감소는 proteasome degradation 과정을 통해 이루어지고 있음을 규명함.
• MYO1D의 TH 도메인이 KITENIN 혹은 EGFR의 결합에 관여하는 부위임을 규명함.
3) KITENIN과 상호작용하는 단백질의 in vivo 기능 규명 및 유전자 치료법 활용 가능성 연구
• 과발현된 MYO1D는 새로운 oncogene으로서 대장 종양 진행을 촉진함.
• MYO1D는 인간 대장암 진행 초기에 비해 말기 조직에서 상향조절 되고 있음을 확인함.

□ 연구개발결과의 중요성
1. 학문적 측면
• MYO1D 단백질은 정상 대조군과 비교하여 암세포 내에서 현저하게 높게 발현되는 단백질에 해당하므로 MYO1D를 이용하여 조기에 암을 진단하는 방법을 개발할 수 있을 것임.
2. 기술적, 산업적 측면
1) 기술적 측면
• KITENIN의 조절기전을 추가로 세분하여 규명함으로써 KITENIN에 의한 대장암 및 위암, 간암, 유방암의 전이 기전을 밝히는데 기여할 것임. 궁극적으로는 더 다양하고 새로운 암전이 억제 치료를 위한 표적물질을 발굴하게 될 것임.
• 본 연구는 KITENIN 뿐만 아니라 KITENIN과 상호작용하는 다양한 단백질의 기능과 작용기전 지식을 넓혀줄 것이며 암세포 성장과 전이차단의 새로운 치료제 개발에 기반지식을 제공할 것임.
2) 경제/산업적 측면
• 암전이에 관련된 새로운 표적을 제시하여 신규 전이억제 치료제를 개발하는데 중요한 기반기술을 제공할 수 있을 것임.
• 현재 상용되는 RTK 기능을 억제하는 항체기반형 항암제들의 한계를 극복하는데 유용하고, KITENIN 기능조절물질과 현재 사용중인 항암 치료제와의 병행투여는 의미 있는 치료법 발굴을 가져올 것으로 기대됨.

(출처 : 연구결과 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 3
• 1) 연구의 필요성 ... 3
• 2) 연구 가설 ... 3
• 3) 최종 목표 ... 3
• 4) 연구 범위 ... 3
• 2. 연구수행내용 및 연구결과 ... 4
• 1) 막단백질 KITENIN과 결합하는 새로운 interaction partner 동정과 발굴된 특정단백의 KITENIN/ErbB4 복합체와의 결합 부위 규명 ... 4
• 2) KITENIN 결합단백의 암세포에서의 기능 확인 ... 4
• 3) KITENIN 혹은 RTK의 세포내 위치와 발현도 확인 ... 5
• 4) KITENIN 결합단백이 KITENIN 혹은 RTK에 의해 활성화되는 downstream signaling pathway에 미치는 효과 확인 ... 5
• 5) KITENIN 결합단백의 deletion mutants 제작과 KITENIN/RTK 결합 부위 규명 ... 6
• 6) Invasion assay을 통해 각 도메인의 대장암 세포 전이 평가 ... 6
• 7) KITENIN과 상호작용하는 단백질의 in vivo 기능 및 유전자 치료법 활용 가능성 연구 ... 6
• 3. 연구개발결과의 중요성 ... 7
• 1) 학문적 측면 ... 7
• 2) 기술적, 산업적 측면 ... 7
• 4. 참고문헌 ... 7
• 5. 연구성과 ... 8
• 끝페이지 ... 8