초록 ▼

□ 연구개요
본 연구는 췌장암을 비롯한 고형암의 치료를 위해 새롭게 개발된 TNA (TNA : Transcription factor Network Analysis or NLCA : Network Living Cell Array)를 이용하여 서울대 약대 생리활성자원은행에서 분양받은 단일 화합물의 췌장암 세포에 대한 항암효과와 그 작용점 분석을 목표로 하며, 이를 in vitro 뿐만 아니라 in vivo 범위에서까지 확인하고자 함.

□ 연구 목표대비 연구결과
1) 천연 물질 유래 단일 화합물 선정
◦ 항산

□ 연구개요
본 연구는 췌장암을 비롯한 고형암의 치료를 위해 새롭게 개발된 TNA (TNA : Transcription factor Network Analysis or NLCA : Network Living Cell Array)를 이용하여 서울대 약대 생리활성자원은행에서 분양받은 단일 화합물의 췌장암 세포에 대한 항암효과와 그 작용점 분석을 목표로 하며, 이를 in vitro 뿐만 아니라 in vivo 범위에서까지 확인하고자 함.

□ 연구 목표대비 연구결과
1) 천연 물질 유래 단일 화합물 선정
◦ 항산화 효능 스크리닝을 통한 물질 선정
- 대표적 항산화 물질인 Ascorbic acid와 N-acetyl-L-cysteine을 positive control로 설정하여 DPPH assay를 통해 이와 유사한 항산화 효능을 갖는 물질을 선정함
- DPPH assay를 통해 항산화 효능이 가장 뛰어난 물질 12종을 선정하였으며 그 중 항산화 효능이 가장 높은 SPP894(Gossypol)와 SPP938(Ellagic acid)를 유효 물질로 선정함
◦ 선정된 물질의 췌장암 세포 생장 억제 평가
- 광학현미경을 이용한 Gossypol과 Ellagic acid 처리시 췌장암세포 형태 변화 관찰
- 서로 다른 전이 성질을 가지고 있는 췌장암 세포인 MIA PaCa2와 BxPC3 세포를 이용하여 Gossypol, Ellagic acid에 대한 세포 독성도 확인
2) 항암 네트워크 분석을 위한 전사인자 부착 서열 바이러스 확보
◦ 전사인자 부착 서열을 가진 바이러스 라이브러리 제작
- 전사인자 부착 서열을 포함하며 GFP와 Luciferase가 붙어있어 전사인자 부착 시 형광 또는 발광을 통해 전사인자의 활성을 실시간으로 추적 가능한 바이러스 라이브러리를 제작
◦ 전사인자 부착 서열을 가진 바이러스 활성 및 반응성 확인
- HEK293T 세포에 전사인자 부착 서열을 포함한 바이러스를 처리한 뒤 48시간 후 각 전사인자 특이적으로 활성을 유도하는 약물을 처리한 뒤 48시간 이후 형광을 관찰함. 발현된 형광을 통해 제작한 바이러스의 활성 및 전사인자 활성화에 따른 반응성을 확인함.
3) 항암 네트워크 분석을 위한 췌장암 세포주(MIA PaCa-2, BxPC-3)의 전사인자 작용점 분석
- 췌장암 세포주 MIA PaCa-2와 BxPC-3에 전사인자 부착 서열을 포함한 바이러스를 처리한 뒤 48시간 이후 형광을 관찰함. 시간별로 발현된 형광을 통해 세포주별 전사인자 활성화에 따른 작용점을 확인함

□ 연구개발결과의 중요성
- 기존의 Omics 분석 방법과 달리 본 연구에서는 TNA(Transcription Factor Network Analysis) 방법을 이용하여 살아있는 세포 상태에서 1~10일 이상의 장기간동안 효율적으로 약물의 작용점을 분석하고 이를 바탕으로 key mediator 전사인자를 machine running을 이용하여 예측하여 찾아낸다.6) 이는 현재까지 밝혀진 signaling database를 바탕으로 급속도로 발전하고 있는 4차 산업과 깊은 연계성이 있는 것으로 앞으로의 신약 개발 시스템에 좋은 사례를 제시한다.
- 또한 본 연구는 항암제 작용 메커니즘에 대한 Database를 제공하며 세포를 비롯하여 동물 단위에서 발견된 약물의 작용점을 분석하고 그에 따른 downstream인 단백질 발현 분석을 완료함으로써 관련 Database를 구축할 수 있으며 이러한 Database는 추후 타 연구에도 많은 활용도를 나타낼 것이라 생각된다.

(출처 : 연구결과 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 4
• 2. 연구수행내용 및 연구결과 ... 4
• -1차년 ... 4
• -2차년 ... 7
• 3. 연구개발결과의 중요성 ... 8
• 4. 참고문헌 ... 9
• 5. 연구성과 ... 9
• 대표적 연구실적 ... 9
• 끝페이지 ... 11