초록 ▼

□연구개요
본 연구에서는 1차년도 수행기간동안 인접단백질 표지법을 이용하여 막단백질인 Prominin-1에 결합하거나 인접하고 있는 단백질 중, 세포막뗏목 단백질(plasmamembrane raft proteins)들을 특이적으로 분리하고 동정하여, 단백질체 분적을 통하여 prominin-1이 관여하고 있는 세포 내 기능을 유추, 규명하고자 함.

□연구 목표대비 연구결과
(1) 총 연구수행 기간 중 (2020. 06. 01 ~ 2020. 10. 31)
○ Prominin-1-APEX2, Prominin1

□연구개요
본 연구에서는 1차년도 수행기간동안 인접단백질 표지법을 이용하여 막단백질인 Prominin-1에 결합하거나 인접하고 있는 단백질 중, 세포막뗏목 단백질(plasmamembrane raft proteins)들을 특이적으로 분리하고 동정하여, 단백질체 분적을 통하여 prominin-1이 관여하고 있는 세포 내 기능을 유추, 규명하고자 함.

□연구 목표대비 연구결과
(1) 총 연구수행 기간 중 (2020. 06. 01 ~ 2020. 10. 31)
○ Prominin-1-APEX2, Prominin1-BioID2 과발현 재조합 아데노바이러스, 렌티바이러스 제작 및 과발현세포주 확립
○ 과발현세포주에서 세포막지질뗏목 분획 추출 및 바이오틴화 단백질 동정
○ 단백질체학 분석을 통해 Prominin-1 생리적 기능 분석
위 1차년도 세부목표를 대부분 달성하였고, prominin-1-APEX2 및 Prominin1-BioID2를 과발현할 수 있는 아데노바이러스 제작을 위한 유전자조합을 진행하였음.

□연구개발결과의 중요성
○ 본 연구방법은 일반적인 친화도 기반 결합단백질 분석법, 인접단백질 표지 및 분석법과 비교했을 때 Prominin-1에 특이적인 세포막 지질뗏목 추출 과정을 거치기 때문에 인접단백질 분석 품질을 개선시킬 것임.
○ Prominin-1(CD133)과 관련된 연구는 활발하게 이루어지고 있으나 세포 내 결합물질은 약 5 종이 밝혀져 있으므로 본 연구결과에 의해 규명되는 인접단백질군은 Prominin-1에 대한 지식베이스를 확장할 수 있음. 또한 Prominin-1 단백질 자체 기능에 대한 연구 확장 가능.
○ 재조합 렌티바이러스, 아데노바이러스를 이용하여 유전자도입이 이루어지기 때문에, 다양한 배양세포주, 조직에서 유래된 1차세포에서의 Prominin-1의 인접단백질에 대한 규명 가능.

(출처 : 요 약 문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 3
• 1-1 최종목표 ... 3
• 1-2 연구 필요성 ... 3
• 1-3 연구범위 ... 4
• 2. 연구수행내용 및 연구결과 ... 4
• 2-1 1차년도(2020.06 –2020. 10) :막단백질인Prominin-1과 결합하는 세포막 지질뗏목단백질 규명 및 하위 신호전달체계 규명 ... 4
• 2-2 Prominin-1-APEX2 과발현 재조합 렌티바이러스 제작 및 과발현세포주 확립 ... 4
• 2-3 세포막지질뗏목 내 Prominin-1-APEX2HA 인접단백질 분리 ... 4
• 2-4 단백질체 분석 ... 5
• 3. 연구개발결과의 중요성 ... 5
• 4. 참고문헌 ... 6
• 5. 연구성과 ... 7
• 끝페이지 ... 7