초록 ▼

□ 연구개요
전립선암 치료에 있어 궁극적으로 내성이 생기는 약제인 남성호르몬 차단 약제(Enzalutamide)를 보완할 수 있는 새로운 기전의 안드로젠 수용체 활성 억제 전립선암 항암제의 개발과 동물실험을 완료함
특히 다수의 히스톤 변환효소의 안드로젠 수용체 활성 조절 효과를 분자 수준에서 확인하여 논문으로 발표함

□ 연구 목표대비 연구결과
○ 1차년도
■ 전립선암 환자 시료를 이용한 MLL5 유전자 발현과 환자 예후와의 관계 분석
■ 동결 보관된 환자 시료를 이용하여 western blot

□ 연구개요
전립선암 치료에 있어 궁극적으로 내성이 생기는 약제인 남성호르몬 차단 약제(Enzalutamide)를 보완할 수 있는 새로운 기전의 안드로젠 수용체 활성 억제 전립선암 항암제의 개발과 동물실험을 완료함
특히 다수의 히스톤 변환효소의 안드로젠 수용체 활성 조절 효과를 분자 수준에서 확인하여 논문으로 발표함

□ 연구 목표대비 연구결과
○ 1차년도
■ 전립선암 환자 시료를 이용한 MLL5 유전자 발현과 환자 예후와의 관계 분석
■ 동결 보관된 환자 시료를 이용하여 western blotting 과 RT-PCR 방법으로 MLL5 단백질과 mRNA의 발현량을 분석함
■ 전립선암 환자 시료를 Tissue-micro array(TMA)로 제작하여 항체 염색을 수행, 상대적인 발현 차이를 분석함
■ 위의 분석 결과와 전립선암 재발율, 생존 기간 등 환자 예후와 비교
■ MLL5 유전자 발현 억제 lenti-virus를 이용하여, LNCaP, C4-2, 22Rv1 등 여러 전립선암 세포주에 stable cell line을 구축함
■ 각 세포주의 성장 속도의 차이를 MTT assay, cell counting 방법으로 분석
○ 2차년도
■ 1차년도에 만든 각 MLL5 유전자 발현 억제 세포주의 세포 사멸 정도의 차이를 Annexin V 염색,apoptosis signaling 효소의 western blotting 방법으로 비교
■ 각 세포주에서 RT-PCR, western blotting 방법을 이용하여, Testosteron 호르몬의 유무에 따른 안드로젠 수용체 활성을 PSA, TMPRSS2, IGF1R등 안드로젠 수용체 하위 유전자의 발현 차이로 분석함
■ 각 세포주의 전이 능력의 차이를 Migration assay, Infiltration assay등으로 비교 관찰함
■ 3차년도 orthotopic xenograft 전이 실험을 위한 luciferase vector 삽입 세포주 제작
■ 3차 년도 orthotopic xenograft 실험을 위한 종양 형성 실험 조건 완성
○ 3차년도
■ 면역결핍 쥐를 이용하여 전립선암 세포주를 이용한 orthotopic xenograft tumor 수립
■ MLL5 유전자 억제 세포주를 쥐의 전립선에 주입하여 대조군과 암 성장 속도를 비교
■ MLL5 유전자 억제 종양 형성 후 luciferase 발현 측정을 이용한 타 기관으로의 전이 정도의 차이를 관찰
■ 기존에 알려진 MLL5 저해제를 이용하여 면역억제 쥐에서 orthotopic xenograft 전립선암 성장 속도와 전이 정도의 차이 관찰
■ 만들어진 종양 조직을 western blotting, RT-PCR, Immunohistochemistry 방법으로 생화학적 분석하여 세포 성장 속도, apoptosis 세포 숫자, 전이 관련 유전자 발현 차이를 분석

□ 연구발성과의 활용 계획 및 기대효과(연구개발결과의 중요성)
○ 기술적 기대효과
■ 아직까지 알려져 있지 않은 새로운 안드로젠 수용체 조절물질을 세계 최초로 연구함
■ 기존에 알려진 안드로젠 수용체 타겟 항암제들과 다른 기전의 후성 유전적 조절 항암제를 개발
■ 기존 항암제의 내성을 극복할 수 있는 병용 항암제로의 개발 가능성
■ 이종이식 모델을 이용하여, MLL5 효소의 발현 차이에 따른 각 항암제에 대한 반응성, 예후 등, 개별 환자에 적용 가능한 임상적 의미를 도출하여 환자별 맞춤 의료에 적용 가능성
○ 경제, 사회적 기대효과
■ 지속적으로 증가하고 있는 전립선암 환자의 수와 치료비를 고려했을 때 독자적인 치료약 개발이매우 중요함
■ 해외 의존적 의료비 지출을 줄이고 국내 제약회사와의 연계로 항암제 개발을 할 경우 외화 절감과 국내 제약 시장의 활성화 가능
■ 임상의와 연계하여 기초 연구를 수행함으로서 보다 많은 전립선 암 전문 기초 연구 인력을 확보하였음

(출처 : 연구결과 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 4
• 1-1. 연구 목표 ... 4
• 1-2.연구의 필요성 ... 4
• 1-3. 연구 가설 및 도출 근거 ... 5
• 1-4. 연구 추진 전략 및 최종 목표 ... 6
• 2. 연구개발과제의 수행 과정 및 수행 내용 ... 6
• 2-1. MLL5 히스톤 탈메틸효소의 안드로젠 수용체 활성 조절에 관한 연구 과저오가 수행 내용 ... 6
• 2-2. 방광암에서 KDM7a 히스톤 탈메틸화 효소의 안드로젠 수용체 활성 조절에 관한 연구 ... 11
• 2-3. 신장암에서 LSD1 히스톤 메틸화효소의 안들젠 수용체 활성 조절과 종양 성장 속도에 미치는 기전연구 ... 14
• 3. 연구개발과제의 수행 결과 및 목표 달성 수준 ... 16
• 4. 연구개발성과의 관련 분야에 대한 기여 정도(연구개발결과의 중요성) ... 17
• 4-1. 연구결과의 의미 및 중요성 ... 17
• 5. 연구개발성과의 관리 및 활용 계획 ... 17
• 5-1. 예상되는 연구개발 성과의 활용분야 ... 17
• 5-2. 활용방안 ... 18
• 5-3. 추가연구의 필요성 ... 18
• 6. 참고문헌 ... 18
• 붙임1. 세부 정량적 연구개발성과 ... 19
• 붙임2. 연구책임자 대표적 연구실적 및 증빙(요약문 및 사본) ... 20
• 끝페이지 ... 29