초록 ▼

□ 연구개요
죽상경화증의 발생은 혈관평활근세포의 이상증식 및 이동이 주원인으로 알려진바, 본 연구에서는 혈관평활근세포의 증식과 이동을 조절하는 표적인자인 CIAPIN1 (cytokine-induced apoptosis inhibitor 1)에 의한 ① p53-MDM2 신호 네트워크를 규명하고 ② CIAPIN1을 조절하는 microRNA를 발굴하여 ③ CIAPIN1의 죽상 경화증 치료표적으로서의 타당성을 검증하고자함

□ 연구 목표대비 연구결과
가. 1차년도
1) CIAPIN1과 p53의 상하 신호체계 위상

□ 연구개요
죽상경화증의 발생은 혈관평활근세포의 이상증식 및 이동이 주원인으로 알려진바, 본 연구에서는 혈관평활근세포의 증식과 이동을 조절하는 표적인자인 CIAPIN1 (cytokine-induced apoptosis inhibitor 1)에 의한 ① p53-MDM2 신호 네트워크를 규명하고 ② CIAPIN1을 조절하는 microRNA를 발굴하여 ③ CIAPIN1의 죽상 경화증 치료표적으로서의 타당성을 검증하고자함

□ 연구 목표대비 연구결과
가. 1차년도
1) CIAPIN1과 p53의 상하 신호체계 위상 관찰
● CIAPIN1의 knock-down으로 인한 증식 및 이동 억제, 자연사 증가 효과 및 p53 siRNA와 pifithrin-α를 사용하여 p53과 CIAPIN1의 신호체계 확인
2) CIAPIN1과 p53의 physical interaction 및 p53 protein stability 관찰
● CIAPIN1과 p53의 physical interaction과 CIAPIN1 조절에 의한 반감기 변화 확인
3) CIAPIN1 발현에 의한 p53과 MDM2의 발현 및 활성 변화 관찰
● CIAPIN1의 과발현 및 knock-down에 의한 p53과 MDM2의 발현 및 활성 변화 확인
4) CIAPIN1 발현에 의한 p53의 transcriptional activity 변화 관찰
● CIAPIN1의 과발현 및 knock-down시 PDGF-BB 처리에 따른 p53의 transcriptional activity 확인
5) CIAPIN1의 p53 promoter activity 조절 관찰
● CIAPIN1이 p53의 promoter repressor로 작용함을 확인
나. 2차년도
1) CIAPIN1의 p53 binding region 규명
● Chip assay를 통해 CIAPIN1이 p53의 promoter region 확인
2) CIAPIN1의 핵내로의 이동(translocation) 관찰
● Neointima formation 유도 혈관에서 CIAPIN1의 핵내 localization 유도 확인
● PDGF-BB의 처리시간에 따라 CIAPIN1의 발현 증가 및 핵내의 localization 증가 확인
3) miRNA에 의한 CIAPIN1 및 p53의 변화 관찰
● miRNA mimic 처리에 의한 CIAPIN1과 p53의 변화 확인
4) CIAPIN1 및 p53의 변화에 의한 miRNA 관찰
● miRNA의 발현량 확인 및 해당 miRNA가 CIAPIN1의 상위 조절자임을 확인
5) miRNA에 의한 혈관평활근의 증식 및 이동 변화 관찰
● miRNA 처리에 의해 PDGF-BB에 의한 혈관평활근세포의 증식능과 이동능 억제 확인
다. 3차년도
1) CIAPIN1 조절에 의한 apoptosis 영향 관찰
● CIAPIN1의 knock-down시 유의적인 apoptosis가 발생하지 않음을 확인
● shRNA에 의한 CIAPIN1의 조절로 인한 혈관평활근세포의 apoptosis는 발생하지 않음을 확인
2) CIAPIN1의 핵내로의 이동(translocation)에 따른 활성 산소(reactive oxygen species) 역할 규명
● CIAPIN1의 과발현 세포를 이용하여 ROS의 발생과 이에 의한 CIAPIN1의 핵내로의 이동 확인
3) CIAPIN1의 핵내로의 이동(translocation)에 의한 p53 promoter activity 조절 관찰
● ROS에 의한 핵내 이동에 의해 p53의 promoter activity와 p53 mRNA level을 조절 확인
4) 동맥경화 유발한 balloon injury rat의 혈관에서 CIAPIN1, p53, MDM2 및 miRNA의 발현 수준 관찰
● Injured 군에서 control대비 CIAPIN1 증가, p53, MDM2 감소, 두 가지 miRNA의 감소를 확인
5) 동맥경화 유발한 balloon injury rat의 혈관에서 miRNA 처치 및 동맥경화 유발 후 신생혈관내막증식억제 관찰
● miR-15b 처리에 의해 injured 혈관의 신생혈관내막증식이 감소하는 것을 확인
6) 획득한 혈관에서 CIAPIN1, p53, MDM2 및 miRNA의 발현 수준 관찰
● miR-15b 처리에 의해 CIAPIN1 발현 감소, p53, MDM2 증가를 확인

□ 연구발성과의 활용 계획 및 기대효과(연구개발결과의 중요성)
가. 학문적/기술적 측면
● CIAPIN1은 동맥경화증 발병에서 혈관평활근의 이상증식 및 이동을 조절할 수 있다는 가능성을 확인
● 이에 대한 심층적 연구를 통해 새로운 치료 표적으로써 학문적 진보에 기여하고 세포의 이상증식, 이동 및 자연사와 관련된 다양한 질환에 CIAPIN1이 관계가 있을 것으로 예상되어 CIAPIN1관련 작용기전을 규명한다면 타 질병(암, 알코올성 간손상, Type1 당뇨병) 발생 기전에 새로운 학문적 지식 제공 가능
● CIAPIN1의 치료 표적 연구를 통한 논문 및 지적재산권의 확보로 leading group으로 성장 가능
나. 경제적 측면
● CIAPIN1-표적 질환치료 연구결과에 따른 부가가치의 창출에 의한 제약산업 발전에 기여하고 약리기전 검증기술 등 신약개발 핵심 기술의 확보를 통한 신약개발연구 수행 가능
다. 사회적 측면
● 기초연구분야 진출 증가를 견인하여 4차 산업혁명에 대응하는 고급인력 양성/배출 및 국내 신약개발 연구 기반 강화 기여

(출처 : 연구결과 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 4
• 가. CIAPIN1에 관하여 ... 4
• 나. p53 tumor suppressor protein과 Mouse double minute 2 homolog (MDM2) ... 5
• 다. MicroRNA (miRNA) ... 5
• 2. 연구개발과제의 수행 과정 및 수행 내용 ... 6
• 가. 1차년도 ... 6
• 나. 2차년도 ... 7
• 다. 3차년도 ... 7
• 3. 연구개발과제의 수행 결과 및 목표 달성 수준 ... 8
• 1) 정성적 연구개발성과(연구개발결과) ... 8
• 2) 세부 정량적 연구개발성과 ... 15
• 3) 목표 달성 수준 ... 16
• 4. 연구개발성과의 관련 분야에 대한 기여 정도(연구개발결과의 중요성) ... 17
• 가. 학문적/기술적 측면 ... 17
• 나. 경제적 측면 ... 17
• 다. 사회적 측면 ... 17
• 5. 연구개발성과의 관리 및 활용 계획 ... 18
• 가. 활용 계획 ... 18
• 6. 참고문헌 ... 19
• [붙임1] 세부 정량적 연구개발성과 ... 20
• [붙임2] 연구책임자 대표적 연구실적 및 증빙(요약문 및 사본) ... 23
• 끝페이지 ... 35