초록 ▼

□ 연구의 목적 및 내용
본 연구개발을 통하여, 위암의 아형 중 조직학적으로 특이적이고 임상적으로 다른 아형에 비하여 나쁜 예후를 보이는 반지형 위암에서 암세포와 암관련섬유모세포와의 상호작용과 관련하여 암 진행을 억제시킬 수 있는 새로운 바이오마커를 발굴하고 추후 관련 치료제의 적용을 위한 타겟을 제시하고자 함

□ 연구개발성과
○ 위암 세포주에서 5-fluorouracil (5-FU) 투여에 대한 반응이 암관련섬유모세포 (cancer-associated fibroblast:CAF)로 위암 세포주를 자극 시에

□ 연구의 목적 및 내용
본 연구개발을 통하여, 위암의 아형 중 조직학적으로 특이적이고 임상적으로 다른 아형에 비하여 나쁜 예후를 보이는 반지형 위암에서 암세포와 암관련섬유모세포와의 상호작용과 관련하여 암 진행을 억제시킬 수 있는 새로운 바이오마커를 발굴하고 추후 관련 치료제의 적용을 위한 타겟을 제시하고자 함

□ 연구개발성과
○ 위암 세포주에서 5-fluorouracil (5-FU) 투여에 대한 반응이 암관련섬유모세포 (cancer-associated fibroblast:CAF)로 위암 세포주를 자극 시에 의미 있게 감소함을 확인함
○ 반지형 위암 세포주인 SNU-601 및 SNU-668의 이동능력 증가에 정상위조직관련섬 유모세포(normal gastric tissue-associated fibroblast:NAF)에 비하여 CAF의 영향이 더 큰 것을 확인함
○ 반지형 위암 세포주인 SNU-601 및 SNU-668의 종양형성 능력을 NAF에 비하여 CAF가 더 향상시킴을 확인함
○ 반지형 위암환자 조직에서 추출한 NAF 및 CAF 3개의 pairs를 이용하여 전사체 분석을 시행하고 functional annotation을 통해 CAF에서 분비적인 특이 유전자들을 제시하고 반지형 위암환자 조직에서 추출한 NAF 및 CAF를 배양한 배지에서 CAF 특이 단백질을 확인하기 위한 단백체 분석을 시행하여 TINAGL1을 CAF 특이 단백질로 제시함
○ Recombinant human TINAGL1 (rhTINAGL1)을 반지형 위암 세포주에 투여하여 반지형위암세포주들의 종양형성 능력과 이동능력을 증가시킴을 확인함
○ 1차년도에 발굴된 후보 유전자 TINAGL1의 CAF에서의 발현이 반지형 위암 세포주에 미치는 영향이 억제됨을 확인함
○ 공공에 open 된 위암 조직을 이용한 전사체 분석 결과를 이용해서 위암조직에서 TINAGL1의 발현과 예후와의 상관관계를 확인함
○ 17명의 반지형 위암환자의 정상 위조직과 암조직을 아주대학교 병원 인체자원은행으로부터 분양받아 단백질을 추출한 후 TINGAL1의 조직발현을 확인하고 조직내 섬유성 기질의 침착을 확인함
○ 반지형위암 세포주 SNU668을 NAF 및 CAF를 이용한 xenograft 종양 제작하고 NAF에 비하여 CAF의 영향이 더 큼을 확인함
○ CAF 및 NAF에서 유전자 조작을 원활하게 하고 이를 동물실험에 활용하기 위하여 immortalized 세포 제작을 시도함

□ 연구개발성과의 활용계획 (기대효과)
○ 새로운 개념의 반지형 위암 특이 표적 치료제 확보에 활용
○ 위암조직에서 기질 세포의 역할 확인을 위한 세포 배양법의 활용
○ 바이오마커 발굴을 위한 다중 오믹스 기법의 확립
○ 위암에서의 섬유모세포의 역할에 대한 추가 연구에 활용
○ 종양미세환경에 대한 연구 기반을 마련하여 추후 고형암 연구에 활용

(출처 : 요약문 12p)

Abstract ▼

□ Purpose&Contents
Gastric sigent ring cell carcinoma (SRC) showed worse prognosis compared to othe subtype of gastric cancer. This subtype include profuse cancer-associated fibroblasts (CAF), and the accumulation of them would be correlate with disease progression. The aim of this study is to cl

□ Purpose&Contents
Gastric sigent ring cell carcinoma (SRC) showed worse prognosis compared to othe subtype of gastric cancer. This subtype include profuse cancer-associated fibroblasts (CAF), and the accumulation of them would be correlate with disease progression. The aim of this study is to clarify the mechanism of interplay between CAF and SRC cell, and to suggest CAF-specitic target to improve the outcome of SRC patients.

□ Results
○ We confirmed that CAF can reduce the effectiveness of 5-FU chemotherapy on gastric cancer cell lines.
○ CAF can induced tumorigenesis more than normal gastric tissue-associated fibroblast (NAF) for SRC celline in 3D culture system.
○ We investigated the difference of mRNA expression between NAF and CAF using cell lysate, and performed the mass-spectrometry to compare the secretory proteins between NAF and CAF. As a result, we suggested the TINAGL1 as CAF-specific secreted protein.
○ We treated SRC celllines with Recombinant human TINAGL1 (rhTINAGL1), and TINAG1 increased tumorigenesis and migration ability of SRC cellines.
○ We made TINAGL1 knock down (KD) CAF cell line using siRNA, and we confirmed that the effectiveness of CAF were resolved after TINAGL1 KD.
○ We analyzed the meaning of TINALG1 expression in gastric cancer public transcriptome data, and conformed negative effect of high TINAGL1 expression on prognosis of gastric cancer patients.
○ We also confirmed that the expression of TINAGL1 was increased in gastric cancer tissues compared to normal gastric tissues. And the expression of TINAGL1 and accumulation of fibrotic stroma in gastric cancer tisseus showed the positive corrleation.
○ We made peritoneal seeding xenograft mouse model using SRC cellline with fibroblast. and confirme the effectiveness of CAF was more than NAF.
○ We made immortalized human CAF cell line for further animal experiment.

□ Expected Contribution
○ We could proposed new conceptional biomarker for gastric SRC, and it could be useful for clinical setting.
○ We developed the experimental model to examinate the function of tumor stroma in gastric cancer
○ We established multi-omics analysis to develop new biomarker for gastric cancer
○ The CAFs, which were generated from this study, could be used for further study.

(source : SUMMARY 13p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 보고서요약 ... 2
• 제 출 문 ... 10
• 보고서 요약서 ... 11
• 국문 요약문 ... 12
• SUMMARY ... 13
• 목차 ... 14
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 16
• 1-1. 연구개발 목적 ... 16
• 1-2. 연구개발의 필요성 ... 16
• 1-3. 연구개발 범위 ... 17
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 18
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 23
• 4. 목표달성도 및 관련분야 기여도 ... 38
• 4-1. 목표달성도 ... 38
• 4-2. 관련분야 기여도 ... 39
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 40
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 42
• 7. 연구개발성과의 보안등급 ... 42
• 8. 국가과학기술종합정보시스템에 등록한 연구시설·장비 현황 ... 42
• 9. 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전조치 이행실적 ... 42
• 10. 연구개발과제의 대표적 연구실적 ... 43
• 11. 기타사항 ... 44
• 12. 참고문헌 ... 45
• 끝페이지 ... 47