초록 ▼

연구의 목적 및 내용
이 연구의 최종 목표는 아토피피부염과 건선에서 1) 병변내의 염증세포에서의 AhR과 AhRR(AhR repressor)의 발현 및 methylation의 변화와 2) 이로 인한 염증 세포의 분화 상태의 차이를 확인하고 3) AhR 유전자의 발현을 조절하는 물질을 탐색하여 치료 물질로서의 가능성을 확인하고자 함. 최종 목표를 달성하기 위한 연구의 세부목표는 다음과 같음.

연구개발성과
1. 후생유전학적 변화를 알아보고자, 아토피피부염, 건선환자와 정상 대조군의 각 6명의 피부조직에서 의 DN

연구의 목적 및 내용
이 연구의 최종 목표는 아토피피부염과 건선에서 1) 병변내의 염증세포에서의 AhR과 AhRR(AhR repressor)의 발현 및 methylation의 변화와 2) 이로 인한 염증 세포의 분화 상태의 차이를 확인하고 3) AhR 유전자의 발현을 조절하는 물질을 탐색하여 치료 물질로서의 가능성을 확인하고자 함. 최종 목표를 달성하기 위한 연구의 세부목표는 다음과 같음.

연구개발성과
1. 후생유전학적 변화를 알아보고자, 아토피피부염, 건선환자와 정상 대조군의 각 6명의 피부조직에서 의 DNA methylation의 변화를 확인한다. 흡연에 의한 영향을 확인하고자 환자의 흡연력을 조사한다. (MeDIP-Seq 기법 이용)
2. 아토피피부염, 건선 환자와 정상 대조군의 말초혈액에서 DNA methylation의 genome-wide 변화를 통해 확인한 hypermethylated 및 hypomethylated gene의 발현을 분석함
3. 아토피피부염, 건선환자에서 확인된 hypermethylated 및 down regulated gene에 대하여 genome-wide methylation analysis을 이용하여, methylated DNA를 입증한다. (Bisulfite Kit 활용)
4. 아토피피부염, 건선환자 및 정상대조군의 PBMC세포에서 AhR 및 target gene인 CYP1A1, AhRR의 발현을 확인하고 중증도와의 상관관계를 분석한다. (qPCR)
5. 아토피피부염, 건선환자에서 확인된 hypomethylated gene에 대하여 AhR-ligand axis를 통한 영향이 있는지를 확인하기 위해 TCDD 처리 후에 각 gene이 표현하는 protein 의 변화를 확인한 다. (ELISA)
6. AhR 및 AhRR이 각질세포(HaCaT 세포)에 미치는 영향을 확인한다. AhR ligand 처리 후 AhRR의 차이를 분석한다. (siAhR and siAhRR transfection, qPCR, ELISA)
7. Wild type, 건선을 유도한 mice에서 획득한 AhR inhibitor 를 처리하여 변화 를 확인한다.
8. AhR transgenic 동물모델에서 AhR의 발현 상태를 실험 확인

연구개발성과의 활용계획 (기대효과)
1. 아토피피부염과 건선 병변의 피부조직과, PBMC세포에서 발현하는 AhR 및 AHRR 유전자의 발현량 및 methylation의 변화를 확인하고 질환의 중증도와의 상관관계를 규명하여 바이오마커로 서의 활용 가능성 확인
2. AhR과 AHRR methylation 변화가 아토피피부염과 건선 병변의 CD 4+ T 세포 및 선천면역세포의 기능 및 분화 상태에 미치는 영향을 주는지 규명
3. 적절한 조건에서 AhR ligand 를 처리하여 아토피피부염과 건선 피부 병변에 존재하는 Th17또는 Th22세 포의 Tr1으로의 변환 유도하여 치료제 개발 가능성 확인
4. 이 연구는 아토피피부염과 건선 병변에서의 염증세포의 후생유전학적 변화를 확인한 드문 연구로 이 연구 의 방법론이나 연구 결과가 관련 연구에 활용될 수 있을 것이라 생각됨.
5. 연구는 환경 호르몬 및 그 수용체인 AhR이 아토피피부염 및 건선에서의 염증에 관여하는 기전을 밝히 는 연구로, 국가적으로 추진하고 있는 관련 보건 정책의 학문적인 근거가 되며, 대기 오염방지, 환경호르몬 규제, 금연 캠페인과 같은 여러 연관된 세부 정책에 있어서 설득력 있는 근거 데이터로 제시될 수 있음

(출처 : 요약문 13p)

Abstract ▼

Purpose&Contents
The final goal of this study was to identify the changes in the expression and methylation of AhR and AhRR (AhR repressor) in inflammatory cells in lesions in atopic dermatitis and psoriasis. We searched for substances that regulate the expression of genes to determine their pote

Purpose&Contents
The final goal of this study was to identify the changes in the expression and methylation of AhR and AhRR (AhR repressor) in inflammatory cells in lesions in atopic dermatitis and psoriasis. We searched for substances that regulate the expression of genes to determine their potential as therapeutic substances. The detailed goals of the study to achieve the final goal are as follows.

Results
1. To investigate epigenetic changes, we observed changes in DNA methylation in atopic dermatitis, psoriasis patients and skin tissues of six normal controls. Examine the smoking history of the patient to determine the effects of smoking. (Using MeDIP-Seq technique)
2. To analyze the expression of hypermethylated and hypomethylated genes identified by genome-wide changes in DNA methylation in atopic dermatitis, peripheral blood of psoriasis patients and normal controls.
3. Genome-wide methylation analysis is used to verify methylated DNA for hypermethylated and down-regulated genes identified in patients with atopic dermatitis and psoriasis. (Using Bisulfite Kit)
4. The expression of AhR and the target genes CYP1A1 and AhRR in PBMC cells of atopic dermatitis, psoriasis patients and normal control group was analyzed and its correlation with severity was analyzed. (qPCR)
5. To determine whether the hypomethylated genes in patients with atopic dermatitis and psoriasis are affected by the AhR-ligand axis, the changes in the proteins expressed by each gene after TCDD treatment are examined. (ELISA)
6. Check the effect of AhR and AhRR on keratinocytes (HaCaT cells). After the AhR ligand treatment, the difference of AhRR is analyzed. (siAhR and siAhRR transfection, qPCR, ELISA)
7. Treat the AhR inhibitor obtained from wild type, psoriasis-induced mice and confirm the change.
8. Experimental confirmation of AhR expression in AhR transgenic animal model.

Expected Contribution
1. Confirmation of the changes in the expression and methylation of AhR and AHRR genes expressed in skin tissues of atopic dermatitis and psoriasis lesions and in PBMC cells, and their correlation with the severity of the disease.
2. AhR and AHRR methylation changes affect the function and differentiation status of CD4 + T cells and congenital immune cells in atopic dermatitis and psoriasis lesions Treatment of AhR ligand under appropriate conditions induces the conversion of Th17 or Th22 cells to Tr1 present in atopic dermatitis and psoriasis skin lesions 4. This study is a rare study confirming epigenetic changes of inflammatory cells in atopic dermatitis and psoriasis lesions. It is thought that the methodology and the results of this study could be used in related studies.
5. Research is a study to find out the mechanism by which environmental hormone and its receptor, AhR, is involved in atopic dermatitis and inflammation in psoriasis. It is the academic basis of the national health policy, and it is designed to prevent air pollution and regulate environmental hormones. Can be presented as convincing evidence in many related sub-policies, such as smoking cessation campaigns.

(source : SUMMARY 14p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 보고서요약 ... 2
• 제출문 ... 11
• 보고서 요약서 ... 12
• 국문 요약문 ... 13
• SUMMARY ... 14
• 목차 ... 15
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 17
• 1-1. 연구개발 목적 ... 17
• 1-2. 연구개발의 필요성 ... 17
• 1-3. 연구개발 범위 ... 18
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 19
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 21
• 4. 목표달성도 및 관련분야 기여도 ... 41
• 4-1. 목표달성도 ... 41
• 4-2. 관련분야 기여도 ... 41
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 42
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 44
• 7. 연구개발성과의 보안등급 ... 44
• 8. 국가과학기술종합정보시스템에 등록한 연구시설·장비 현황 ... 44
• 9. 연구개발과제 수행에 따른 연구실 등의 안전조치 이행실적 ... 45
• 10. 연구개발과제의 대표적 연구실적 ... 45
• 11. 기타사항 ... 47
• 12. 참고문헌 ... 48
• 끝페이지 ... 49