초록 ▼

□ 연구개발 목표 및 내용
○ 최종 목표
ASF 및 구제역 저항성 인자의 선별 및 유전자 편집세포를 활용한 기능 검증

○ 전체 내용
1. 구제역 바이러스 감염 저항성 핵심 인자의 선별
- 돼지, 소의 연령별 바이러스 감염 저항 핵심 면역인자 발굴
* (돼지) 자돈 PBMC에서 FMDV 감염 시 성돈에 비해 더 많은 cytokine 방출
☞ 특히, IL-6의 경우, 자돈에서 감염 후 3시간에 높은 농도로 방출
☞ 자돈의 급성 심근염 등의 증상과 연관이 있을 것으로 사료됨
* (소

□ 연구개발 목표 및 내용
○ 최종 목표
ASF 및 구제역 저항성 인자의 선별 및 유전자 편집세포를 활용한 기능 검증

○ 전체 내용
1. 구제역 바이러스 감염 저항성 핵심 인자의 선별
- 돼지, 소의 연령별 바이러스 감염 저항 핵심 면역인자 발굴
* (돼지) 자돈 PBMC에서 FMDV 감염 시 성돈에 비해 더 많은 cytokine 방출
☞ 특히, IL-6의 경우, 자돈에서 감염 후 3시간에 높은 농도로 방출
☞ 자돈의 급성 심근염 등의 증상과 연관이 있을 것으로 사료됨
* (소) 감염 후 96시간 이내에 성우에서 IFN-γ와 TNF-α가 높은 농도로 발현
☞ T-cell관련 면역인자 추가 조사를 통한 연령별 특성 분석 추가 수행 예정

2. ASF 및 구제역 바이러스 항원에 대한 동물숙주 종 특이적 수용체 매개 면역반응 유전자 발굴
- (구제역) 감수성 동물숙주의 공통적 특성이 반영된 핵심유전자 발굴 및 기능검증
* FMDV 수용체 유전자 3종 및 세포 내 이입(세포사멸 억제) 유전자 6종
* 세포수준에서 바이러스 수용ㅇ체, 후보유전자 특정 부위의 기능을 검증
☞ 후보 유전자: ITGAV, ITGB6, ITGB8, LC3, Beclin-1, Sam68, EHMT2, CCR5, Sorcin
- (ASF) CD유전자군(세포표면분화항원)과 면역유전자 등 발현 패턴 분석
* 세포부착과 세포 내 이입 경로 관여 수용체, 면역반응관련 핵심 유전자 발굴
☞ 후보 유전자: ITGB1, ITGB3, CDC42, CD2, CD9, RHOA, ITGAV, ITGA3, ANXA2

3. ASF 및 구제역 저항성 인자로 선별된 유전자의 기능 분석을 위한 세포주 확립 및 기능 검증
가. PK-15 세포 유전자 편집세포 구축
- 돼지 신장 세포(PK-15) 대상 유전자 편집세포 (FMDV 9종 및 ASFV 4종) 구축
나. PK-15 세포 유전자 편집세포 저항능 검증
- 유전자 편집세포 대상 FMDV 및 ASFV 감염 접종 후 저항능 검증
* FMDV 감수성 유전자 편집세포 7종에서 저항능 증가 확인
* ASFV 편집 전 세포(PK-15) 감수성 확인 및 저항능 검증 재실험 예정
다. 돼지 유도만능줄기세포 구축
- 돼지 유도 만능줄기세포주 확립
* 단일 유전자 knock-out 돼지 유도 만능줄기세포주 확립
* 다중 유전자 knock-out 돼지 유도 만능줄기세포주 확립
* 확립된 knock-out 유도만능줄기세포주를 이용한 바이러스 저항성 인자(유전자)의 기능 2차 검증

□ 연구개발성과
- SCI논문 1건 게재 (IF 2.225)
* Age-dependent immune response in pigs against foot-and-mouth disease virus in vitro. 2021. Journal of Animal Science and Technology. 63(6):1376-1385
- 특허 1건 출원
* 신속한 핵산 검출을 위한 가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법(10-2021-0136482)
- 생명자원 등록 4건
- 학술발표(국내) 6건

□ 연구개발성과 활용계획 및 기대 효과
○ 바이러스 저항성 관여 핵심 유전자 구명을 통한 질병 저항성 가축 생산을 위한 정보 제공
- ASF, 구제역 바이러스, 동물유전체 정보 활용 바이러스 특성에 따른 동물숙주 내 이입에 관여하는 수용체 유전자와 바이러스-숙주간의 상호작용에 관려하는 면역반응 핵심유전자의 기능검증으로 질병저항성 개체선발 또는 악성 전염병 동물모델 산업화에 활용
○ ASF 바이러스 감염 가능 세포주의 확보/백신 생산 세포주에 활용 기대
- 유도만능줄기세포의 분화능력을 이용하여 monocyte/macrophage로의 분화 가능
- ASF 백신 생산 가능한 세포주 구축에 활용 가능성 있음

(출처 : 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 요 약 문 ... 2
• 목차 ... 4
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 5
• 2. 연구개발과제의 수행 과정 및 수행내용 ... 8
• 3. 연구개발과제의 수행 결과 및 목표 달성 정도 ... 10
• 1) 연구 수행 결과 ... 10
• 2) 목표 달성 수준 ... 43
• 4. 목표 미달 시 원인분석 ... 43
• 1) 목표 미달 원인(사유) 자체분석 내용 ... 43
• 2) 자체 보완 계획 ... 44
• 3) 연구개발 과정의 성실성 ... 45
• 5. 연구개발성과 및 관련 분야에 대한 기여 정도 ... 45
• 6. 연구개발성과의 관리 및 활용 계획 ... 46
• 끝페이지 ... 47