초록 ▼

연구목표
○ 영양체 유전자원의 안전장기보존을 통한 효율적인 국가관리시스템 구축을 지원농업유전자원센터, 관리기관 등 수요를 반영하여 초저온동결보존 프로토콜 개발
○ 영양체 유전자원의 기내·초저온동결보존을 통한 상보적 안전보존관리보유자원의 기내 증식체계 확립, 유리화법 기반 범용 동결보존 프로토콜 개발 및 Cryobanking 이행
○ 미래 유망 영양체 유전자원의 안전보존 및 지속이용체계 구축건강기능성, 아열대 원산 등 유망 영양체 자원의 발굴, 보존 및 활용지원

연구내용
가. 기내증식 및 보존 1

연구목표
○ 영양체 유전자원의 안전장기보존을 통한 효율적인 국가관리시스템 구축을 지원농업유전자원센터, 관리기관 등 수요를 반영하여 초저온동결보존 프로토콜 개발
○ 영양체 유전자원의 기내·초저온동결보존을 통한 상보적 안전보존관리보유자원의 기내 증식체계 확립, 유리화법 기반 범용 동결보존 프로토콜 개발 및 Cryobanking 이행
○ 미래 유망 영양체 유전자원의 안전보존 및 지속이용체계 구축건강기능성, 아열대 원산 등 유망 영양체 자원의 발굴, 보존 및 활용지원

연구내용
가. 기내증식 및 보존 1) 자원출처 및 증식점수 : 자체, 120 자원 2) 기내 증식‧보존계획
○ 대상 작물 : 기내보존자원 120점
○ 기내 순화 증식 계대배양 및 기내보존
나. 초저온보존 프로토콜 개발
1) 프로토콜 개발 목표 : 2건
○ 현삼과(큰개현삼), 장미과(아로니아)
2) 현삼과 초저온보존 프로토콜 개발
○ 대상 작물 : 큰개현삼
○ 보존방법 : 작은방울유리화법 기반
○ 시료 준비 → 기본조건 설정유리화 용액으로 A380% 용액에서 양호한 재생률을 보였으며, 초기 재생배양과정에서 암모니아가 빠진 재생배양배지를 사용하는 등 재생률 향상을 위한 다양한 처리 시도
○ 프로토콜 개발 처리내용시료(절편체 크기), 전배양(sucrose 10% → 17.5%) → 삼투보호(C435% 용액), 동결보호(A380%), 동결 및 해동(알루미늄 호일) → 언로딩(sucrose 35%) → 재생배양(암모니아가 배제된 재생배지, 호르몬 처리) 등 최적화 3) 장미과 초저온보존 프로토콜 개발
○ 대상 작물 : 아로니아
○ 보존방법 : 작은방울유리화법 기반
○ 시료 준비발근 촉진, 생장촉진 등 기내 증식 배양 효율성 제고사이토키닌 처리에 의한 다신초 형성 및 기내 증식계대배양
○ 기본조건 설정
○ 프로토콜 개발 처리내용시료(준비절차, 절편체 크기), 저온순화(저온처리) 및 전배양(sucrose 10% → 17.5% → 25%) 삼투보호(C435% 용액), 동결보호제(자체 선발한 용액 테스트) 및 동결보호조건 선발동결 및 해동(알루미늄 호일), 언로딩(sucrose 35~40%), 재생배양(암모니아 무첨가 재생배지, 호르몬 처리, 호르몬 무첨가배지로의 계대배양) 등 최적화를 위한 시험 수행다. 초저온보존 이행 1) 자원출처 및 작물수
○ 자체 보유자원 및 관리기관(경남 화훼연구소 등) 분양자원 포함 60자원 2) 유전자원 초저온보존 이행
○ 대상 작물 : 국화, 고구마, 포도 등 영양체자원
○ 보존방법 : 작은방울유리화법
○ 시료준비(국화 예시) 시료 증식 : 순화형 배양대에서 형광등 2개 조명 하에 MS배지에 5~6주 마디 계대배양 3~4회 실시 (필요시) 정단부 마디를 고체배지에 치상 후 그 위에 액체배지를 첨가하는 등 순화배양 실시
○ 보존과정(초본류 예시) 시료 적출 : 마디배양 7일 후 신초 적출(1.5mm 크기) 전배양 : sucrose 10% → 17.5% 삼투보호 : C435% 용액 30분동결보호 : A380% ice 60분동결 : 알루미늄 호일에 얹어서 동결 후 2ml 바이알에 저장해동 및 언로딩 : sucrose 35% (40℃)에 급속해동 후 40분간 언로딩재생배양(배지조성, 호르몬 처리) 등 최적화
○ 초저온보존한 자원의 재생률 모니터링 실시 3주 후 생존율, 6주 후 재생률 조사
○ 액체질소 탱크에 저장 후 유전자원센터에 저장의뢰자원당 10 바이알

기대효과
○ 국화과 자원의 초저온보존 프로토콜 개발 및 초저온보존 이행 학술논문 발표)
○ 증식배양 중인 자원은 차년도 초저온보존 프로토콜 개발 및 이행을 위한 재료로 활용
○ 신기능성 소재, 아열대 작물 등 영양체 유전자원의 안전보존관리체계 구축으로 생명산업 소재 제공
○ 초저온동결보존 기술강국 진입으로 농림축산 관련 연구개발·산업경쟁력 제고

(출처 : ntis)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 1. 2021년 농업생명자원 관리사업 협약내용 ... 2
• 가. 관리자원명 ... 2
• 나. 2021년 사업 협약 내용 ... 2
• 2. 2021년 사업추진 결과 ... 2
• 가. 영양체자원 보존‧증식 ... 2
• 나. 초저온보존 프로토콜 개발 ... 16
• 다. 초저온보존 이행 ... 25
• 라. 보유자원 이미지 정보 구축 ... 29
• 마. 사업결과 요약 ... 29
• 바. 사업결과 활용실적 및 계획 ... 30
• 3. 차년도 사업추진 계획(요약) ... 30
• 가. 영양체 관리기관(초저온보존) 사업 계획(요약) ... 30
• 4. 참고문헌 ... 30
• 끝페이지 ... 31