초록 ▼

□ 연구개요
⦁ 본 연구에서는 당뇨 치료 표적으로서 GPR41의 타당성을 검증하기 위하여 GPR41-선택적 작용제를 이용하여 당뇨 치료 효능을 세포 및 동물 모델에서 평가하고 표적-매개 하위 약리기전을 규명하고자 함.

□ 연구 목표대비 연구결과
⦁ C2C12 마우스 유래 근육세포에서 GPR41 작용제인 AR420626을 농도별(0.25, 0.5, 1, 5, 10, 20, 40, 100 μM)로 처치하고 MTT assay를 수행하여 세포 독성이 나타나지 않는 농도 범위를 확립함.
⦁ C2C12 마우스

□ 연구개요
⦁ 본 연구에서는 당뇨 치료 표적으로서 GPR41의 타당성을 검증하기 위하여 GPR41-선택적 작용제를 이용하여 당뇨 치료 효능을 세포 및 동물 모델에서 평가하고 표적-매개 하위 약리기전을 규명하고자 함.

□ 연구 목표대비 연구결과
⦁ C2C12 마우스 유래 근육세포에서 GPR41 작용제인 AR420626을 농도별(0.25, 0.5, 1, 5, 10, 20, 40, 100 μM)로 처치하고 MTT assay를 수행하여 세포 독성이 나타나지 않는 농도 범위를 확립함.
⦁ C2C12 마우스 유래 근육세포에서 AR420626을 1 μM, 5 μM, 10 μM의 농도로 0.5 h, 1 h, 2 h, 3 h 처리하여 basal 그리고 insulin 자극된 당 흡수능을 평가한 결과, 1 μM 농도 1 h 처리 조건에서 basal 그리고 insulin 자극된 당 흡수능이 유의미하게 증가함을 관찰함.
⦁ C2C12 마우스 유래 근육세포에서 AR420626에 의한 대표적인 당 흡수 유관 분자(IRS-1, Akt, ACC, AMPK, ERK1/2)들의 활성 변화를 확인한 결과, basal 그리고 insulin 자극 조건하에서 해당 분자들의 활성변화는 나타나지 않았음.
⦁ 문헌조사를 통하여 당 흡수를 일으킬 수 있는 기전인 저산소, 활성산소, 칼슘 신호에 대하여 추가 실험을 진행 중 AR420626에 의하여 칼슘 신호가 증가하는 현상을 Fluo-4 calcium assay를 통하여 관찰함. 또한, AR420626에 의하여 칼슘신호를 전달하는 분자인 CaMKII를 비롯하여 그 하위 신호인 p38과 CREB의 인산화가 유의미하게 증가함을 확인함.
⦁ AR420626의 표적 선택적 작용을 검증하기 위하여 Gαi-sensitive inhibitor인 pertussis toxin (PTX)를 처리하여 AR420626에 의한 당 흡수 증가 효과가 PTX에 의하여 소실됨을 확인하였음. 또한, AR420626에 의한 칼슘 신호 증가효과도 마찬가지로 PTX에 의해 소실되었음.
⦁ AR420626에 의한 칼슘 신호를 조사하기 위하여 근육세포에 발현하는 칼슘 채널 수용체인 dihydropyridine receptor blocker (amlodipine)을 이용하여 AR420626에 의해 증가하는 당 흡수가 amlodipine에 의하여 차단됨을 확인함.
⦁ AR420626에 의한 항당뇨 효능을 동물모델에서 검증하기 위하여 streptozotocin에 의한 당뇨 모델과 고지방식이에 의한 당뇨 모델을 확립하여 AR420626을 투여한 결과 경구 내당능이 유의미하게 개선됨을 확인함.
⦁ AR420626에 의한 근육 내 글리코겐을 anthrone reagent로 측정해본결과 유의미하게 증가하는 것을 확인하였고, periodic acid & schiff's reagent 염색을 수행하여 글리코겐이 더 진하게 염색됨을 확인함.

□ 연구개발성과의 활용 계획 및 기대효과(연구개발결과의 중요성)
⦁ 본 연구를 통하여 GPR41-표적 질환 치료 가능성과 작용기전 연구 결과를 통한 이론적 타당성과 논리적 근거를 제시함으로써 학문적 진보에 이바지함. 또한, 이러한 분자 표적의 검증으르 바탕으로 다양한 학문 분야와 연구 네크워크를 구축하고 다학제적-연계 융합연구를 수행 할 수 있음.
⦁ 기존에 다수 보고된 인슐린 분비능의 증가 전략과는 차별화된 GPR41 표적 혁신 당뇨치료제 개발 노력을 통한 국내 제약 산업 발전 제고 및 경제적 부가가치 극대화에 이바지함.
⦁ GPR41-표적 질환 치료 연구를 통하여 신약 표적과 개발과정을 이해하고 수행할 수 있는 독립적 연구자 양성에 기여함.
⦁ 표적 특이적 기능 검증 연구를 통하여 신약 후보 물질 도출 능력을 발전시키고, 실질적 신약 개발 연구에 기여 할 수 있을 것으로 기대됨.

(출처 : 연구결과 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 4
• 2. 연구개발과제의 수행 과정 및 수행 내용 ... 7
• 3. 연구개발과제의 수행 결과 및 목표 달성 수준 ... 8
• 1) 정성적 연구개발성과(연구개발결과) ... 8
• 2) 세부 정량적 연구개발성과 ... 13
• 3) 목표 달성 수준 ... 13
• 4) 목표 미달 시 원인 분석 ... 13
• 4. 연구개발성과의 관련 분야에 대한 기여 정도(연구개발결과의 중요성) ... 13
• 5. 연구개발성과의 관리 및 활용 계획 ... 13
• 6. 참고문헌 ... 14
• [붙임1] 세부 정량적 연구개발성과 ... 15
• [붙임2] 연구책임자 대표적 연구실적 및 증빙(요약문 및 사본) ... 18
• 끝페이지 ... 33