[보고서]통계적 분석방법을 기반한 법제처리 전후의 후박(Magnoliae Cortex)의 주요성분 변화와 생리활성 간의 상관성 평가

조종운

[국가R&D연구보고서] 통계적 분석방법을 기반한 법제처리 전후의 후박(Magnoliae Cortex)의 주요성분 변화와 생리활성 간의 상관성 평가
Evaluation of correlation between changes in main components of Magnoliae Cortex before and after legislative process and their bio-actives using statistical analysis 원문보기

보고서 정보
주관연구기관	충남대학교 Chungnam National University
연구책임자	조종운
보고서유형	최종보고서
발행국가	대한민국
언어	한국어
발행년월	2023-06
과제시작연도	2022
주관부처	교육부 Ministry of Education
연구관리전문기관	한국연구재단 National Research Foundation of Korea
등록번호	TRKO202300006260
과제고유번호	1345352345
사업명	이공학학술연구기반구축
DB 구축일자	2023-09-13
키워드	후박.법제처리방법.크로마토그래피.생리활성.다변량통계분석.Magnoliae Cortex.Primary processing.Chromatography.Bio-activity.Multivariate statistical analysis.

초록 ▼

□ 연구개발 목표 및 내용
○ 최종 목표
통계적인 분석방법을 활용하여 다양하게 법제처리된 법후박 (Processed Magnoliae Cortex)의 주요성분 변화를 정량적으로 비교분석하고, 이들 성분의 생리활성과의 상관성을 평가함으로써 한약재의 가공법으로 법제 방법의 효율성에 대해 과학적으로 평가하고자 함.

○ 전체 내용
(가) 시료의 조제
- 문헌(생규집 포제법, 한의학고서 등)에 수록된 생약의 법제처리 방법에 따라 시료 전처리 실시

(나) 각 법제처리방법 시료별 주요성분 분석, 분석법 개발 및 통계분석 실시
- 각 법제처리된 시료의 주요성분에 대한 패턴분석 및 구조동정
- 각 법제처리 시료별 지표물질 선정 및 분석법 개발
- 확립된 분서법에 대한 분석법 밸리데이션 실시
- 개발된 분석법을 활용한 각 법제 배치별 함량 모니터링 실시
- PCA, HCA, PLS-DA, LDA 등 다변량 통계분석을 통한 각 법제방법별 주요성분의 정량적인 품질평가 실시

(다) 법제처리된 시료에 대한 생리활성 및 독성 평가 실시
- 각 법제처리 시료별 간 α-glucosidase 저해 활성 등 생리활성 및 독성시험 평가 실시
- 각 법제처리 시료별 주요성분과 생리활성 결과와의 상관성을 평가함으로써 법제처리방법에 대한 과학적 타당성 제시

○ 1단계
● 목표
각 법제처리 방법별 시료 조제와 주요성분에 대한 HPLC 및 GC 동시분석법 개발
● 내용
(가) 시료의 조제
- 문헌(생규집 포제법, 한의학고서 등)에 수록된 생약의 법제처리 방법에 따라 시료 전처리 실시

(나) 각 법제처리방법 시료별 주요성분 분석, 분석법 개발 및 통계분석 실시
- 각 법제처리된 시료의 주요성분에 대한 패턴분석 및 구조동정
- 각 법제처리 시료별 지표물질 선정 및 분석법 개발
- 확립된 분서법에 대한 분석법 밸리데이션 실시
- 개발된 분석법을 활용한 각 법제 배치별 함량 모니터링 실시
- PCA, HCA, PLS-DA, LDA 등 다변량 통계분석을 통한 각 법제방법별 주요성분의 정량적인 품질평가 실시

○ n단계
● 목표
법제처리된 시료의 주요성분의 변화가 생리활성, 독성 평가 결과에 대한 상관성 평가
● 내용
(가) 각 법제처리 시료별 간 α-glucosidase 저해 활성 등 생리활성 및 독성시험 평가 실시
(나) 각 법제처리 시료별 주요성분과 생리활성 결과와의 상관성을 평가함으로써 법제처리방법에 대한 과학적 타당성 제시

□ 연구개발성과
1) 후박 등 한약재의 법제 방법에 대한 과학적인 타당성 제시

□ 연구개발성과 활용계획 및 기대 효과
1) 연구개발성과 활용 계획
- 한방제제 등 의약품 제조산업에서의 새로운 천연 의약 소재 개발 및 품질관리 등에 응용
- 한의원 등 병의원 처방 등에 응용
2) 기대효과
- 후박 등 생약의 법제처리방법에 대한 과학적인 근거 제시를 통한 한방관련 분야의 과학화 및 기술 고도화에 기여
- 생약의 법제 처리방법에 대한 과학화, 품질 표준화를 통한 관련 산업의 국제경쟁력 제고, 국민 건강 증진 등에 기여

(출처 : 요약문 2p)

목차 Contents

표지 ... 1
요약문 ... 2
1. 연구개발과제의 개요 ... 4
2. 연구개발과제의 수행 과정 및 수행 내용 ... 4
(가) 시료의 조제 ... 4
(나) 각 법제처리방법 시료별 주요성분 분석, 분석법 개발 및 통계분석 실시 ... 4
(다) 법제처리된 시료에 대한 생리활성 및 독성 평가 실시 ... 9
3. 연구개발과제의 수행 결과 및 목표 달성 정도 ... 10
1) 연구수행 결과 ... 10
2) 목표 달성 수준 ... 10
4. 연구개발성과의 관련 분야에 대한 기여 정도 ... 10
5. 연구개발성과 및 활용 계획 ... 11
1) 연구성과 ... 11
2) 연구성과 활용계획 ... 11
6. 참고문헌 ... 11
끝페이지 ... 11

표/그림 (13)

표 각 법제처리 방법별 후박의 전처리 조건
표 HPLC chromatograms of main components in the processed Magnoliae Cortex: Non-processed sample (A), the roasted sample with ginger juice (B), the roasted sample with honey (C), the roasted sample with salt (D), the roasted sample only (E), the steamed sample with wine (F); HPLC analytical condition: column – Hector A C18 (250 x 4.6 mm (ID), 5 μm), mobile phase - (A) 0.1% formic acid in water, (B) 0.1% formic acid in acetonitrile, gradient elution – 5 ~ 70 B% (70 min), 70 ~ 100 B% (5 min), 100 B% (5 min), 100 ~ 5 B%(0.01 min), 5 B% (10 min), detection – UV 283 nm, injection volume – 10 μL, column temperature – 30 ℃, flow rate – 1.0 mL/min
표 법제처리 방법에 따라 변화된 7종의 주요성분에 대한 MS 및 UV spectrum 분석결과
표 법제 처리된 후박 중 주요 정유성분의 GC chromatogram 패턴: (A)　미법제 처리구, (B) 초; GC 분석 조건: 칼럼 – DB-5 (30 m x 0.32 mm (ID), thickness: 0.32 μm), 캐리어 가스 – He (1 mL/min), 주입온도: 325 ℃, 칼럼오븐: initial 80 ℃ (3 min), 80 - 200 ℃ @ 3 ℃/min, step 1: 200 ℃ (5 min), 검출기 온도: 300 ℃, 검출기: FID, He 30 mL/min, H2 30 mL/min, Air 450 mL/min, split - 20 : 1, 주입량 - 1 μL
표 법제처리된 후박 중 주요 정유성분의 MS 스펙트럼 분석 결과
표 선정된 법제처리 후박의 지표물질에 대한 생리활성 및 독성에 관한 문헌검색 결과
표 법제처리된 후박의 페놀 및 알카로이드 화합물에 대한 최적화된 HPLC 크로마토그램: (A) 미법제처리구, (B) 초, (C) 표준품 혼합액 ; HPLC 분석조건 : 칼럼 - Hydrosphere C18 (250 x 4.6 mm (ID), 5 ㎛), 이동상 - (A) 5 mM 인산나트륨 수용액 (pH 4.5)ー메탄올(95:5), (B) 5 mM 인산나트륨 수용액(pH 4. 5)ー메탄올(10:90), 기울기용출 – 5 – 25 B% (20분), 25 – 60 B% (25분), 60 – 76 B% (15분), 76 – 100 B% (20분) 100 B% (10분), 유속 – 0.8 mL/min, 검출파장- UV 283 nm, 주입량 – 10 μL, 칼럼온도 – 40℃
표 법제처리된 후박의 정유 성분에 대한 최적화된 GC 크로마토그램: (A) 미법제처리구, (B) 초, (C) 표준품 혼합액 ; GC 분석조건 : 칼럼 – DB-5 (30 m x 0.32 mm (ID), thickness: 0.32 μm), carrier gas – He (1 mL/min), Injection temperature : 325 ℃, column oven: initial 50 ℃ for 3 min, 50 to 200 ℃ @ 4 ℃/min, step 1: 200 ℃ for 5 min, detection temperature: 300 ℃, detection : FID, He 30 mL/min, H2 30 mL/min, Air 450 mL/min, split - 20 : 1, injection volume – 1 μL
표 개발된 분석법의 범위, 직선성, 검출한계, 정량한계 측정결과
표 개발된 분석법의 일내/일간 정밀성, 정확성 측정결과
표 각 법제처리 시료별 8종의 주요성분에 대한 함량 분석 결과
표 각 법제처리 시료별 주요성분에 대한 다변량 통계분석 결과: NPS(미법제 처리구), RGS(강자), RHS(밀자), RSS(염자), RS(초), SSW(수증), SSWW(주증)
표 각 법제처리 시료별 α-glycosidase 및 sEH 저해 활성 비교 결과

참고문헌 (25)

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