초록 ▼

연구개발 목표 및 내용
최종 목표
방광암 환자의 소변 검체에서 방광암 환자에 특이적인 엑소좀 단백 마커를 발굴하고 임상적 가치를 검증하고자 함.
전체 내용
방광암 환자 소변 검체를 대상으로 순도와 효율이 높은 엑소좀 추출 방법 확립하고, 이를 바탕으로 항체 어레이를 이용하여 방광암 환자 수술 전후 소변에서 유의한 발현 차이를 보이는 엑소좀 단백을 선별 및 이의 진단적 가치를 실제 임상 환자 코호트를 대상으로 검증함.

1단계
(해당 시 작성)
목표
방광암 환자 소변 검체를 대상으로

연구개발 목표 및 내용
최종 목표
방광암 환자의 소변 검체에서 방광암 환자에 특이적인 엑소좀 단백 마커를 발굴하고 임상적 가치를 검증하고자 함.
전체 내용
방광암 환자 소변 검체를 대상으로 순도와 효율이 높은 엑소좀 추출 방법 확립하고, 이를 바탕으로 항체 어레이를 이용하여 방광암 환자 수술 전후 소변에서 유의한 발현 차이를 보이는 엑소좀 단백을 선별 및 이의 진단적 가치를 실제 임상 환자 코호트를 대상으로 검증함.

1단계
(해당 시 작성)
목표
방광암 환자 소변 검체를 대상으로 순도(purity)와 효율(yield)이 높은 최적의 엑소좀 분리 방법 확립.
내용
아직까지 효율적인 소변 엑소좀 추출 방법이 정립되지 않았으나, 기존 연구 결과들에서 흔히 사용되는 세 가지 방법, 즉 원심 분리법(differential centrifugation), ExoLutE^®, 그리고 ExoDisc를 이용하여 방광암과 정상인 소변에서 엑소좀 추출 후 Nanoparticle tracking analysis 및 transmission electron microscopy로 엑소좀 추출에 가장 효율적인 방법 확립.

2단계
(해당 시 작성)
목표
위에서 선별된 엑소좀 추출법으로 방광암 환자 수술 전후 소변에서 항체 어레이를 이용하여 유의한 발현 차이를 보이는 엑소좀 단백 선별.
내용
이전 연구들에서 보고된 소변 검체의 개인간 변이(inter-individual variability)를 고려하여 수술 전후 방광암 환자의 소변을 대상으로, 수백 개 이상의 소변 엑소좀 단백 발현을 동시에 분석할 수 있는 항체 어레이 분석을 통해 수술 전,후 유의하게 발현 차이를 보이는 엑소좀 단백들을 선별함.

3단계
(해당 시 작성)
목표
선별된 타겟 엑소좀 단백을 대상으로 다수의 방광암 환자 코호트에서 진단 가치 검증.
내용
위 2단계 분석에서 선별된 엑소좀 단백을 대상으로 방광암 진단적 가치를 타당화하기 위해 본 대학병원 바이오뱅크의 방광암과 정상인 소변 검체를 대상으로 엑소좀 내 해당 단백 발현을 ELISA로 정량 분석/비교함으로써 진단적 가치를 검증함.

연구개발성과
세 가지 엑소좀 추출 방법 중 ExoDisc가 가장 효율적인 소변내 엑소좀 추출 방법임을 확인함. 항체 어레이를 이용한 수술 전후 소변 검체 분석에서 alpha-2 macroglobulin(A2M) 등의 단백이 수술 전,후 유의한 발현 차이를 보이는 방광암 진단을 위한 후보 엑소좀 단백임을 선별함. 다수의 임상 검체를 이용하여 소변 분석에서 A2M은 정상인 소변내 엑소좀에서는 거의 발현이 없던 반면, 방광암 소변 엑소좀에서는 유의하게 높은 발현을 보임을 확인함으로써 진단적 가치가 있음을 검증함. 위 연구 개발 성과를 2021년 특허 출원 및 등록 완료하였음(제 10-2310302호)

연구개발성과 활용계획 및 기대 효과
본 연구의 소변 엑소좀 연구 전략 및 방법론은 방광암뿐만 아니라, 다른 암 진단 영역에서 소변 엑소좀-기반 마커 발견에 활용될 수 있으리라 판단됨. 또한 후속 3개년 연구를 통해 수백 명 이상의 대규모 임상 소변 샘플에서 소변 엑소좀 A2M의 진단적 가치를 정밀하게 타당화함으로써 실제 임상 진료에 적용 가능성을 평가할 예정임.

(출처 : 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 요 약 문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 4
• 2. 연구개발과제의 수행 과정 및 수행 내용 ... 6
• 3. 연구개발과제의 수행 결과 및 목표 달성 정도 ... 8
• 1) 연구수행 결과 ... 8
• 4. 연구개발성과의 관련 분야에 대한 기여 정도 ... 10
• 5. 연구개발성과의 관리 및 활용 계획 ... 10
• 6. 참고문헌 ... 11
• 끝페이지 ... 11