초록 ▼

□ 연구개요
상처가 난 피부조직에서 TLR3 활성화에 의해 조절될 수 있는 엑소좀의 재생능력을 확인하고, 엑소좀에 포함된 물질들을 “Omics” 기술로 분석함으로써 상처 치료 및 조직재생을 촉진할 수 있는 다양한 생체적합성 생리활성 물질들을 규명하는 것을 목표로 한다.

□ 연구 목표대비 연구결과
- 초원심분리기와 chemical을 이용한 엑소좀 분리법 검증한 결과 초원심분리기를 이용한 방법이 더 많은 양의 엑소좀을 분리할 수 있고, chemical을 사용한 방법은 간단하지만 불순물이 많이 함유되어 있는 것을

□ 연구개요
상처가 난 피부조직에서 TLR3 활성화에 의해 조절될 수 있는 엑소좀의 재생능력을 확인하고, 엑소좀에 포함된 물질들을 “Omics” 기술로 분석함으로써 상처 치료 및 조직재생을 촉진할 수 있는 다양한 생체적합성 생리활성 물질들을 규명하는 것을 목표로 한다.

□ 연구 목표대비 연구결과
- 초원심분리기와 chemical을 이용한 엑소좀 분리법 검증한 결과 초원심분리기를 이용한 방법이 더 많은 양의 엑소좀을 분리할 수 있고, chemical을 사용한 방법은 간단하지만 불순물이 많이 함유되어 있는 것을 확인
- 분리된 엑소좀에 의해 TLR3, KRT15, KRT19 등과 같은 hair follicle stem cell marker들의 발현이 증가함.
- 분리된 엑소좀을 size analyzer를 이용하여 사이즈 및 정량 분석한 결과 TLR3 활성화에 의해 엑소좀의 양이 증가되는 것을 확인
- 분리된 엑소좀의 hair follicle stem cell 유전자의 증가는 TLR3 활성화에 의해 조절되는 것을 확인
- 사람 keratinocytes를 이용한 In vitro 실험에서 세포의 성장 및 hair follicle stem cell marker의 발현을 증가시키는 효과를 확인.
- RNA sequencing 분석 완료 및 microRNA database 확립
- 후보물질로 생각되는 microRNA를 처리하여 조직재생에 중요한 WNT7b 유전자 증가 확인
- 분리된 엑소좀의 유무를 전자현미경으로 확인 완료
- 분리된 엑소좀에서 대사체 분석을 진행하였고, 지방산과 같은 성분들이 많이 증가.
- RNA sequencing 결과 autophagy 관련 신호 체계가 엑소좀에 의해 활성화 될 수 있음을 확인.
- Autophagy와 조직 재생에 관련이 있는 reversine이라는 물질을 reference로 처리한 결과 keratinocytes에서는 오히려 분화를 유도하는 것으로 확인됨.
- Reversine에 의한 피부장벽 관련 유전자의 발현이 매우 증가함을 확인.
- 아토피 실험방법 확립

□ 연구개발성과의 활용 계획 및 기대효과(연구개발결과의 중요성)
- 사람 keratinocytes 배지에서 초원심분리기를 이용한 엑소좀 분리법 확립하였고, 분리된 엑소좀은 hair follicle stem cell marker들의 발현을 증가시키는 것으로 나타났기 때문에, 조직 재생에 있어서 중요한 역할을 할 수 있음을 시사한다.
- 분리된 엑소좀의 사이즈 및 정량 분석 결과는 TLR3 활성화에 의해 엑소좀의 양이 증가되는 것을 보여주었음. 또한, 분리된 엑소좀의 hair follicle stem cell marker의 발현 증가는 TLR3 활성화에 의해 조절됨을 검증하고 있음.
- 피부세포에서 분비된 엑소좀이 조직 재생 및 세포 신호 전달에 관여함을 보여주며, 향후 엑소좀을 활용한 연구 개발에 새로운 아이디어를 제공할 수 있음.
- RNA sequencing 분석과 microRNA database의 확립은 엑소좀의 성질 및 기능을 보다 깊이 있게 이해하는 데에 도움이 될 것임.
- 대사체 분석을 통해 엑소좀의 구성물질을 파악하고, autophagy 관련 신호 체계의 활성화와 관련하여 엑소좀의 역할을 더 확장시킬 수 있음.
- 아토피 실험방법의 확립은 향후 피부 질환 치료 및 관리에 대한 엑소좀 및 엑소좀 유래의 생리활성 물질을 활용함으로써 새로운 접근법을 제공할 수 있음.

(출처 : 연구결과 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 4
• 1) 연구개발의 목적 ... 4
• 2) 필요성 ... 4
• 3) 연구가설 ... 4
• 4) 최종목표 ... 5
• 2. 연구개발과제의 수행 과정 및 수행 내용 ... 5
• 1) 사람 Keratinocytes에서 TLR3 활성화에 의한 엑소좀 생합성 마커의 확인 ... 5
• 2) TLR3 활성화에 의해 사람 Keratinocytes에서 분비된 엑소좀 분리 및 동정 ... 5
• 3) 엑소좀의 TLR3 신호 관련 유전자의 발현 확인을 위한 효능 검증 ... 6
• 4) 엑소좀에 포함된 non-coding RNA 분석 ... 7
• 5) 엑소좀에 포함된 생리활성 물질 분석 ... 8
• 6) 엑소좀에 포함된 생리활성 물질에 의한 자가포식 및 세포 분화 능력 확인 ... 8
• 3. 연구개발과제의 수행 결과 및 목표 달성 수준 ... 9
• 1) 정성적 연구개발성과(연구개발결과) ... 9
• 2) 세부 정량적 연구개발성과 ... 9
• 3) 목표 달성 수준 ... 9
• 4) 목표 미달 시 원인 분석 ... 10
• 4. 연구개발성과의 관련 분야에 대한 기여 정도(연구개발결과의 중요성) ... 11
• 5. 연구개발성과의 관리 및 활용 계획 ... 12
• 1) 성과 관리 추진체계 ... 12
• 2) 연구개발성과의 활용분야 ... 12
• 3) 활용방안 ... 12
• 4) 추가연구의 필요성 ... 12
• 5) 타 연구에의 응용 ... 12
• 6) 기업화 추진방안 및 기술이전 ... 13
• 6. 자체점검표 ... 13
• 7. 참고문헌 ... 13
• 끝페이지 ... 32