버섯파리(Lycoriella sp.:Sciaridae)의 생리·생태적 특성 및 생물학적 방제에 관한 연구 Studies on the Ecoliogical and Physiological Charateristics of mushroom fly(Lycoriella sp.: Sciaridae) in indoor rearing and on the Biogical Control using by Bacillus thuringiensis원문보기
버섯파리(Lycoriella sp.)의 실내 계대사육에 의한 생리·생태적 특성을 조사하였고, 또한 13개 Bacillus thuringiensis 아종의 내독소 단백질을 이용하여 버섯파리의 방제효과를 실험하였다. 버섯파리의 생활사는 알기간이 평균 4일이었고 유충기간은 수컷이 13일, 암컷은 13.5일이었으며 암수 구분은 4령 유충기의 체중과 체장에 의해 가능하였다. 번데기 기간은 수컷이 5일, 암컷은 5.5일이었고 성충기관은 암컷이 5일, 수컷이 7일이었으며, 산란수는 개체당 70∼90개로 주로 균사체 위나 속에 산란하였다. 사육 온도가 21°C 일 때 버섯파리의 전체 경과일수는 암컷이 28일 수컷이 29일이었다. 버섯파리 암컷 특이 단백질 및 주요 난황 단백질을 탐색하기 위해 ...
버섯파리(Lycoriella sp.)의 실내 계대사육에 의한 생리·생태적 특성을 조사하였고, 또한 13개 Bacillus thuringiensis 아종의 내독소 단백질을 이용하여 버섯파리의 방제효과를 실험하였다. 버섯파리의 생활사는 알기간이 평균 4일이었고 유충기간은 수컷이 13일, 암컷은 13.5일이었으며 암수 구분은 4령 유충기의 체중과 체장에 의해 가능하였다. 번데기 기간은 수컷이 5일, 암컷은 5.5일이었고 성충기관은 암컷이 5일, 수컷이 7일이었으며, 산란수는 개체당 70∼90개로 주로 균사체 위나 속에 산란하였다. 사육 온도가 21°C 일 때 버섯파리의 전체 경과일수는 암컷이 28일 수컷이 29일이었다. 버섯파리 암컷 특이 단백질 및 주요 난황 단백질을 탐색하기 위해 SDS-PAGE 및 DE-52 ion exchange column chromatography를 실시한 결과, 암컷 성충 혈림프에서 190,64KDa의 암컷 특이 단백질이 관찰되었고, 성충 난소 추출물에서는 분자량 190, 64, 50KDa인 세 개의 주요 polypeptide가 확인되었으며, 이중 두 개의 polypeptide(190,64KDa)는 배자가 발육함에 따라 점진적으로 감소하는 단백질임을 확인하였다. 또한 주요 난황단백질에 대한 항체(IgG)를 사용하여 western Boltting한 결과, 분자량 190KDa인 고분자 polypetide 만이 반응하여 이 두 Polypeptide(190,64KDa)는 유전적으로 상이한 것으로 사료되며, 그 결과 버섯파리의 주요 난황단백질은 190KDa의 polypeptide인 것으로 본 연구결과 확인되었다. 버섯파리의 생물학적 방제를 위해 13개 B. thuringiensis 아종을 이용한 생물검정을 한 결과 13개 Bt. 아종은 치사효과를 나타내지 않았다. 이 원인을 확인하고자 파리목 곤충에 특성이 있는 3개 Bt. 아종 내독소 단백질을 유충 중장에서의 활성 여부를 SDS-PAGE로서 조사하였다. Trypsin과 유충 소화액으로 각각 처리한 Bt. morrisoni의 경우 분자량이 약 52KDa, Bt. israelensis에서는 약 37KDa, 그리고 Bt. darmstadiensis에서는 약 39KDa의 단백질이 생성되었으나, 이들 내독소 단백질의 독성화 여부는 확인할 수 없었다.
버섯파리(Lycoriella sp.)의 실내 계대사육에 의한 생리·생태적 특성을 조사하였고, 또한 13개 Bacillus thuringiensis 아종의 내독소 단백질을 이용하여 버섯파리의 방제효과를 실험하였다. 버섯파리의 생활사는 알기간이 평균 4일이었고 유충기간은 수컷이 13일, 암컷은 13.5일이었으며 암수 구분은 4령 유충기의 체중과 체장에 의해 가능하였다. 번데기 기간은 수컷이 5일, 암컷은 5.5일이었고 성충기관은 암컷이 5일, 수컷이 7일이었으며, 산란수는 개체당 70∼90개로 주로 균사체 위나 속에 산란하였다. 사육 온도가 21°C 일 때 버섯파리의 전체 경과일수는 암컷이 28일 수컷이 29일이었다. 버섯파리 암컷 특이 단백질 및 주요 난황 단백질을 탐색하기 위해 SDS-PAGE 및 DE-52 ion exchange column chromatography를 실시한 결과, 암컷 성충 혈림프에서 190,64KDa의 암컷 특이 단백질이 관찰되었고, 성충 난소 추출물에서는 분자량 190, 64, 50KDa인 세 개의 주요 polypeptide가 확인되었으며, 이중 두 개의 polypeptide(190,64KDa)는 배자가 발육함에 따라 점진적으로 감소하는 단백질임을 확인하였다. 또한 주요 난황단백질에 대한 항체(IgG)를 사용하여 western Boltting한 결과, 분자량 190KDa인 고분자 polypetide 만이 반응하여 이 두 Polypeptide(190,64KDa)는 유전적으로 상이한 것으로 사료되며, 그 결과 버섯파리의 주요 난황단백질은 190KDa의 polypeptide인 것으로 본 연구결과 확인되었다. 버섯파리의 생물학적 방제를 위해 13개 B. thuringiensis 아종을 이용한 생물검정을 한 결과 13개 Bt. 아종은 치사효과를 나타내지 않았다. 이 원인을 확인하고자 파리목 곤충에 특성이 있는 3개 Bt. 아종 내독소 단백질을 유충 중장에서의 활성 여부를 SDS-PAGE로서 조사하였다. Trypsin과 유충 소화액으로 각각 처리한 Bt. morrisoni의 경우 분자량이 약 52KDa, Bt. israelensis에서는 약 37KDa, 그리고 Bt. darmstadiensis에서는 약 39KDa의 단백질이 생성되었으나, 이들 내독소 단백질의 독성화 여부는 확인할 수 없었다.
This study was carried out to investigate the ecological and physiological characteristics of a Sciarid fly (Lycoriella sp.) in indoor rearing at 21℃ and to estimate the effect of biological control using by the endotoxins of 13 subspecies Bacillus thuringiensis. In the lifespan of mushroom fly(lyco...
This study was carried out to investigate the ecological and physiological characteristics of a Sciarid fly (Lycoriella sp.) in indoor rearing at 21℃ and to estimate the effect of biological control using by the endotoxins of 13 subspecies Bacillus thuringiensis. In the lifespan of mushroom fly(lycoriella sp.), the average egg period was 4 days, and the larval periods of female and male were respectively 13.5 and 13 days. In the 4th instar larvae, the development chracteristics of female and male became different by body length, weight and segment size. Adults were respectively emerged from female and male pupae on the 55th and on the 5th day after pupation and, a female laid approximately 70∼90 eggs on/in the sporophore of mushroom. And the average adult period of female and male respectively 5.5 days and 7 days. In conclusion, total lifespan of male and female were 29 and 28 days, respectively. The examination of physiological charateristics were carried out to investigate major yolk protein, and its chemicobiological cheracteristics of Lycoriella sp. On the SDS-PAGE analysis of ovary extract from Lycoriella sp., three major protein bands were detected and its molecular weight was 190, 64, SOKDa, respectively. Two polypeptides, 190 and 64KDa, were confirmed as adult female specific proteins and these polypeptides were gradually used up during the embryogenesis. The yolk protein were partly purified by ultracentrifugation, and then, were used ion exchange chromatography. According to the results, most of yolk protein erupted on 0.3M NaC1. For the result of western blotting with anti-sera of major yolk protein band on PAGE, only one polypeptide, lSOKDa, was reacted. Therefore, it can be assumed that may have the different in amino acid composition. The 13 subspecies of B. thuringiensis were used to estimste the effect of biological control of Lycoriella sp., although there were no significant effects. For further confirmation, larvae gut juice of Lycoriella sp. and trypsin were respectively treated into the parasporal crystal proteins of three subspecies of B. thuringiensis, which are known to be toxic to dipteran insects and analysed by SDS-PAGE. According to the results, the major parasporal crystal proteins were respectively produced by Bt. morrisoni as the amount of 52KDa, Bt. israelensis as 37KDa and Bt. darmstadiensis as 39KDa, but the activity of these proteins could not be unfortunately confirmed in this study.
This study was carried out to investigate the ecological and physiological characteristics of a Sciarid fly (Lycoriella sp.) in indoor rearing at 21℃ and to estimate the effect of biological control using by the endotoxins of 13 subspecies Bacillus thuringiensis. In the lifespan of mushroom fly(lycoriella sp.), the average egg period was 4 days, and the larval periods of female and male were respectively 13.5 and 13 days. In the 4th instar larvae, the development chracteristics of female and male became different by body length, weight and segment size. Adults were respectively emerged from female and male pupae on the 55th and on the 5th day after pupation and, a female laid approximately 70∼90 eggs on/in the sporophore of mushroom. And the average adult period of female and male respectively 5.5 days and 7 days. In conclusion, total lifespan of male and female were 29 and 28 days, respectively. The examination of physiological charateristics were carried out to investigate major yolk protein, and its chemicobiological cheracteristics of Lycoriella sp. On the SDS-PAGE analysis of ovary extract from Lycoriella sp., three major protein bands were detected and its molecular weight was 190, 64, SOKDa, respectively. Two polypeptides, 190 and 64KDa, were confirmed as adult female specific proteins and these polypeptides were gradually used up during the embryogenesis. The yolk protein were partly purified by ultracentrifugation, and then, were used ion exchange chromatography. According to the results, most of yolk protein erupted on 0.3M NaC1. For the result of western blotting with anti-sera of major yolk protein band on PAGE, only one polypeptide, lSOKDa, was reacted. Therefore, it can be assumed that may have the different in amino acid composition. The 13 subspecies of B. thuringiensis were used to estimste the effect of biological control of Lycoriella sp., although there were no significant effects. For further confirmation, larvae gut juice of Lycoriella sp. and trypsin were respectively treated into the parasporal crystal proteins of three subspecies of B. thuringiensis, which are known to be toxic to dipteran insects and analysed by SDS-PAGE. According to the results, the major parasporal crystal proteins were respectively produced by Bt. morrisoni as the amount of 52KDa, Bt. israelensis as 37KDa and Bt. darmstadiensis as 39KDa, but the activity of these proteins could not be unfortunately confirmed in this study.
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