대부분의 내분비계 장애물질은 인간의 생식기능저하, 기형, 성장장애, 암 등을 유발시키며 그 중 bisphenol A는 일상생활에서 널리 사용되는 생활용품, 플라스틱 용기 등에서 추출되는 물질로써 여성 호르몬적 작용능력을 가지고 있으며 세포사를 유도한다고 알려져 있다. 따라서 본 연구는 세포사를 유도하는 bisphenol A가 생쥐의 정소세포 Leydig cell line인 TM3 세포와 Sertoli cell line인 TM4 세포에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. bisphenol A를 처리농도 (1000 μM, 200 μM, 400 μM, 600 μM, 800 μM, 1000 μM) 및 시간별 (24h, 48h) 로 세포독성을 mitochondria의 succinate dehydrogenase의 활성도를 이용한 MTT assay와 ...
대부분의 내분비계 장애물질은 인간의 생식기능저하, 기형, 성장장애, 암 등을 유발시키며 그 중 bisphenol A는 일상생활에서 널리 사용되는 생활용품, 플라스틱 용기 등에서 추출되는 물질로써 여성 호르몬적 작용능력을 가지고 있으며 세포사를 유도한다고 알려져 있다. 따라서 본 연구는 세포사를 유도하는 bisphenol A가 생쥐의 정소세포 Leydig cell line인 TM3 세포와 Sertoli cell line인 TM4 세포에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. bisphenol A를 처리농도 (1000 μM, 200 μM, 400 μM, 600 μM, 800 μM, 1000 μM) 및 시간별 (24h, 48h) 로 세포독성을 mitochondria의 succinate dehydrogenase의 활성도를 이용한 MTT assay와 세포막 손상에 의해 배지로 유출되어진 LDH량을 측정하는 LDH assay방법을 사용하여 측정하였고, 도립 위상차 현미경으로 세포형태를 관찰하였다. 또한 세포자연사를 확인하기 위해 세포자연사에서 보여지는 형태적, 생화학적 변화를 조사하였다. 실험결과 고농도 (800 μM, 1000 μM) 처리시 TM3세포의 경우 세포독성을 확인할 수 있었고 특히 TM4세포의 경우에는 TM3세포 경우보다 현저히 세포가 감소함을 확인할 수 있었으며 600 M 처리 시에도 세포독성이 나타났다. 저농도 (100 μM, 200 μM, 400 μM) 처리시 TM3세포와 TM4세포는 Control과 Vehicle Control (VC) 와 별다른 차이가 없었다. 시간별로는 24h보다 48h에서 더 강력한 세포독성을 확인할 수 있었다. 세포독성차이는 LDH assay보다 MTT assay가 더 민감도를 나타냈다. 세포형태학적 관찰로는 저농도 처리군들은 Control과 VC세포들과 별다른 차이가 없었으며 고농도 처리군들에서는 세포 내 액포가 많이 형성되었으며 고착세포 수도 농도 의존적으로 감소하였다. 세포자연사를 판정하기 위해 유세포분석기에 의한 TM3, TM4 세포의 세포주기를 분석한 결과, bisphenol A를 저농도 (100 μM) 로 처리하면 세포자연사의 지표가 되는 A_0기에 있는 세포들이 별다른 이상이 보이지 않으며 중농도 (700 μM, 500 μM) 로 처리했을 때 A_0기에 있는 세포들이 세포자연사에 의한 세포사가 일어남을 확인하였고 고농도 (1000 μM) 처리시 세포괴사에 의한 세포사가 일어남을 확인하였다. 한편 bisphenol A를 처리한 뒤 TM3, TM4세포로부터 DNA를 추출하여 전기영동을 실시한 결과, 대조군에서 보이지 않는 약한 DNA의 분절화현상이 bisphenol A의 중농도 (700 μM, 500 μM) 에서 유발됨을 알 수 있었다. Hematoxylin-eosin 염색을 실시한 결과, bisphenol A를 저농도 (1000 μM) 로 처리했을 경우 TM3, TM4세포 모두에서 대조군과 별차이가 없었으며 중농도 (700 μM, 500 μM) 로 처리한 TM3, TM4 세포에는 대부분의 세포들이 세포질과 더불어 핵이 응축된 세포의 특징을 나타내었으며 고농도 (1000 M) 처리시정상적인 세포는 찾아 볼 수가 없었으며 또한 Hoechst 33342 형광염색기법에 의해 세포자연사에서 특징적으로 보여지는 세포핵의 분절화현상을 bisphenol A의 중농도에서 관찰하였고 고농도 처리시에는 정상적인 세포를 찾아 볼 수 없었다. 이상의 결과로 보아 bisphenol A는 TM3, TM4 세포에서 세포독성을 나타내어 세포의 증식을 억제하고 고농도에서는 세포괴사를 일으키며 중농도에서는 세포자연사를 일으키는 것을 확인하였다.
대부분의 내분비계 장애물질은 인간의 생식기능저하, 기형, 성장장애, 암 등을 유발시키며 그 중 bisphenol A는 일상생활에서 널리 사용되는 생활용품, 플라스틱 용기 등에서 추출되는 물질로써 여성 호르몬적 작용능력을 가지고 있으며 세포사를 유도한다고 알려져 있다. 따라서 본 연구는 세포사를 유도하는 bisphenol A가 생쥐의 정소세포 Leydig cell line인 TM3 세포와 Sertoli cell line인 TM4 세포에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. bisphenol A를 처리농도 (1000 μM, 200 μM, 400 μM, 600 μM, 800 μM, 1000 μM) 및 시간별 (24h, 48h) 로 세포독성을 mitochondria의 succinate dehydrogenase의 활성도를 이용한 MTT assay와 세포막 손상에 의해 배지로 유출되어진 LDH량을 측정하는 LDH assay방법을 사용하여 측정하였고, 도립 위상차 현미경으로 세포형태를 관찰하였다. 또한 세포자연사를 확인하기 위해 세포자연사에서 보여지는 형태적, 생화학적 변화를 조사하였다. 실험결과 고농도 (800 μM, 1000 μM) 처리시 TM3세포의 경우 세포독성을 확인할 수 있었고 특히 TM4세포의 경우에는 TM3세포 경우보다 현저히 세포가 감소함을 확인할 수 있었으며 600 M 처리 시에도 세포독성이 나타났다. 저농도 (100 μM, 200 μM, 400 μM) 처리시 TM3세포와 TM4세포는 Control과 Vehicle Control (VC) 와 별다른 차이가 없었다. 시간별로는 24h보다 48h에서 더 강력한 세포독성을 확인할 수 있었다. 세포독성차이는 LDH assay보다 MTT assay가 더 민감도를 나타냈다. 세포형태학적 관찰로는 저농도 처리군들은 Control과 VC세포들과 별다른 차이가 없었으며 고농도 처리군들에서는 세포 내 액포가 많이 형성되었으며 고착세포 수도 농도 의존적으로 감소하였다. 세포자연사를 판정하기 위해 유세포분석기에 의한 TM3, TM4 세포의 세포주기를 분석한 결과, bisphenol A를 저농도 (100 μM) 로 처리하면 세포자연사의 지표가 되는 A_0기에 있는 세포들이 별다른 이상이 보이지 않으며 중농도 (700 μM, 500 μM) 로 처리했을 때 A_0기에 있는 세포들이 세포자연사에 의한 세포사가 일어남을 확인하였고 고농도 (1000 μM) 처리시 세포괴사에 의한 세포사가 일어남을 확인하였다. 한편 bisphenol A를 처리한 뒤 TM3, TM4세포로부터 DNA를 추출하여 전기영동을 실시한 결과, 대조군에서 보이지 않는 약한 DNA의 분절화현상이 bisphenol A의 중농도 (700 μM, 500 μM) 에서 유발됨을 알 수 있었다. Hematoxylin-eosin 염색을 실시한 결과, bisphenol A를 저농도 (1000 μM) 로 처리했을 경우 TM3, TM4세포 모두에서 대조군과 별차이가 없었으며 중농도 (700 μM, 500 μM) 로 처리한 TM3, TM4 세포에는 대부분의 세포들이 세포질과 더불어 핵이 응축된 세포의 특징을 나타내었으며 고농도 (1000 M) 처리시정상적인 세포는 찾아 볼 수가 없었으며 또한 Hoechst 33342 형광염색기법에 의해 세포자연사에서 특징적으로 보여지는 세포핵의 분절화현상을 bisphenol A의 중농도에서 관찰하였고 고농도 처리시에는 정상적인 세포를 찾아 볼 수 없었다. 이상의 결과로 보아 bisphenol A는 TM3, TM4 세포에서 세포독성을 나타내어 세포의 증식을 억제하고 고농도에서는 세포괴사를 일으키며 중농도에서는 세포자연사를 일으키는 것을 확인하였다.
Most of the endocrine disruptors cause decreased reproductive tracts, mutants, malformations, and cancers. As being extracted from daily life goods and plastic products, The bisphenol A functions like female hormone. Therefore, the object of this study is to know how the bisphenol A functioning as r...
Most of the endocrine disruptors cause decreased reproductive tracts, mutants, malformations, and cancers. As being extracted from daily life goods and plastic products, The bisphenol A functions like female hormone. Therefore, the object of this study is to know how the bisphenol A functioning as role of female hormone affects to TM3, Leydig cell line, and TM4 cell, Sertoli cell line, of mouse's testis. Bisphenol A has been measured by the methods of MTT assay, by treatment dose (100 μM, 200 μM, 400 μM, 600 μM, 800 μM, 1000 μM) and time period (24h, 48h) and LDH assay, being based on the amounts of LDH which is contributed on media by damage of cell membrane, and cell morphorogy has been observed by optics microscopic observation.. with the experiment, I could observe the cytotoxicity on TM3 cell during high dose (800 μM, 1000 μM) treatment, and there was obvious decrease in the numbers of TM4 cell than TM3 cell, then there was also cytotoxicity along with 600 μM treatment just as high dose (800 μM, 1000 μM) treatment. during the low dose (100 μM, 200 μM, 400 μM) treatment, there was no serious difference on both Control and Vehicle Control (VC) between TM3 cell and TM4 cell. yet, more severe cytotoxicity was acknowkedged when 48h rather than 24h. on the difference of cytotoxicity, MTT assay shows more sensitivity than LDH assay. according to the observation of cell morphology, there were no severe difference on Control and VC cell during low dose treatment, however their were more formulation of vacules and the numbers of attached cell had been decreased to dose dependent. first of all, if Bisphenol A did not show cytotoxicity on low dose, yet it revealed that Bisphenol A is a strong cytotoxic materials while high dose treatment, and simultaneously it affects seriously on TM4, sertoli cell line, rather than TM3, leydig cell line.
Most of the endocrine disruptors cause decreased reproductive tracts, mutants, malformations, and cancers. As being extracted from daily life goods and plastic products, The bisphenol A functions like female hormone. Therefore, the object of this study is to know how the bisphenol A functioning as role of female hormone affects to TM3, Leydig cell line, and TM4 cell, Sertoli cell line, of mouse's testis. Bisphenol A has been measured by the methods of MTT assay, by treatment dose (100 μM, 200 μM, 400 μM, 600 μM, 800 μM, 1000 μM) and time period (24h, 48h) and LDH assay, being based on the amounts of LDH which is contributed on media by damage of cell membrane, and cell morphorogy has been observed by optics microscopic observation.. with the experiment, I could observe the cytotoxicity on TM3 cell during high dose (800 μM, 1000 μM) treatment, and there was obvious decrease in the numbers of TM4 cell than TM3 cell, then there was also cytotoxicity along with 600 μM treatment just as high dose (800 μM, 1000 μM) treatment. during the low dose (100 μM, 200 μM, 400 μM) treatment, there was no serious difference on both Control and Vehicle Control (VC) between TM3 cell and TM4 cell. yet, more severe cytotoxicity was acknowkedged when 48h rather than 24h. on the difference of cytotoxicity, MTT assay shows more sensitivity than LDH assay. according to the observation of cell morphology, there were no severe difference on Control and VC cell during low dose treatment, however their were more formulation of vacules and the numbers of attached cell had been decreased to dose dependent. first of all, if Bisphenol A did not show cytotoxicity on low dose, yet it revealed that Bisphenol A is a strong cytotoxic materials while high dose treatment, and simultaneously it affects seriously on TM4, sertoli cell line, rather than TM3, leydig cell line.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.