[학위논문]한국인 환자들에 있어서 Ehrlichia chaffeensis와 Anaplasma phagocytophila에 대한 혈청학 및 분자생물학적 검출 Serologic and Molecular Detection of Ehrlichia chaffeensis and Anaplasma Phagocytophila원문보기
에를리키아 종은 사람과 동물에서 급성 열성질환을 일으키는 그람 음성의 리켓치아성 질병이다. 이 중 Anaplasma phagocytophila와 Ehrlichia chaffeensis는 각각 사람에서 human granulocytic ehrlichiosis(HGE)와 human monocytic ehirlichiosis(HME)를 일으킨다. 유럽과 미국의 여러지역, 그리고 아프리카와 아시아 지역에서도 에를리키아에 대한 연구가 보고된 바 있으나 한국에서는 아직 에를리키아에 대한 검출 보고가 없는 상태이다. A. phagocytophila와 E, chaffeensis의 검출을 위해 한국 사람 혈청 491개에 대해 간접면역형광항체법 (indirect immunofluorescent antibody test; IFA test), Western immunoblotting (...
에를리키아 종은 사람과 동물에서 급성 열성질환을 일으키는 그람 음성의 리켓치아성 질병이다. 이 중 Anaplasma phagocytophila와 Ehrlichia chaffeensis는 각각 사람에서 human granulocytic ehrlichiosis(HGE)와 human monocytic ehirlichiosis(HME)를 일으킨다. 유럽과 미국의 여러지역, 그리고 아프리카와 아시아 지역에서도 에를리키아에 대한 연구가 보고된 바 있으나 한국에서는 아직 에를리키아에 대한 검출 보고가 없는 상태이다. A. phagocytophila와 E, chaffeensis의 검출을 위해 한국 사람 혈청 491개에 대해 간접면역형광항체법 (indirect immunofluorescent antibody test; IFA test), Western immunoblotting (WB), 그리고 TaqMan real-time PCR을 실시하였다 이들 혈청은 전북보건환경연구원, 전남보건환경연구원 그리고 국립보건원에서 가을철 열성질환에 대한 혈청학적 진단에 사용 되었던 혈청으로 2000년 6월부터 11월까지 6개월동안 수집된 샘플이다. 491개의 사람 혈청 중 11개에서 양성반응을 보였으며, 그 중 A. Phagocytophila에 대해서는 9개 (1.8%), E. chafeensis에 대해서는 2개 (0.4%)의 혈청에서 양성반응을 보였다. IFA에서 양성반응을 보인 11개의 혈청에 대해 WB와 Taq Man real-time PCR을 실시하였다. WB를 실시한 결과, 2개의 혈청에서 28-kDa의 E. chaffensis 항원단백질에 양성반응을 보였고, 1개의 혈청에서 44-kDa의 A. phagocytophila항원단 백질에 양성반응을 보였다. 또한, 에를리키아 종과 아나플라즈마 종을 모두 검출할 수 있는 165 rRNA 유전자 primer를 이용하여 TaqMan real-time PCR을 실시한 결과 하나의 혈청 시료에서 DNA 단편이 증폭되었다. 본 연구는 한국에서의 A. Phagoctophila와 E. chaffeensis에 대한 최초의 혈청학 적 진단에 대한 보고이며, 이들의 분리 동정을 위해 더 많은 분자 생물학적 연구가 이루어져야 될 것으로 생각된다.
에를리키아 종은 사람과 동물에서 급성 열성질환을 일으키는 그람 음성의 리켓치아성 질병이다. 이 중 Anaplasma phagocytophila와 Ehrlichia chaffeensis는 각각 사람에서 human granulocytic ehrlichiosis(HGE)와 human monocytic ehirlichiosis(HME)를 일으킨다. 유럽과 미국의 여러지역, 그리고 아프리카와 아시아 지역에서도 에를리키아에 대한 연구가 보고된 바 있으나 한국에서는 아직 에를리키아에 대한 검출 보고가 없는 상태이다. A. phagocytophila와 E, chaffeensis의 검출을 위해 한국 사람 혈청 491개에 대해 간접면역형광항체법 (indirect immunofluorescent antibody test; IFA test), Western immunoblotting (WB), 그리고 TaqMan real-time PCR을 실시하였다 이들 혈청은 전북보건환경연구원, 전남보건환경연구원 그리고 국립보건원에서 가을철 열성질환에 대한 혈청학적 진단에 사용 되었던 혈청으로 2000년 6월부터 11월까지 6개월동안 수집된 샘플이다. 491개의 사람 혈청 중 11개에서 양성반응을 보였으며, 그 중 A. Phagocytophila에 대해서는 9개 (1.8%), E. chafeensis에 대해서는 2개 (0.4%)의 혈청에서 양성반응을 보였다. IFA에서 양성반응을 보인 11개의 혈청에 대해 WB와 Taq Man real-time PCR을 실시하였다. WB를 실시한 결과, 2개의 혈청에서 28-kDa의 E. chaffensis 항원단백질에 양성반응을 보였고, 1개의 혈청에서 44-kDa의 A. phagocytophila항원단 백질에 양성반응을 보였다. 또한, 에를리키아 종과 아나플라즈마 종을 모두 검출할 수 있는 165 rRNA 유전자 primer를 이용하여 TaqMan real-time PCR을 실시한 결과 하나의 혈청 시료에서 DNA 단편이 증폭되었다. 본 연구는 한국에서의 A. Phagoctophila와 E. chaffeensis에 대한 최초의 혈청학 적 진단에 대한 보고이며, 이들의 분리 동정을 위해 더 많은 분자 생물학적 연구가 이루어져야 될 것으로 생각된다.
Four hundred ninety one febrile human patient sera in Korea were tested by using IFA test, Western immunoblotting and TaqMan real-time PCR to detect Ehrlichia, A phagocytiphila and E. chaffeensis in Korea The sera were tested for other febrile disease, O. tsutsugamushi and leptospirosis. Total eleve...
Four hundred ninety one febrile human patient sera in Korea were tested by using IFA test, Western immunoblotting and TaqMan real-time PCR to detect Ehrlichia, A phagocytiphila and E. chaffeensis in Korea The sera were tested for other febrile disease, O. tsutsugamushi and leptospirosis. Total eleven sera of 491 samples were reactive to A phagocytophila andtibodies or E. chaffeensis They were titered from 80 to 2560. Western immunoblotting was performed to confirm the IFA results. One serum of 9 sera which were seropositive to A. phagocytophila antibodies was positive to 44-kDa A. phagocytophila antigen proteins and 2 sera which were reactive to E. chaffeensis antibodies were reactive to 28-kDa E. chaffeensis antigen proteins. DNAs were extracted from eleven sera which were seropositive to A. phagocytophila or. E. chaffeensis in IFA test. For eleven DNAs, TaqMan real-time PCR was performed by primers which targets Anaplasma and Ehrlichia species 16S rRNA and only one serum DNA was amplified, which was titerd 1:80 to A. phagocytophila antibodies. This is the first reports for detection of A. phagocytophila and E. chaffeensis in febrile Korean patients by using serologic and molecular tests.
Four hundred ninety one febrile human patient sera in Korea were tested by using IFA test, Western immunoblotting and TaqMan real-time PCR to detect Ehrlichia, A phagocytiphila and E. chaffeensis in Korea The sera were tested for other febrile disease, O. tsutsugamushi and leptospirosis. Total eleven sera of 491 samples were reactive to A phagocytophila andtibodies or E. chaffeensis They were titered from 80 to 2560. Western immunoblotting was performed to confirm the IFA results. One serum of 9 sera which were seropositive to A. phagocytophila antibodies was positive to 44-kDa A. phagocytophila antigen proteins and 2 sera which were reactive to E. chaffeensis antibodies were reactive to 28-kDa E. chaffeensis antigen proteins. DNAs were extracted from eleven sera which were seropositive to A. phagocytophila or. E. chaffeensis in IFA test. For eleven DNAs, TaqMan real-time PCR was performed by primers which targets Anaplasma and Ehrlichia species 16S rRNA and only one serum DNA was amplified, which was titerd 1:80 to A. phagocytophila antibodies. This is the first reports for detection of A. phagocytophila and E. chaffeensis in febrile Korean patients by using serologic and molecular tests.
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