분화가 억제된 간재생 실험모델에서 PGE1 투여 후 간줄기 세포의 변화 Morphologic evaluation of hepatic stem cells after injection of PGE1 in the acetylaminofluorene-treated regenerating rat liver원문보기
목적: 간세포 소실에 대한 반응으로 간이 재생되며, 휴지기에 있는 간세포가 정상적인 세포주기를 따라 증식하여 간재생이 완성되는 것으로 알려져 있다. 그러나, 어떠한 세포가 초기에 분화를 시작하며, 간의 어느 부위에서, 어떤 세포로 분화, 증식되어 간재생이 완성되는지에 되한 정확한 과정은 밝혀지지 않고 있다. 이러한 간재생에 대한 연구 중에서 간세포의 재생이 손상되었을 때 활발하게 증식하는 미분화 세포에 대한 실험들이 진행되고 있다. 2-acetylaminofluorene(AAF)와 함께 간절제술을 동반한 ...
목적: 간세포 소실에 대한 반응으로 간이 재생되며, 휴지기에 있는 간세포가 정상적인 세포주기를 따라 증식하여 간재생이 완성되는 것으로 알려져 있다. 그러나, 어떠한 세포가 초기에 분화를 시작하며, 간의 어느 부위에서, 어떤 세포로 분화, 증식되어 간재생이 완성되는지에 되한 정확한 과정은 밝혀지지 않고 있다. 이러한 간재생에 대한 연구 중에서 간세포의 재생이 손상되었을 때 활발하게 증식하는 미분화 세포에 대한 실험들이 진행되고 있다. 2-acetylaminofluorene(AAF)와 함께 간절제술을 동반한 실험모델이 간줄기 세포의 변화에 흔히 사용되고 있다. 이에, 저자는 AAF 투여와 간절제술을 동반한 간재생 억제 실험군에서 성숙한 간세포와 다른 줄기세포에서의 분화, 증식 과정을 관찰하고, 간세포의 손상 방지 및 간혈류 개선을 유도하는 prostaglandin E1을 투여하여 간재생에 관여하는 줄기세포의 변화를 관찰하고자 하였다. 방법: 몸무게 200-220g 의 수컷 Sprague-Dawley 백서를 이용하였다. 모든 시술은 ethyl ether 흡입 마취 하에 시행하였으며, 앙와위 자세에서 좌측 상복부에 절개를 가하여 위 내에 23 gauge 나비 바늘을 이용하여 도관을 설치하였다. 분화를 억제시킨 간재생 실험 모델군은 위도관을 통해 1% carboxymethyl cellulose에 희석하여 용액 1ml 당 2-acetylaminofluorene(AAF)가 1.5mg 되도록 하여 10mg/kg 을 연속 4일 동안 주입하였다. 5일째 되는 날 70% 간절제술을 시행하였으며, 이 후 연속 5일 동안 다시 AAF 10mg/kg을 주입하였다. PGE1 투여군은 분화를 억제시킨 간재생 실험 모델군과 동일하게, 위도관을 설치하여 연속 4일동안 AAF 10mg/kg을 주입하였으며 5일째 되는 날 70% 간절제술을 시행하였다. 이 후 연속 5일 동안 응경정맥을 통해 PGE1을 30㎍/kg 주입하였다. 양군 모두에서 마지막 투약 후 1일, 3일, 5일, 7일, 9일, 14일째 되는 날, 동물을 희생시키기 1시간 전 복강내로 BrDU 100mg/kg 를 주입하였으며, 1시간 뒤 개복하여 문맥을 통해 생리 식염수 10cc 로 관류한 후 간조직을 얻었다. 결과: 간절제술 후 시기별 재생에 따른 간 우측엽 무게의 변화는 AAF를 투여한 군과 비교하여 PGE1을 투여한 군에서 더 많은 무게 변화를 보였다. AAF를 투여한 군에서는 BrDU 섭취 세포는 문맥 주위 지역인 zone 1에서 시술 후 1일째 5-63개, 3일째 37-82개, 5일째 20-93개, 7일째 22-65개, zone 2에서는 BrDU 섭취세포는 거의 관찰되지 않았으며, zone 3에서 3일째 2-14개, 5일째 5-24개, 7일째 6-20개, 9일째 12-32개, 14일째 3-7개 관찰되었다. 난원세포(oval cell)는 AAF를 투여한 군에서 시술 후 9일째까지 고도로 증식이 활발하게 이루어 지며 14일째 거의 보이지 않았다. PGE1 투여군에서는 난원세포가 시술 후 5일까지 중등도의 증식이 보이다가 차츰 감소되면서 small hepatocytes 들로 대체되는 양상으로 보였다. Small hepatocytes는 성숙 간세포와는 구별되며 AAF를 투여한 군에서는 small hepatocytes는 시술 후 5일째까지 거의 발견되지 않았고, 9일째 경도로 나타났다가 14일째 관찰되지 않았다. PGE1을 투여한 군은 3일째부터 경도로 small hepatocytes가 보이기 시작하면서 5, 7일째는 고도로 증식, 9일째 감소하였다. 결론: AAF를 투여한 군에서는 AAF 로 인해 성숙 간세포의 분열이 억제된 상태에서 줄기세포로 여겨지는 난원세포가 주로 증식하여 간재생이 이루어졌다. PGE1 투여군에서는 초기에는 난원세포가 증식하기는 하나 난원세포를 통한 small hepatocytes들로의 분화를 유도함으로 간재생이 더 활발하게 이루어 지는 것으로 생각된다.
목적: 간세포 소실에 대한 반응으로 간이 재생되며, 휴지기에 있는 간세포가 정상적인 세포주기를 따라 증식하여 간재생이 완성되는 것으로 알려져 있다. 그러나, 어떠한 세포가 초기에 분화를 시작하며, 간의 어느 부위에서, 어떤 세포로 분화, 증식되어 간재생이 완성되는지에 되한 정확한 과정은 밝혀지지 않고 있다. 이러한 간재생에 대한 연구 중에서 간세포의 재생이 손상되었을 때 활발하게 증식하는 미분화 세포에 대한 실험들이 진행되고 있다. 2-acetylaminofluorene(AAF)와 함께 간절제술을 동반한 실험모델이 간줄기 세포의 변화에 흔히 사용되고 있다. 이에, 저자는 AAF 투여와 간절제술을 동반한 간재생 억제 실험군에서 성숙한 간세포와 다른 줄기세포에서의 분화, 증식 과정을 관찰하고, 간세포의 손상 방지 및 간혈류 개선을 유도하는 prostaglandin E1을 투여하여 간재생에 관여하는 줄기세포의 변화를 관찰하고자 하였다. 방법: 몸무게 200-220g 의 수컷 Sprague-Dawley 백서를 이용하였다. 모든 시술은 ethyl ether 흡입 마취 하에 시행하였으며, 앙와위 자세에서 좌측 상복부에 절개를 가하여 위 내에 23 gauge 나비 바늘을 이용하여 도관을 설치하였다. 분화를 억제시킨 간재생 실험 모델군은 위도관을 통해 1% carboxymethyl cellulose에 희석하여 용액 1ml 당 2-acetylaminofluorene(AAF)가 1.5mg 되도록 하여 10mg/kg 을 연속 4일 동안 주입하였다. 5일째 되는 날 70% 간절제술을 시행하였으며, 이 후 연속 5일 동안 다시 AAF 10mg/kg을 주입하였다. PGE1 투여군은 분화를 억제시킨 간재생 실험 모델군과 동일하게, 위도관을 설치하여 연속 4일동안 AAF 10mg/kg을 주입하였으며 5일째 되는 날 70% 간절제술을 시행하였다. 이 후 연속 5일 동안 응경정맥을 통해 PGE1을 30㎍/kg 주입하였다. 양군 모두에서 마지막 투약 후 1일, 3일, 5일, 7일, 9일, 14일째 되는 날, 동물을 희생시키기 1시간 전 복강내로 BrDU 100mg/kg 를 주입하였으며, 1시간 뒤 개복하여 문맥을 통해 생리 식염수 10cc 로 관류한 후 간조직을 얻었다. 결과: 간절제술 후 시기별 재생에 따른 간 우측엽 무게의 변화는 AAF를 투여한 군과 비교하여 PGE1을 투여한 군에서 더 많은 무게 변화를 보였다. AAF를 투여한 군에서는 BrDU 섭취 세포는 문맥 주위 지역인 zone 1에서 시술 후 1일째 5-63개, 3일째 37-82개, 5일째 20-93개, 7일째 22-65개, zone 2에서는 BrDU 섭취세포는 거의 관찰되지 않았으며, zone 3에서 3일째 2-14개, 5일째 5-24개, 7일째 6-20개, 9일째 12-32개, 14일째 3-7개 관찰되었다. 난원세포(oval cell)는 AAF를 투여한 군에서 시술 후 9일째까지 고도로 증식이 활발하게 이루어 지며 14일째 거의 보이지 않았다. PGE1 투여군에서는 난원세포가 시술 후 5일까지 중등도의 증식이 보이다가 차츰 감소되면서 small hepatocytes 들로 대체되는 양상으로 보였다. Small hepatocytes는 성숙 간세포와는 구별되며 AAF를 투여한 군에서는 small hepatocytes는 시술 후 5일째까지 거의 발견되지 않았고, 9일째 경도로 나타났다가 14일째 관찰되지 않았다. PGE1을 투여한 군은 3일째부터 경도로 small hepatocytes가 보이기 시작하면서 5, 7일째는 고도로 증식, 9일째 감소하였다. 결론: AAF를 투여한 군에서는 AAF 로 인해 성숙 간세포의 분열이 억제된 상태에서 줄기세포로 여겨지는 난원세포가 주로 증식하여 간재생이 이루어졌다. PGE1 투여군에서는 초기에는 난원세포가 증식하기는 하나 난원세포를 통한 small hepatocytes들로의 분화를 유도함으로 간재생이 더 활발하게 이루어 지는 것으로 생각된다.
Background: When hepatocyte regeneration is impaired, facultative stem cells and their descendants, also called oval cells, become activated and produce cell progeny that eventually differentiate. We have analyzed the histological changes in rat liver after 2-acetylaminofluorene(AAF) and PGE1 admini...
Background: When hepatocyte regeneration is impaired, facultative stem cells and their descendants, also called oval cells, become activated and produce cell progeny that eventually differentiate. We have analyzed the histological changes in rat liver after 2-acetylaminofluorene(AAF) and PGE1 administration following 70% partial hepatectomy(PH). Method: Male Sprague-Dawley rats weighing 200-220g were used. For induction of oval cells, the rats were treated according to the method for the AAF/PH model. Briefly AAF was dissolved in a small volume of dimethylsulfoxide , and suspended in 1% carboxymethylcellulose at a concentration of 1.5mg/ml. Rats were daily administered AAF by gavage at a dosage of 10mg/kg body weight for 4 days and underwent a standard 70% partial hepatectomy(PH) on day 5. Starting from the day after PH, the rats were daily administered AAF at the same dosage for 5 days on the impaired regeneration model group. On the PGE1 group, starting from the day after PH, the rats were daily administered PGE1 intravenously 30㎍/kg for 5days. They were killed on days 1, 3, 5, 7, 9, and 14 after the last drug administration on both groups. Results: The BrDU-positive epithelial cells had extensively infiltrated in the periportal areas on days 1, 3, 5, 7 in AAF-treated group. In PGE1 group, BrDU-positive cells were located diffusely in liver parenchyme on days 1, 3, 5, 7. After the last AAF-treated day, on days, small basophilic cells with a high nuclear:cytoplasmic ratio(oval cells) were evident in and aloud the portal tracts. These cells became more numerous with time and by day 9. Although in PGE1 group, oval cells were located in periportal area on days 1, 3, 5 after the last PGE1 administration, with time small hepatocytes were maily infiItrated the liver parenchyme. Conclusion: In the early stages of proliferatively impaired regeneration model, oval cells were mainly proliferated and capable of producing pluripotential progenitor cells. When PGE1 were administered, small heptocytes were mostly proliferated with time.
Background: When hepatocyte regeneration is impaired, facultative stem cells and their descendants, also called oval cells, become activated and produce cell progeny that eventually differentiate. We have analyzed the histological changes in rat liver after 2-acetylaminofluorene(AAF) and PGE1 administration following 70% partial hepatectomy(PH). Method: Male Sprague-Dawley rats weighing 200-220g were used. For induction of oval cells, the rats were treated according to the method for the AAF/PH model. Briefly AAF was dissolved in a small volume of dimethylsulfoxide , and suspended in 1% carboxymethylcellulose at a concentration of 1.5mg/ml. Rats were daily administered AAF by gavage at a dosage of 10mg/kg body weight for 4 days and underwent a standard 70% partial hepatectomy(PH) on day 5. Starting from the day after PH, the rats were daily administered AAF at the same dosage for 5 days on the impaired regeneration model group. On the PGE1 group, starting from the day after PH, the rats were daily administered PGE1 intravenously 30㎍/kg for 5days. They were killed on days 1, 3, 5, 7, 9, and 14 after the last drug administration on both groups. Results: The BrDU-positive epithelial cells had extensively infiltrated in the periportal areas on days 1, 3, 5, 7 in AAF-treated group. In PGE1 group, BrDU-positive cells were located diffusely in liver parenchyme on days 1, 3, 5, 7. After the last AAF-treated day, on days, small basophilic cells with a high nuclear:cytoplasmic ratio(oval cells) were evident in and aloud the portal tracts. These cells became more numerous with time and by day 9. Although in PGE1 group, oval cells were located in periportal area on days 1, 3, 5 after the last PGE1 administration, with time small hepatocytes were maily infiItrated the liver parenchyme. Conclusion: In the early stages of proliferatively impaired regeneration model, oval cells were mainly proliferated and capable of producing pluripotential progenitor cells. When PGE1 were administered, small heptocytes were mostly proliferated with time.
주제어
#간 절제술[肝切除術] 간재생 실험모델 PGE1 간절제술 간줄기세포 MORPHOLOGIC EVALUATION HEPATIC STEM CELL INJECTION ACETYLAMINOFLUORENETREATED REGENERATING RAT LIVER 의학 외과학
학위논문 정보
저자
이상호
학위수여기관
고신대학교
학위구분
국내박사
학과
의학과 외과학전공
발행연도
2003
총페이지
iv, 20장
키워드
간 절제술[肝切除術] 간재생 실험모델 PGE1 간절제술 간줄기세포 MORPHOLOGIC EVALUATION HEPATIC STEM CELL INJECTION ACETYLAMINOFLUORENETREATED REGENERATING RAT LIVER 의학 외과학
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