Telomere는 진핵세포의 염색체 말단의 필수적이고 기능적인 구성요소이다. 이는 염색체의 분해나 말단끼리의 접합으로부터 보호해주는 역할을 하며, 말단의 복제를 완성시켜준다. Telomerase는 catalytic subunit인 hTERT와 human telomerase RNA로 구성되어 있는 ribonucleoprotein이다. 이 효소의 reverse transcriptase 활성에 의해서 염색체 말단에 짧고 반복적인 telomeric sequence를 붙여줘서 telomere 길이를 안정화시킨다. 대부분의 불멸화 세포와 많은 종류의 암세포에서는 telomerase 활성을 가지고 있으나, 대부분의 정상적인 인간 체세포는 가지고 있지 않다. Telomerase를 억제시키면 telomere 길이가 짧아져서, senescence 혹은 ...
Telomere는 진핵세포의 염색체 말단의 필수적이고 기능적인 구성요소이다. 이는 염색체의 분해나 말단끼리의 접합으로부터 보호해주는 역할을 하며, 말단의 복제를 완성시켜준다. Telomerase는 catalytic subunit인 hTERT와 human telomerase RNA로 구성되어 있는 ribonucleoprotein이다. 이 효소의 reverse transcriptase 활성에 의해서 염색체 말단에 짧고 반복적인 telomeric sequence를 붙여줘서 telomere 길이를 안정화시킨다. 대부분의 불멸화 세포와 많은 종류의 암세포에서는 telomerase 활성을 가지고 있으나, 대부분의 정상적인 인간 체세포는 가지고 있지 않다. Telomerase를 억제시키면 telomere 길이가 짧아져서, senescence 혹은 세포 사멸에 따른 암세포의 성장을 억제할 것이다. 본 연구에서는 telomere dysfunction을 유도하기 위해 telomerase 억제제인 DPNS (3-(3,5,-dichlorophenoxy)-nitrostyrene)를 이용하였다. Telomerase 활성을 가지고 있는 fibrosarcoma HT1080 세포주에 3 μM의 DPNS를 150일 넘게 처리하면서 약 30일 간격으로 telomere 길이가 서서히 줄어가는 것을 확인했다. 또한, 같은 지점에서 세포 주기 분포를 측정하여 G2/M arrest로 진행되는 것을 알 수 있었다. 또한, 전형적인 senescence morphology를 관찰하였으며, SA-β-galactosidase assay를 통해서 senescence가 유도되는 것을 확인하였다. Western blot을 통하여 p53과 p21, p27의 단백질 발현이 증가하였다. 따라서, 암세포에서 DPNS에 의한 senescence가 유도되는 경로는 p53과 p21을 통해서 진행된다는 것을 밝혔다.
Telomere는 진핵세포의 염색체 말단의 필수적이고 기능적인 구성요소이다. 이는 염색체의 분해나 말단끼리의 접합으로부터 보호해주는 역할을 하며, 말단의 복제를 완성시켜준다. Telomerase는 catalytic subunit인 hTERT와 human telomerase RNA로 구성되어 있는 ribonucleoprotein이다. 이 효소의 reverse transcriptase 활성에 의해서 염색체 말단에 짧고 반복적인 telomeric sequence를 붙여줘서 telomere 길이를 안정화시킨다. 대부분의 불멸화 세포와 많은 종류의 암세포에서는 telomerase 활성을 가지고 있으나, 대부분의 정상적인 인간 체세포는 가지고 있지 않다. Telomerase를 억제시키면 telomere 길이가 짧아져서, senescence 혹은 세포 사멸에 따른 암세포의 성장을 억제할 것이다. 본 연구에서는 telomere dysfunction을 유도하기 위해 telomerase 억제제인 DPNS (3-(3,5,-dichlorophenoxy)-nitrostyrene)를 이용하였다. Telomerase 활성을 가지고 있는 fibrosarcoma HT1080 세포주에 3 μM의 DPNS를 150일 넘게 처리하면서 약 30일 간격으로 telomere 길이가 서서히 줄어가는 것을 확인했다. 또한, 같은 지점에서 세포 주기 분포를 측정하여 G2/M arrest로 진행되는 것을 알 수 있었다. 또한, 전형적인 senescence morphology를 관찰하였으며, SA-β-galactosidase assay를 통해서 senescence가 유도되는 것을 확인하였다. Western blot을 통하여 p53과 p21, p27의 단백질 발현이 증가하였다. 따라서, 암세포에서 DPNS에 의한 senescence가 유도되는 경로는 p53과 p21을 통해서 진행된다는 것을 밝혔다.
Telomere maintenance is essential for the continued proliferation of dividing cells and is implicated in chromosome stability and cell immortalization. Telomerase activity allows cells to maintain their telomeric DNA and contribute to the indefinite replicative capacity of cancer cells. Telomerase a...
Telomere maintenance is essential for the continued proliferation of dividing cells and is implicated in chromosome stability and cell immortalization. Telomerase activity allows cells to maintain their telomeric DNA and contribute to the indefinite replicative capacity of cancer cells. Telomerase activity is expressed in most type of cancer cells but not in normal somatic cells, suggesting that telomerase may be an important target for cancer chemotherapy. Inhibition of telomerase results in telomere erosion, leading to the subsequent growth arrest of cancer cells followed by senescence or cell death. In this study, extensive propagation of cancer cell line in the presence of DPNS (3-(3,5,-dichlorophenoxy)-nitrostyrene) resulted in progressive telomere erosion followed by the induction of senescence phenotype. Flow cytometric analysis showed that DPNS-treated HT1080 cells were in growth arrest of G2/M phase. To investigate a relation between telomere dysfunction and activation of senescence-signaling pathway which is associated with DNA damage, western blot analysis were performed in DPNS-treated HT1080 cells. Progressive telomere shortening induced by DPNS triggered up-regulation of p53, p21, p27 protein expression and down-regulation of cyclin B protein expression. Therefore, the G2/M arrest observed upon telomerase inhibition may be mediated by p53-dependent pathways.
Telomere maintenance is essential for the continued proliferation of dividing cells and is implicated in chromosome stability and cell immortalization. Telomerase activity allows cells to maintain their telomeric DNA and contribute to the indefinite replicative capacity of cancer cells. Telomerase activity is expressed in most type of cancer cells but not in normal somatic cells, suggesting that telomerase may be an important target for cancer chemotherapy. Inhibition of telomerase results in telomere erosion, leading to the subsequent growth arrest of cancer cells followed by senescence or cell death. In this study, extensive propagation of cancer cell line in the presence of DPNS (3-(3,5,-dichlorophenoxy)-nitrostyrene) resulted in progressive telomere erosion followed by the induction of senescence phenotype. Flow cytometric analysis showed that DPNS-treated HT1080 cells were in growth arrest of G2/M phase. To investigate a relation between telomere dysfunction and activation of senescence-signaling pathway which is associated with DNA damage, western blot analysis were performed in DPNS-treated HT1080 cells. Progressive telomere shortening induced by DPNS triggered up-regulation of p53, p21, p27 protein expression and down-regulation of cyclin B protein expression. Therefore, the G2/M arrest observed upon telomerase inhibition may be mediated by p53-dependent pathways.
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