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알부틴 (hydroquinone - D - glucopyranside, AR)은 녹색식물 중에서 처음 밝혀진 물질이다.
알부틴은 효율이 높고 안정한 피부 미백 성분이다.
또 알부틴은 독성, 부작용, 자극성이 없으므로 화장품 원료로 많이 사용 하고 있다.
피부 미백 면에서 보면, 약물이 피부 안에 많이 존재하여야 효과가 많이 나타날 수 있는데, 문제점은 알부틴 자체의 수용성이 커서 피부투과도와 sikn ...

알부틴 (hydroquinone - D - glucopyranside, AR)은 녹색식물 중에서 처음 밝혀진 물질이다.
알부틴은 효율이 높고 안정한 피부 미백 성분이다.
또 알부틴은 독성, 부작용, 자극성이 없으므로 화장품 원료로 많이 사용 하고 있다.
피부 미백 면에서 보면, 약물이 피부 안에 많이 존재하여야 효과가 많이 나타날 수 있는데, 문제점은 알부틴 자체의 수용성이 커서 피부투과도와 sikn deposition 양이 작다는 것이다.
그래서 본 실험 중에서 알부틴을 리포솜으로 만들어 skin deposition을 증가시켜서 미백활성을 증가하려고 하였다.
그리고 여러 가지 리포솜 처방에 대해서 약물, lipid양의 변화가 봉입율, 피부투과, skin deposition 결과에 어떤 영향을 주는지 관찰하였다.
리포솜 제조 방법은 문헌에 따라 하였다.
알부틴과 lipid를 다양한 양을 위하여 chloroform에 녹인 후 round bottom flask에 옮겨 chloroform를 제거하였다.
형성된 lipid막을 질소로 1분 정도 날린 후 PBS로 만든 알부틴 용액을 넣어서 충분히 돌려주고 sonication을 15초 정도하였다.
Sonication한 후 extruder를 이용해서 membrane filter를 3㎛부터 0.2㎛까지 차례로 통과 시켰다.
리포솜의 크기 와 형상을 보기위해 particle size 와 scanning electron microscopy를 관찰하였다.
Particle size는 리포솜을 적당히 희석해서 submicron particle sizer를 이용해서 측정하였다.
리포솜 크기는 대부분 200nm에서 집중되었다.
리포솜의 봉입율을 측정하기 위해 gel-filtration을 이용하여 리포솜을 free 알부틴에서 분리를 하였다.
5분 동안 받은 sample을 UV-detector를 이용해서 흡광도를 측정했다.
흡광도가 시간에 따라서 두개의 peak가 나타났다.
두 부분의 sample를 각각 모아서 희석하고 HPLC로 약물농도를 측정하여 봉입율을 계산하였다.
봉입율은 봉입된 알부틴과 전체 알부틴의 비율로 표시하였다.
약물과 lipid 양을 바꾸어 총 9가지 리포솜을 제조하였다.
리포솜내 봉입율은 lipid 농도의 증가에 따라서 증가하였으나, 알부틴 농도의 증가에는 영향을 받지 않았다.
피부투과 실험과 피부 deposition 실험을 위해 알부틴의 피부 homogenate 중의 안정성 연구를 진행한 결과, 알부틴이 피부 homogenate 중에서 안정하였다.
피부투과 실험은 hairless mouse의 동쪽 피부를 취해서 Keshary - Chien diffusion cells을 사용하여 진행하였다.
Sampling을 시간 별로 취해서 HPLC를 이용해서 투과 된 약물농도를 측정 하였다.
알부틴의 피부 투과도가 solution보다 리포솜이 더 낮았다는 결과를 나타났다.
피부 deposition실험은 투과 실험과 같은 장치를 이용해 4 시간 과 8 시간 후 피부를 제거하여 증류수로 5번 정도 washing 하였다.
각질층을 제거 하고 남은 피부 전체를 2 ml PBS 중에서 homogenate를 시켰다.
그리고 원심분리 또는 filter를 한 후 상층액을 HPLC로 분석하여 약물농도를 계산하였다.
알부틴을 용액상태로 사용하였을 때 보다 리포솜에 봉입한 경우 피부에 남아 있는 양이 증가함을 알 수 있었다.
이상 실험결과를 통해 알부틴을 리포솜으로 만들어서 피부에 적용한 경우 미백 효과를 증가 시킬 수 있을 것으로 예상되었다.

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