한국산 겨우살이(Viscum album loranthacea)에서 viscotoxin을 정제하여 암세포에 미치는 독성효과를 조사하였다. 정제에 먼저 strong cation exchanger chromatogrphy인 Fractogel(EMD SO_(3)^(-)650(M))를 사용하고 그 다음과정인 RP-HPLC를 사용하였다. 정제한 viscotoxin은 Tricine SDS-PAGE상에 약 5kD 부근에서 band가 확인되었다. 분리한 viscotoxin 중 하나를 아미노산 서열 분석결과 A2와 유사한 것으로 밝혀졌고, 이 viscotoxin 분자량은 4971.02Da, 또 하나의 분자량은 4970.60Da임이 밝혀졌다. 이는 전기영동상의 분자량과 ...
한국산 겨우살이(Viscum album loranthacea)에서 viscotoxin을 정제하여 암세포에 미치는 독성효과를 조사하였다. 정제에 먼저 strong cation exchanger chromatogrphy인 Fractogel(EMD SO_(3)^(-)650(M))를 사용하고 그 다음과정인 RP-HPLC를 사용하였다. 정제한 viscotoxin은 Tricine SDS-PAGE상에 약 5kD 부근에서 band가 확인되었다. 분리한 viscotoxin 중 하나를 아미노산 서열 분석결과 A2와 유사한 것으로 밝혀졌고, 이 viscotoxin 분자량은 4971.02Da, 또 하나의 분자량은 4970.60Da임이 밝혀졌다. 이는 전기영동상의 분자량과 질량 분석을 통한 분자량이 매우 유사하게 나타나는 것으로 보아 지금까지 알려진 viscotoxin의 6종류에 포함되는 펩타이드로 사료된다. Hemagultination assay를 통해 viscotoxin의 활성을 측정하였고, 혈액중 B형은 매우 높은 활성을 타나내었다. 그 결과 활성을 가진 viscotoxin을 선별하여 cytotoxic effect을 측정하였다. 선행연구에 의하면 암세포에 미치는 cytotoxic effect는 천연물 중 viscotoxin이 그 어떤 성분보다 강하게 나타나고 있다. 세포주는 colon 26-M3.1 lung carcinoma, B16-BL6 melanoma, YCA-1 lymphoma로 MTT assay를 사용하여 측정하였다. 그 결과 3세포주 모두에서 세포독성이 매우 강하게 나타나는 것으로 밝혀졌고, 그중 YAC-1 cell에서 가장 큰 세포독성을 관찰 할 수 있었다. YAC-1 cell은 10㎍/㎖, 3.3㎍/㎖그리고 1.11㎍/㎖의 농도에서 암세포에 강한 독성을 보였다. 정상세포에 대해서는 5㎍/㎖ 이상의 농도에서 독성효과가 있음을 보였다.
한국산 겨우살이(Viscum album loranthacea)에서 viscotoxin을 정제하여 암세포에 미치는 독성효과를 조사하였다. 정제에 먼저 strong cation exchanger chromatogrphy인 Fractogel(EMD SO_(3)^(-)650(M))를 사용하고 그 다음과정인 RP-HPLC를 사용하였다. 정제한 viscotoxin은 Tricine SDS-PAGE상에 약 5kD 부근에서 band가 확인되었다. 분리한 viscotoxin 중 하나를 아미노산 서열 분석결과 A2와 유사한 것으로 밝혀졌고, 이 viscotoxin 분자량은 4971.02Da, 또 하나의 분자량은 4970.60Da임이 밝혀졌다. 이는 전기영동상의 분자량과 질량 분석을 통한 분자량이 매우 유사하게 나타나는 것으로 보아 지금까지 알려진 viscotoxin의 6종류에 포함되는 펩타이드로 사료된다. Hemagultination assay를 통해 viscotoxin의 활성을 측정하였고, 혈액중 B형은 매우 높은 활성을 타나내었다. 그 결과 활성을 가진 viscotoxin을 선별하여 cytotoxic effect을 측정하였다. 선행연구에 의하면 암세포에 미치는 cytotoxic effect는 천연물 중 viscotoxin이 그 어떤 성분보다 강하게 나타나고 있다. 세포주는 colon 26-M3.1 lung carcinoma, B16-BL6 melanoma, YCA-1 lymphoma로 MTT assay를 사용하여 측정하였다. 그 결과 3세포주 모두에서 세포독성이 매우 강하게 나타나는 것으로 밝혀졌고, 그중 YAC-1 cell에서 가장 큰 세포독성을 관찰 할 수 있었다. YAC-1 cell은 10㎍/㎖, 3.3㎍/㎖그리고 1.11㎍/㎖의 농도에서 암세포에 강한 독성을 보였다. 정상세포에 대해서는 5㎍/㎖ 이상의 농도에서 독성효과가 있음을 보였다.
Viscotoxin was isolated from Korean Mistletoe (Viscum album coloratum) and its cytotoxic effects on cancer cell lines were studied in this report. For the purification of the protein, firstly, a strong cation exchanger chromatography fractogel (EMD SO_(3)^(-) 650, M) was used. Secondly, RP-HPLC was ...
Viscotoxin was isolated from Korean Mistletoe (Viscum album coloratum) and its cytotoxic effects on cancer cell lines were studied in this report. For the purification of the protein, firstly, a strong cation exchanger chromatography fractogel (EMD SO_(3)^(-) 650, M) was used. Secondly, RP-HPLC was used. The viscotoxin band was shown at 5 kDa from a Tricine SDS-PAGE. The amino acid sequence from one of the viscotoxins isolated was similar to that of A2. The one viscotoxin was mass 4791.02 Da. The another was mass 4970.60 Da. The similarity of the results from an estimation of molecular weight by gel electrophoresis and mass spectroscopy suggested that the isolated proteins were one of six viscotoxins previously reported. The activity of viscotoxin by hemagultination assay showed that the blood type B was the highest. Among the samples with high activities, the cytotoxic effects were examined. Previous report showed that the viscotoxin displayed the highest cytotoxic effects on cancer cell lines among natural products. The cell line used were colon 26-M3.1 lung carcinoma, B16-BL6 melanoma, and YCA-1 lymphoma, and all assayed by MTT methods. The high toxic effects of the toxin on 3 cell lines were observed and the highest was YCA-1 cell line. From YCA-1 cell lines, the cultures at the concentrations of 1.11㎍/㎖, 3.3㎍/㎖ and 10㎍/㎖ showed high cytotoxic effects. The cytotoxic effects from normal cell lines was over 5㎍/㎖.
Viscotoxin was isolated from Korean Mistletoe (Viscum album coloratum) and its cytotoxic effects on cancer cell lines were studied in this report. For the purification of the protein, firstly, a strong cation exchanger chromatography fractogel (EMD SO_(3)^(-) 650, M) was used. Secondly, RP-HPLC was used. The viscotoxin band was shown at 5 kDa from a Tricine SDS-PAGE. The amino acid sequence from one of the viscotoxins isolated was similar to that of A2. The one viscotoxin was mass 4791.02 Da. The another was mass 4970.60 Da. The similarity of the results from an estimation of molecular weight by gel electrophoresis and mass spectroscopy suggested that the isolated proteins were one of six viscotoxins previously reported. The activity of viscotoxin by hemagultination assay showed that the blood type B was the highest. Among the samples with high activities, the cytotoxic effects were examined. Previous report showed that the viscotoxin displayed the highest cytotoxic effects on cancer cell lines among natural products. The cell line used were colon 26-M3.1 lung carcinoma, B16-BL6 melanoma, and YCA-1 lymphoma, and all assayed by MTT methods. The high toxic effects of the toxin on 3 cell lines were observed and the highest was YCA-1 cell line. From YCA-1 cell lines, the cultures at the concentrations of 1.11㎍/㎖, 3.3㎍/㎖ and 10㎍/㎖ showed high cytotoxic effects. The cytotoxic effects from normal cell lines was over 5㎍/㎖.
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