격리재배 수입 화훼구근류의 주요 바이러스 조사 및 TOBACCO RATTLE VIRUS 분리·동정 Major Viruses from Imported Flower Bulbs in Post-Entry Quarantine Fields, and Isolation and Identification of Tobacco Rattle Virus원문보기
요 약 2003년 8월부터 12월까지 한국 국가격리재배포장인 중부격리재배 관리소에서 재배된 화훼구근류 12종에 대해 격리재배기간 동안 바이러스 감염여부를 ELISA로 조사한 결과, 백합에서 LSV, ArMV, 칼라에서 TSWV, TRV, 수선에서 ArMV, SLRSV, TRV, 프리지어에서 FMV, 글라디올러스, 크로커스, 무스카리에서 TRV가 각각 검출되었다. 이들 중 검역적으로 중요한 위치를 차지하고 있는 관리급 규제바이러스는 ArMV, TRV, SLRSV였다. 각 바이러스의 ...
요 약 2003년 8월부터 12월까지 한국 국가격리재배포장인 중부격리재배 관리소에서 재배된 화훼구근류 12종에 대해 격리재배기간 동안 바이러스 감염여부를 ELISA로 조사한 결과, 백합에서 LSV, ArMV, 칼라에서 TSWV, TRV, 수선에서 ArMV, SLRSV, TRV, 프리지어에서 FMV, 글라디올러스, 크로커스, 무스카리에서 TRV가 각각 검출되었다. 이들 중 검역적으로 중요한 위치를 차지하고 있는 관리급 규제바이러스는 ArMV, TRV, SLRSV였다. 각 바이러스의 검출률은 프리지아에서 FMV가 7.7%. 크로 커스에서 TRV가 3%, 글라디올러스와 무스카리에서는 TRV가 각각 1%, 수선 에서는 ArMV와 SLRSV의 복합감염이 0.1%, TRV의 감염이 0.9%로 조사되었으며, 칼라에서는 TSWV가 0.4%, TRV가 0.3% 검출되었다. 격리재배 검사과정의 수선으로부터 단일병반 분리를 통해 TRV(N158-96)를 순수분리하였으며 이에 대해 지표식물검정, 전자현미경 검경, 혈청학적 검정특성을 조사하였으며 정밀검정 기반을 조성하기위해 PCR 검정을 실시하고 증폭된 DNA 산물에 대해 염기서열을 분석하였다. N158-96 분리주는 Nicotiana occidentalis를 포함한 20여종의 지표식물에 접종하여 생물검정을 실시한 결과, N. occidentalis, N tabacum''''Xanthi NC'''', ''''N. tabacum ''''Samsun NN'''', N. tabacum ''''White burley'''', Tetragonia expansa에 전신감염, Chenopodium quinoa, C. amaranticolor, N. clevelandii, N. glutinosa에 국부감염하였으며, Phaseolus vulgaris를 포함한 11종의 지표식물에서는 병징이 발현되지 않았다. DN법을 이용하여 전자현미경으로 관찰한 결과, 입자는 40nm부터 710nm 사이에 분포하고 있음이 조사되었으며 주로 관찰되는 입자는 50-190nm와 260-290nm였다. TRV에 대한 PCR 검정에서 Robinson의 프라이머 한 쌍을 이용하여 RT-PCR을 실시한 결과, 감염잎으로부터 463bp의 증폭산물이 확인되었으며, 염기서열 분석한 결과 270개의 염기가 결정되었다. 결정된 염기를 기존 염기서열이 알려져 있는 4계통과 비교한 결과 TRV TCM 계통과 가장 상동성이 높은 것으로 나타났다. 아미노산 서열 비교 역시 TCM 계통과 아미노산 한 두개의 차이만 나타났다. 따라서 수입 수선에서 분리된 N158-96 분리주는 네델란드에서 기보고된 튤립 분리주와 동일계통인 TRV TCM 계통으로 추정되었다.
요 약 2003년 8월부터 12월까지 한국 국가격리재배포장인 중부격리재배 관리소에서 재배된 화훼구근류 12종에 대해 격리재배기간 동안 바이러스 감염여부를 ELISA로 조사한 결과, 백합에서 LSV, ArMV, 칼라에서 TSWV, TRV, 수선에서 ArMV, SLRSV, TRV, 프리지어에서 FMV, 글라디올러스, 크로커스, 무스카리에서 TRV가 각각 검출되었다. 이들 중 검역적으로 중요한 위치를 차지하고 있는 관리급 규제바이러스는 ArMV, TRV, SLRSV였다. 각 바이러스의 검출률은 프리지아에서 FMV가 7.7%. 크로 커스에서 TRV가 3%, 글라디올러스와 무스카리에서는 TRV가 각각 1%, 수선 에서는 ArMV와 SLRSV의 복합감염이 0.1%, TRV의 감염이 0.9%로 조사되었으며, 칼라에서는 TSWV가 0.4%, TRV가 0.3% 검출되었다. 격리재배 검사과정의 수선으로부터 단일병반 분리를 통해 TRV(N158-96)를 순수분리하였으며 이에 대해 지표식물검정, 전자현미경 검경, 혈청학적 검정특성을 조사하였으며 정밀검정 기반을 조성하기위해 PCR 검정을 실시하고 증폭된 DNA 산물에 대해 염기서열을 분석하였다. N158-96 분리주는 Nicotiana occidentalis를 포함한 20여종의 지표식물에 접종하여 생물검정을 실시한 결과, N. occidentalis, N tabacum''''Xanthi NC'''', ''''N. tabacum ''''Samsun NN'''', N. tabacum ''''White burley'''', Tetragonia expansa에 전신감염, Chenopodium quinoa, C. amaranticolor, N. clevelandii, N. glutinosa에 국부감염하였으며, Phaseolus vulgaris를 포함한 11종의 지표식물에서는 병징이 발현되지 않았다. DN법을 이용하여 전자현미경으로 관찰한 결과, 입자는 40nm부터 710nm 사이에 분포하고 있음이 조사되었으며 주로 관찰되는 입자는 50-190nm와 260-290nm였다. TRV에 대한 PCR 검정에서 Robinson의 프라이머 한 쌍을 이용하여 RT-PCR을 실시한 결과, 감염잎으로부터 463bp의 증폭산물이 확인되었으며, 염기서열 분석한 결과 270개의 염기가 결정되었다. 결정된 염기를 기존 염기서열이 알려져 있는 4계통과 비교한 결과 TRV TCM 계통과 가장 상동성이 높은 것으로 나타났다. 아미노산 서열 비교 역시 TCM 계통과 아미노산 한 두개의 차이만 나타났다. 따라서 수입 수선에서 분리된 N158-96 분리주는 네델란드에서 기보고된 튤립 분리주와 동일계통인 TRV TCM 계통으로 추정되었다.
ABSRACT The imported flower bulbs cultivated in the fields of Central Post Quarantine Cultivation Area, National Plant Quarantine Service, Korea during August to December 2003 were evaluated for virus infection the method of ELISA. Lily symptomless virus (LSV) and Arabis mosaic virus (ArMV) were det...
ABSRACT The imported flower bulbs cultivated in the fields of Central Post Quarantine Cultivation Area, National Plant Quarantine Service, Korea during August to December 2003 were evaluated for virus infection the method of ELISA. Lily symptomless virus (LSV) and Arabis mosaic virus (ArMV) were detected from lily, Tomato spotted wilt virus (TSWV) and Tobacco rattle virus (TRV) from cala, ArMV, Strawberry latent ringspot virus (SLRSV) and TRV from narcissus, Freesia mosaic virus (FMV) from freesia, TRV from gladiolus, crocus and muscari, respectively. Among them, ArMV, TRV and SLRSV have the quarantine status of regulated quarantine pests. Detection rates of the virus were 7.7% of FMV on freesia, 3% of TRV on crocus, 1% of TRV on each of gladiolus and muscari, 0.1% of double infection of ArMV and SLRSV, and 0.9% of TRV on narcissus, 0.4% of TSWV and 0.3% of TRV on cala, respectively. A strain of TRV, N158-96, was isolated from narcissus with mosaic symptoms and investigated with the characteristics of host ranges, serology and particle morphology. The strain N158-96 systemically infected on Nicotiana occidentalis, Nicotiana tabacum ''''Xanthi NC'''', ''''N. tabacum ''''Samsun NN'''', N. tabacum ''''White burley'''' and Tetragonia expansa, and locally on Chenopodium. quinoa, C. amaranticolor, N. clevelandii and N. glutinosa respectively. However, 11 indicator plants including Phaseolus vulgaris also showed some biological signs. In an electron microscope study, size of virus particles was in a range of 40nm to 710nm and mainly in that of 50-190nm and 260-290nm long. RT-PCR on the infected leaves for the detection of TRV was carried out with the primers of the Robinson(1992). An expected DNA product of 463bp was amplified and sequenced. The homology of sequenced nucleotieds was identical with TRV TCM strain known from tulip in Netherlands and sequence of amino acid was also highly similar with that of the strain.
ABSRACT The imported flower bulbs cultivated in the fields of Central Post Quarantine Cultivation Area, National Plant Quarantine Service, Korea during August to December 2003 were evaluated for virus infection the method of ELISA. Lily symptomless virus (LSV) and Arabis mosaic virus (ArMV) were detected from lily, Tomato spotted wilt virus (TSWV) and Tobacco rattle virus (TRV) from cala, ArMV, Strawberry latent ringspot virus (SLRSV) and TRV from narcissus, Freesia mosaic virus (FMV) from freesia, TRV from gladiolus, crocus and muscari, respectively. Among them, ArMV, TRV and SLRSV have the quarantine status of regulated quarantine pests. Detection rates of the virus were 7.7% of FMV on freesia, 3% of TRV on crocus, 1% of TRV on each of gladiolus and muscari, 0.1% of double infection of ArMV and SLRSV, and 0.9% of TRV on narcissus, 0.4% of TSWV and 0.3% of TRV on cala, respectively. A strain of TRV, N158-96, was isolated from narcissus with mosaic symptoms and investigated with the characteristics of host ranges, serology and particle morphology. The strain N158-96 systemically infected on Nicotiana occidentalis, Nicotiana tabacum ''''Xanthi NC'''', ''''N. tabacum ''''Samsun NN'''', N. tabacum ''''White burley'''' and Tetragonia expansa, and locally on Chenopodium. quinoa, C. amaranticolor, N. clevelandii and N. glutinosa respectively. However, 11 indicator plants including Phaseolus vulgaris also showed some biological signs. In an electron microscope study, size of virus particles was in a range of 40nm to 710nm and mainly in that of 50-190nm and 260-290nm long. RT-PCR on the infected leaves for the detection of TRV was carried out with the primers of the Robinson(1992). An expected DNA product of 463bp was amplified and sequenced. The homology of sequenced nucleotieds was identical with TRV TCM strain known from tulip in Netherlands and sequence of amino acid was also highly similar with that of the strain.
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