Phosphatidic acid (PA)는 PLD의 하부 산물로, 세포내 다양한 신호 전달과 protein kinase, phosphate등의signalning 을 조절하는 세포내 신호전달의 주요 이차 전령자이다. 본 연구에서 자궁경부암 세포(HeLa cells) 내에서 short-chain (dioctanoyl) ...
Phosphatidic acid (PA)는 PLD의 하부 산물로, 세포내 다양한 신호 전달과 protein kinase, phosphate등의signalning 을 조절하는 세포내 신호전달의 주요 이차 전령자이다. 본 연구에서 자궁경부암 세포(HeLa cells) 내에서 short-chain (dioctanoyl) PA 처리에 의한 Bcl-2발현이 어떤 기전에 의해 일어나는지 규명하고자 하였다. HeLa cells에 diC8PA를 처리하면 Bcl-2발현이 증가하는 것을 확인하였다. 그러나 어떻게 diC8PA가 Bcl-2발현을 조절하는 지는 아직 연구되어 있지 않다. Bcl-2발현에 diC8PA가 어떻게 관여하고 있는지 알아보기 위해 phospholipaseA₂ (PLA₂) 억제제인 mepacrine을 전처리 하여 diC8PA에 유도된 Bcl-2 발현이 억제되는 것을 확인하였고 PA phosphohydrolase (PAP) 억제제인 propranonol에 의해 Bcl-2 발현이 억제 되지 못함을 확인하였다. 이와 같은 결과는 PLA₂가 diC8PA에 의해 유도된 Bcl-2 발현에 중요한 인자임을 알 수 있고, diC8PA는 PLA₂를 경유하여 Bcl-2발현을 조절한다는 것을 암시한다. 본 실험에서 사용한 diC8PA는 arachidonic acid (AA) 를 포함하지 않기 때문에 PLA₂ 경유 AA활성화 경로를 거치지 않고 lysophosphatidic acid (LPA)만을 직접적으로 활성화시킬 것으로 사료된다. 이러한 가정을 확인하고자AA가 없는 PA인 1,2-Dipalmitoyl-sn-Glyceor-3-phosphate (DPPA)를 처리하여 Bcl-2발현이 증가하는 것을 보았고, LPA를 cells에 직접 처리하여 Bcl-2발현이 증가하는 것을 확인하였다. 이와 같은 결과는diC8PA에 의해 유도된 Bcl-2발현이 AA를 통해서가 아닌 LPA와 관련되어 있다는 것을 의미한다. LPA는 다양한 신호전달물질에 영향을 주지만 우리는 그 중에서도 MAPK cascade와 Bcl-2발현의 연관성을 알아보았다. diC8PA에 의해 유도된 Bcl-2발현과 ERK1/2 MAPK의 연관성을 확인하기 위해 MEK1/2 inhibitor인 PD98059를 전처리 하였다. 그 결과 diC8PA에 의한Bcl-2발현 증가와 ERK1/2 MAPK의 인산화가 PD98059 처리에 의해 모두 억제됨을 확인 하였다. 그리고 LPA처리에 의한 Bcl-2발현 증가와 ERK1/2 MAPK의 인산화 역시 PD98059 전 처리에 의해 모두 억제됨을 확인 하였다. 위 결과를 종합해 볼 때 diC8PA에 의해 유도된 Bcl-2 발현과 LPA-ERK1/2 MAPK pathway와 밀접한 연관성이 있을 것으로 사료된다. 본 연구에서 얻어진 결과의 중요성은 자궁경부암 세포에서 diC8PA에 의해 유도된 대표적인 항 사멸 인자인Bcl-2발현증가가 PLA₂ 와 LPA 를 통한 신호전달과 ERK1/2 MAPK의 인산화를 경유하여 조절됨을 규명한 것이다.
Phosphatidic acid (PA)는 PLD의 하부 산물로, 세포내 다양한 신호 전달과 protein kinase, phosphate등의signalning 을 조절하는 세포내 신호전달의 주요 이차 전령자이다. 본 연구에서 자궁경부암 세포(HeLa cells) 내에서 short-chain (dioctanoyl) PA 처리에 의한 Bcl-2발현이 어떤 기전에 의해 일어나는지 규명하고자 하였다. HeLa cells에 diC8PA를 처리하면 Bcl-2발현이 증가하는 것을 확인하였다. 그러나 어떻게 diC8PA가 Bcl-2발현을 조절하는 지는 아직 연구되어 있지 않다. Bcl-2발현에 diC8PA가 어떻게 관여하고 있는지 알아보기 위해 phospholipaseA₂ (PLA₂) 억제제인 mepacrine을 전처리 하여 diC8PA에 유도된 Bcl-2 발현이 억제되는 것을 확인하였고 PA phosphohydrolase (PAP) 억제제인 propranonol에 의해 Bcl-2 발현이 억제 되지 못함을 확인하였다. 이와 같은 결과는 PLA₂가 diC8PA에 의해 유도된 Bcl-2 발현에 중요한 인자임을 알 수 있고, diC8PA는 PLA₂를 경유하여 Bcl-2발현을 조절한다는 것을 암시한다. 본 실험에서 사용한 diC8PA는 arachidonic acid (AA) 를 포함하지 않기 때문에 PLA₂ 경유 AA활성화 경로를 거치지 않고 lysophosphatidic acid (LPA)만을 직접적으로 활성화시킬 것으로 사료된다. 이러한 가정을 확인하고자AA가 없는 PA인 1,2-Dipalmitoyl-sn-Glyceor-3-phosphate (DPPA)를 처리하여 Bcl-2발현이 증가하는 것을 보았고, LPA를 cells에 직접 처리하여 Bcl-2발현이 증가하는 것을 확인하였다. 이와 같은 결과는diC8PA에 의해 유도된 Bcl-2발현이 AA를 통해서가 아닌 LPA와 관련되어 있다는 것을 의미한다. LPA는 다양한 신호전달물질에 영향을 주지만 우리는 그 중에서도 MAPK cascade와 Bcl-2발현의 연관성을 알아보았다. diC8PA에 의해 유도된 Bcl-2발현과 ERK1/2 MAPK의 연관성을 확인하기 위해 MEK1/2 inhibitor인 PD98059를 전처리 하였다. 그 결과 diC8PA에 의한Bcl-2발현 증가와 ERK1/2 MAPK의 인산화가 PD98059 처리에 의해 모두 억제됨을 확인 하였다. 그리고 LPA처리에 의한 Bcl-2발현 증가와 ERK1/2 MAPK의 인산화 역시 PD98059 전 처리에 의해 모두 억제됨을 확인 하였다. 위 결과를 종합해 볼 때 diC8PA에 의해 유도된 Bcl-2 발현과 LPA-ERK1/2 MAPK pathway와 밀접한 연관성이 있을 것으로 사료된다. 본 연구에서 얻어진 결과의 중요성은 자궁경부암 세포에서 diC8PA에 의해 유도된 대표적인 항 사멸 인자인Bcl-2발현증가가 PLA₂ 와 LPA 를 통한 신호전달과 ERK1/2 MAPK의 인산화를 경유하여 조절됨을 규명한 것이다.
Phosphatidic acid (PA), the product of PLD-mediated reaction, is lipid second messenger that participates in various intracellular signaling events and regulates a growing list of signaling protein, including several protein kinases and phosphatases. We found that Bcl-2, anti-apoptotic protein, was ...
Phosphatidic acid (PA), the product of PLD-mediated reaction, is lipid second messenger that participates in various intracellular signaling events and regulates a growing list of signaling protein, including several protein kinases and phosphatases. We found that Bcl-2, anti-apoptotic protein, was upregulated by short-chain PA (dioctanoyl; diC8) treatment in HeLa cell. However, how diC8PA upregulates Bcl-2 expression has not been studied yet. In this study, we tried to find out the mechanism of Bcl-2 up- regulation by diC8PA treatment in HeLa cell. Treatment with diC8PA resulted in significantly increased expression of Bcl-2 in HeLa cell. Moreover diC8PA-induced Bcl-2 expression was blocked by mepacrine, an inhibitor of phospholipase A2 (PLA2), whereas enhanced rather by propraonol, an inhibitor of diC8PA phospholydrolase (PAP). These results indicated that PLA2 is very important enzyme for PA-induced expression of Bcl-2. Treatment of 1,2-Dipalmitoryl-sn-Glycero-3-phosphate (DPPA) instead of diC8PA also increased Bcl-2 expression indicating that Bcl-2 expression is mediated through lysophosphatidic acid (LPA), not through arachidonic acid. LPA is also known to stimulate the classical MAPK cascade, involving Gi, tyrosine kinase 9 (s)-Grb2/SOS adapter protein, and RasGTPase. To investigate the relation between ERK1/2 MAPK pathway and Bcl-2 expression, we used MEK1/2 inhibitor, PD98059. Pretreatment with PD98059 decreased diC8PA-induced Bcl-2 expression in HeLa cell, indicating that ERK1/2 MAPK was closely related with Bcl-2 expression. In addition, the ERK1/2 MAPK is also associated with LPA-induced Bcl-2 expression. When treated with PD98059, ERK1/2 MAPK activation and LPA-induced Bcl-2 expression were inhibited. Taken together, PLA2 is important in diC8PA-induced Bcl-2 expression by producing LPA which is involved in ERK1/2 MAPK activation.
Phosphatidic acid (PA), the product of PLD-mediated reaction, is lipid second messenger that participates in various intracellular signaling events and regulates a growing list of signaling protein, including several protein kinases and phosphatases. We found that Bcl-2, anti-apoptotic protein, was upregulated by short-chain PA (dioctanoyl; diC8) treatment in HeLa cell. However, how diC8PA upregulates Bcl-2 expression has not been studied yet. In this study, we tried to find out the mechanism of Bcl-2 up- regulation by diC8PA treatment in HeLa cell. Treatment with diC8PA resulted in significantly increased expression of Bcl-2 in HeLa cell. Moreover diC8PA-induced Bcl-2 expression was blocked by mepacrine, an inhibitor of phospholipase A2 (PLA2), whereas enhanced rather by propraonol, an inhibitor of diC8PA phospholydrolase (PAP). These results indicated that PLA2 is very important enzyme for PA-induced expression of Bcl-2. Treatment of 1,2-Dipalmitoryl-sn-Glycero-3-phosphate (DPPA) instead of diC8PA also increased Bcl-2 expression indicating that Bcl-2 expression is mediated through lysophosphatidic acid (LPA), not through arachidonic acid. LPA is also known to stimulate the classical MAPK cascade, involving Gi, tyrosine kinase 9 (s)-Grb2/SOS adapter protein, and RasGTPase. To investigate the relation between ERK1/2 MAPK pathway and Bcl-2 expression, we used MEK1/2 inhibitor, PD98059. Pretreatment with PD98059 decreased diC8PA-induced Bcl-2 expression in HeLa cell, indicating that ERK1/2 MAPK was closely related with Bcl-2 expression. In addition, the ERK1/2 MAPK is also associated with LPA-induced Bcl-2 expression. When treated with PD98059, ERK1/2 MAPK activation and LPA-induced Bcl-2 expression were inhibited. Taken together, PLA2 is important in diC8PA-induced Bcl-2 expression by producing LPA which is involved in ERK1/2 MAPK activation.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.