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이 연구는 유아의 분변으로부터 Bifidobacterium균주를 분리하고 linoleic acid로부터 conjugated linoleic acid를 생산하는 능력을 가진 균주를 선발하기 위하여 실시되었다.
생후 14일에서 100일 미만의 12명의 유아로부터 분변시료를 수집하여 Bifidobacterium 선택배지를 이용하여 400개의 후보균주를 분리하였다. CLA를 생산하는 종 특이적인 성질을 지닌 Bifidobacterium breve를 신속 정확하게 선발하기 위해 duplex ...

이 연구는 유아의 분변으로부터 Bifidobacterium균주를 분리하고 linoleic acid로부터 conjugated linoleic acid를 생산하는 능력을 가진 균주를 선발하기 위하여 실시되었다.
생후 14일에서 100일 미만의 12명의 유아로부터 분변시료를 수집하여 Bifidobacterium 선택배지를 이용하여 400개의 후보균주를 분리하였다. CLA를 생산하는 종 특이적인 성질을 지닌 Bifidobacterium breve를 신속 정확하게 선발하기 위해 duplex PCR 기법을 개발하였고, 16S ribosomal DNA, fructose-6-phosphate phosphoketolase encoding gene(xfp) 그리고 bile salt hydrolase encoding gene(bsh) sequencing과 rapid pulsed field gel electrophoresis(PFGE) 를 이용하여 B. breve를 동정하였다. 400여개의 Bifidobacterium 중 36개의 B. breve를 동정하였고, 12명의 유아 중 2명으로부터만 B. breve를 분리할 수 있었다.
새롭게 분리된 B. breve균주를 대상으로 spectrophotometer를 이용한 CLA 생산율을 확인한 결과, 각 strain 마다 CLA 생산능력에 차이가 있는 것으로 나타났다.
높은 O.D.값을 보이는 균주들을 선발하여 GC를 이용하여 분석한 결과, 유아분변으로부터 분리한 모든 B. breve는 linoleic acid가 conjuged linoleic acid로 전환되는 것을 볼 수 있었고, 각각의 전환율에는 차이가 있었다.
본 연구를 통해 CLA를 생산하는 종 특이적 성질을 지닌 B. breve 균주를 신속 정확하게 분리 할 수 있는 duplex PCR 기법이 확립되었고, 이러한 새로운 기술을 이용하여 선발된 CLA 활성 균주는 향후 기능성 발효유제품의 개발이나 건강기능 식품의 소재로 널리 이용될 수 있을 것으로 기대된다.

Abstract ▼ AI-Helper

This study was carried out to isolate some new strains of Bifidobacterium from fecal materials of neonates and to screen them for the biotransformation activity converting linoleic acid to conjugated linoleic acid (CLA).
Fecal materials were collected from twenty neonates aged between 14 days an...

This study was carried out to isolate some new strains of Bifidobacterium from fecal materials of neonates and to screen them for the biotransformation activity converting linoleic acid to conjugated linoleic acid (CLA).
Fecal materials were collected from twenty neonates aged between 14 days and 100 days and four hundreds of new strains were isolated using a Bifidobacterium selective medium. A duplex PCR technique was developed for the rapid and accurate molecular characterization of the B. breve strains which have been reported to show the species-specific characteristic of CLA production. They are identified by 16S ribosomal DNA, fructose-6-phosphate phosphoketolase encoding gens (xfp), bile salt hydrolase encoding gene (bsh) sequencing and rapid pulsed field gel electrophopresis (PFGE).
Thirty six of four hundreds isolates of genus Bifidobacterium were identified as B. breve and just two out of the twelve neonates were harboring B. breve strains. Each isolates showed the difference in their CLA producing ability by spectrophotometric assay.
All of the positive strains selected on the basis of the O.D. value from spectrophotometric assay were confirmed for their CLA producing activities using gas-chromatographic analysis and their conversion rates were different depending on the strain isolated in this study.
Two new strains of B. breve, IB52 and IB84, were successfully isolated and characterized based on the CLA producing activity and further study is necessary to characterize the enzyme and the gene responsible for the enzyme activity.