목적: 인간 각질세포인 HaCaT 세포주에 대표적인 여드름 유발균인 Propionibacterium acnes와 紫草 추출물을 처리하여 염증 관련 cytokine 유전자의 발현 양상에 미치는 영향과 NF-κB의 세포질에서 핵으로의 이동 양상을 분석하고자 하였다. 실험: 紫草의 항균 효능은 paper disk diffusion test로 측정하였고 세포독성 실험은 XTT assay를 통해 분석하였다. cytokine 유전자의 발현 양상을 분석하기 위해 real time RT-PCR 방법을 사용하였으며, 세포 배양 중에 유리된 ...
목적: 인간 각질세포인 HaCaT 세포주에 대표적인 여드름 유발균인 Propionibacterium acnes와 紫草 추출물을 처리하여 염증 관련 cytokine 유전자의 발현 양상에 미치는 영향과 NF-κB의 세포질에서 핵으로의 이동 양상을 분석하고자 하였다. 실험: 紫草의 항균 효능은 paper disk diffusion test로 측정하였고 세포독성 실험은 XTT assay를 통해 분석하였다. cytokine 유전자의 발현 양상을 분석하기 위해 real time RT-PCR 방법을 사용하였으며, 세포 배양 중에 유리된 TNF-α는 ELISA 방법으로 측정하였다. HaCaT 세포주 배양 중에 관찰된 세포의 형태적인 변화는 도립 위상차 현미경을 이용하여 관찰하였으며, NF-κB의 세포내에서의 전사 인자 활성화는 immunocytochemistry와 confocal microscopy를 통해 분석하였다. 결과: 본 연구에서 사용한 紫草 추출물은 여드름 유발균인 P. acnes에 대한 항균 효과와 HaCaT에 대한 세포 독성은 1,000 μg/ml의 농도까지 관찰되지 않았다. 紫草는 P. acnes에 의해 유발된 염증성 cytokine인 IL-8과 TNF-α mRNA 발현 증가를 감소시키는 효과를 나타냈지만, HaCaT 세포주에서 유리되는 TNF-α의 양에는 영향을 미치지 않았다. 紫草는 P. acnes에 의해 유발된 NF-κB의 세포질에서 핵으로의 이동을 유의성 있게 억제하였다. 결론: 紫草는 인간의 각질세포에서 여드름 유발균에 의해 증가된 염증성 cytokine들의 mRNA 발현 양을 감소시키는 효과와 NF-κB의 세포질에서 핵으로의 이동을 억제하는 효과가 있어서 염증성 여드름 치료에 응용될 수 있을 것으로 판단된다.
목적: 인간 각질세포인 HaCaT 세포주에 대표적인 여드름 유발균인 Propionibacterium acnes와 紫草 추출물을 처리하여 염증 관련 cytokine 유전자의 발현 양상에 미치는 영향과 NF-κB의 세포질에서 핵으로의 이동 양상을 분석하고자 하였다. 실험: 紫草의 항균 효능은 paper disk diffusion test로 측정하였고 세포독성 실험은 XTT assay를 통해 분석하였다. cytokine 유전자의 발현 양상을 분석하기 위해 real time RT-PCR 방법을 사용하였으며, 세포 배양 중에 유리된 TNF-α는 ELISA 방법으로 측정하였다. HaCaT 세포주 배양 중에 관찰된 세포의 형태적인 변화는 도립 위상차 현미경을 이용하여 관찰하였으며, NF-κB의 세포내에서의 전사 인자 활성화는 immunocytochemistry와 confocal microscopy를 통해 분석하였다. 결과: 본 연구에서 사용한 紫草 추출물은 여드름 유발균인 P. acnes에 대한 항균 효과와 HaCaT에 대한 세포 독성은 1,000 μg/ml의 농도까지 관찰되지 않았다. 紫草는 P. acnes에 의해 유발된 염증성 cytokine인 IL-8과 TNF-α mRNA 발현 증가를 감소시키는 효과를 나타냈지만, HaCaT 세포주에서 유리되는 TNF-α의 양에는 영향을 미치지 않았다. 紫草는 P. acnes에 의해 유발된 NF-κB의 세포질에서 핵으로의 이동을 유의성 있게 억제하였다. 결론: 紫草는 인간의 각질세포에서 여드름 유발균에 의해 증가된 염증성 cytokine들의 mRNA 발현 양을 감소시키는 효과와 NF-κB의 세포질에서 핵으로의 이동을 억제하는 효과가 있어서 염증성 여드름 치료에 응용될 수 있을 것으로 판단된다.
Objective: Propionibacterium acnes (P. acnes) is a major pathogenic bacteria for acne vulgaris. This study was performed to evaluate the effects of Lithospermum erythrorhizon extracts on the inflammatory cytokines gene expression by P. acnes in human keratinocytes, HaCaT cell line. Experiment: Anti-...
Objective: Propionibacterium acnes (P. acnes) is a major pathogenic bacteria for acne vulgaris. This study was performed to evaluate the effects of Lithospermum erythrorhizon extracts on the inflammatory cytokines gene expression by P. acnes in human keratinocytes, HaCaT cell line. Experiment: Anti-bacterial activity and cytotoxicity of LE extracts was analyzed by agar plate culture and XTT assay. The cytokines gene expressions were assessed by real time RT-PCR for IL-8, MCP-1 and TNF-α. During the cell culture and treatments, amounts of secreted TNF-α were measured by ELISA. Translocation of transcription factor NF-κB from cytoplasm into nucleus was observed by immunocytochemistry and confocal microscopy. Result: There were no anti-bacterial effects and cytotoxicity as high as 1,000 μg/ml of LE extracts in XTT assay. Transcription levels of inflammatory cytokines, IL-8, MCP-1 and TNF-α were increased by P. acnes in HaCaT. LE extracts decreased the upregulated gene transcription levels. However, amounts of secreted TNF-α were similar in HaCaT cells with P. acnes and LE extracts. Translocation of NF-κB into nucleus by P. acnes was significantly inhibited by LE extracts. Conclusion: From the results of this study, LE extracts have anti-inflammatory effects on HaCaT cells, which decrease the mRNA expressions of IL-8, MCP-1 and TNF-α and inhibit translocation of NF-κB from cytoplasm into nucleus by P. acnes. This anti-inflammatory effects of LE extracts could provide the potential of therapeutic substance for acne vulgaris.
Objective: Propionibacterium acnes (P. acnes) is a major pathogenic bacteria for acne vulgaris. This study was performed to evaluate the effects of Lithospermum erythrorhizon extracts on the inflammatory cytokines gene expression by P. acnes in human keratinocytes, HaCaT cell line. Experiment: Anti-bacterial activity and cytotoxicity of LE extracts was analyzed by agar plate culture and XTT assay. The cytokines gene expressions were assessed by real time RT-PCR for IL-8, MCP-1 and TNF-α. During the cell culture and treatments, amounts of secreted TNF-α were measured by ELISA. Translocation of transcription factor NF-κB from cytoplasm into nucleus was observed by immunocytochemistry and confocal microscopy. Result: There were no anti-bacterial effects and cytotoxicity as high as 1,000 μg/ml of LE extracts in XTT assay. Transcription levels of inflammatory cytokines, IL-8, MCP-1 and TNF-α were increased by P. acnes in HaCaT. LE extracts decreased the upregulated gene transcription levels. However, amounts of secreted TNF-α were similar in HaCaT cells with P. acnes and LE extracts. Translocation of NF-κB into nucleus by P. acnes was significantly inhibited by LE extracts. Conclusion: From the results of this study, LE extracts have anti-inflammatory effects on HaCaT cells, which decrease the mRNA expressions of IL-8, MCP-1 and TNF-α and inhibit translocation of NF-κB from cytoplasm into nucleus by P. acnes. This anti-inflammatory effects of LE extracts could provide the potential of therapeutic substance for acne vulgaris.
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