경골어류 펩티도글리칸 인식 단백질의 유전자클로닝 및 면역활성분석 Molecular Cloning and Characterization of Peptidoglycan Recognition Proteins from the Rockfish, Sebastes schlegeli원문보기
펩티도글리칸 인식 단백질 (PGRP)은 자연면역체계의 일원으로써 무척추동물에서 척추동물에 이르기까지 진화적으로 잘 보존되어 있다. 본 연구에서는 경골어류인 조피볼락 (Sebastes schlegeli)으로부터 2개의 long form PGRP (SsPGRP-L1, SsPGRP-L2)의 유전자를 클로닝하고 재조합 단백질을 이용하여 면역학적 활성을 분석하였다. SsPGRP-L1과 SsPGRP-L2는 각각 466개와 482개의 아미노산으로 이루어져 있으며, C-말단 부분에 PGRP 도메인이 잘 보존되어 있고 amidase 활성과 연관이 있는 4개의 Zn2+-결합 아미노산 잔기 (2His,1Tyr,1Cys)를 포함하고 있었다. 재조합 단백질을 제조하여 SsPGRP의 활성을 측정한 결과, 이들은 펩티도글리칸을 용해하는 amidase 활성 뿐만 아니라, 광범위한 세균에 대한 ...
펩티도글리칸 인식 단백질 (PGRP)은 자연면역체계의 일원으로써 무척추동물에서 척추동물에 이르기까지 진화적으로 잘 보존되어 있다. 본 연구에서는 경골어류인 조피볼락 (Sebastes schlegeli)으로부터 2개의 long form PGRP (SsPGRP-L1, SsPGRP-L2)의 유전자를 클로닝하고 재조합 단백질을 이용하여 면역학적 활성을 분석하였다. SsPGRP-L1과 SsPGRP-L2는 각각 466개와 482개의 아미노산으로 이루어져 있으며, C-말단 부분에 PGRP 도메인이 잘 보존되어 있고 amidase 활성과 연관이 있는 4개의 Zn2+-결합 아미노산 잔기 (2His,1Tyr,1Cys)를 포함하고 있었다. 재조합 단백질을 제조하여 SsPGRP의 활성을 측정한 결과, 이들은 펩티도글리칸을 용해하는 amidase 활성 뿐만 아니라, 광범위한 세균에 대한 항균 활성도 함께 가지고 있었다. 그리고 RT-PCR을 이용하여 발현 패턴을 조사한 결과,SsPGRP-L1과 SsPGRP-L2는 박테리아와 접촉할 가능성이 높은 다양한 조직들에서 발현되는 것을 확인하였다. 이러한 결과들을 종합해보면, 조피볼락 PGRP는 어체 내에 침입한 세균을 제거 (항균 활성)함과 동시에 이 때 방출되는 펩티도글리칸에 의해서 유발되는 과도한 면역반응을 억제 (amidase 활성)함으로써 어류의 생체방어기작에 중요한 역할을 수행할 것으로 예상된다.
펩티도글리칸 인식 단백질 (PGRP)은 자연면역체계의 일원으로써 무척추동물에서 척추동물에 이르기까지 진화적으로 잘 보존되어 있다. 본 연구에서는 경골어류인 조피볼락 (Sebastes schlegeli)으로부터 2개의 long form PGRP (SsPGRP-L1, SsPGRP-L2)의 유전자를 클로닝하고 재조합 단백질을 이용하여 면역학적 활성을 분석하였다. SsPGRP-L1과 SsPGRP-L2는 각각 466개와 482개의 아미노산으로 이루어져 있으며, C-말단 부분에 PGRP 도메인이 잘 보존되어 있고 amidase 활성과 연관이 있는 4개의 Zn2+-결합 아미노산 잔기 (2His,1Tyr,1Cys)를 포함하고 있었다. 재조합 단백질을 제조하여 SsPGRP의 활성을 측정한 결과, 이들은 펩티도글리칸을 용해하는 amidase 활성 뿐만 아니라, 광범위한 세균에 대한 항균 활성도 함께 가지고 있었다. 그리고 RT-PCR을 이용하여 발현 패턴을 조사한 결과,SsPGRP-L1과 SsPGRP-L2는 박테리아와 접촉할 가능성이 높은 다양한 조직들에서 발현되는 것을 확인하였다. 이러한 결과들을 종합해보면, 조피볼락 PGRP는 어체 내에 침입한 세균을 제거 (항균 활성)함과 동시에 이 때 방출되는 펩티도글리칸에 의해서 유발되는 과도한 면역반응을 억제 (amidase 활성)함으로써 어류의 생체방어기작에 중요한 역할을 수행할 것으로 예상된다.
Peptidoglycan recognition proteins (PGRPs) are innate immune molecules that are structurally conserved through evolution in both invertebrate and vertebrate animals. Here we report the identification and characterization of two long forms of PGRP (SsPGRP-L1 and SsPGRP-L2) from the rockfish, Sebastes...
Peptidoglycan recognition proteins (PGRPs) are innate immune molecules that are structurally conserved through evolution in both invertebrate and vertebrate animals. Here we report the identification and characterization of two long forms of PGRP (SsPGRP-L1 and SsPGRP-L2) from the rockfish, Sebastes schlegeli. The deduced amino acid sequences of SsPGRP-L1 and SsPGRP-L2, 466 and 482 residues respectively, contain the conserved PGRP domain and the four Zn2+-binding amino acid residues required for amidase activity. In addition to peptidoglycan-lytic amidase activity, recombinant SsPGRPs have broad-spectrum antimicrobial activity like zebrafish PGRPs. RT-PCR analysis of total RNA shows that the expression patterns of SsPGRP-L1 and SsPGRP-L2 genes are different, though they are widely expressed in the tissues that come in contact with bacteria. Overall, these data suggest that rockfish PGRPs are involved in the innate host defense of S. schlegeli against bacterial infections.
Peptidoglycan recognition proteins (PGRPs) are innate immune molecules that are structurally conserved through evolution in both invertebrate and vertebrate animals. Here we report the identification and characterization of two long forms of PGRP (SsPGRP-L1 and SsPGRP-L2) from the rockfish, Sebastes schlegeli. The deduced amino acid sequences of SsPGRP-L1 and SsPGRP-L2, 466 and 482 residues respectively, contain the conserved PGRP domain and the four Zn2+-binding amino acid residues required for amidase activity. In addition to peptidoglycan-lytic amidase activity, recombinant SsPGRPs have broad-spectrum antimicrobial activity like zebrafish PGRPs. RT-PCR analysis of total RNA shows that the expression patterns of SsPGRP-L1 and SsPGRP-L2 genes are different, though they are widely expressed in the tissues that come in contact with bacteria. Overall, these data suggest that rockfish PGRPs are involved in the innate host defense of S. schlegeli against bacterial infections.
주제어
#Peptidoglycan Recognition Protein Innate immunity Teleost Amidase Antibacterial protein
학위논문 정보
저자
김민영
학위수여기관
경상대학교 대학원
학위구분
국내석사
학과
생물학과
지도교수
조주현
발행연도
2010
총페이지
iv, 38 p.
키워드
Peptidoglycan Recognition Protein Innate immunity Teleost Amidase Antibacterial protein
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